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脂质体佐剂的应用前景

自从1964年第一次制备出脂质作以后,脂质体作为免疫佐剂和药物载体已经在免疫学及其他生物学领域中应用。脂质体作为免疫佐剂,不但能明显延长与其结合抗原的释放时间,而且脂质体经过吞噬作用后,可产生一定数量抗原,供单个抗原于细胞利用。脂质体对体液和细胞免疫都有增强作用。$$一、脂质体的基本组成及特点$$脂质体是由一层或零层同心圆排列的类似于细胞膜的连续膜质双分子组成,内含水相空间。脂质体依其大小和形态可分为多复层质体,小单层脂质体和大单层脂质体三类,包封的水相体积(磷脂mg/ml分别为0.5、4.1和 13.7。抗原依其疏水性的强弱,或掺与脂质双层,或包于水相空间,或与脂成分共价结合等多种形式组装入脂质体,均具有较高的包封效率。$$常规制备脂质体的最佳脂质首先是天然磷脂,即蛋黄卵磷脂和牛脑卵脂酰丝氨酸等。在制备带不同电荷的脂质体时,可加入磷脂酸(负电荷)或硬脂酰胺(正电荷)等。为使膜稳定可在磷脂中加入胆固醇;为避免脂质氧化可加入维生素...  (本文共1页) 阅读全文>>

四川农业大学
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猪白细胞介素2、4分子佐剂对猪口蹄疫疫苗免疫增强作用研究

如何增强动物的抗病防御能力和免疫应答水平,最大限度地提高疫苗的免疫效果是当前我国防制口蹄疫生产实践中迫切需要解决的问题。本研究从分子免疫佐剂的角度出发,设计了猪IL-2、4真核表达质粒分别同口蹄疫疫苗联合免疫猪,观察猪白细胞介素2、4分子佐剂对口蹄疫疫苗免疫效果的影响。采用OIE/FAO口蹄疫世界参考实验室确认的,检测FMDV抗原和血清应优先选用的ELISA法,分别在免疫后0天、15天、30天、60天、90天收集8组共64头猪的血清,检测口蹄疫特异性抗体,比较各组试验猪的体液免疫应答水平。实验结果表明:脂质体+VR1020-IL-4组(B组)抗体滴度和保护率比其它组高:脂质体+VR1020-IL-2组(A组)、B组、免疫加强组(C组)的抗体水平和保护率接近(P>0.05),A组、B组、C组比一次免疫组(D组)、VR1020-IL-2组(E组)、VR1020-IL-4组(F组)、空脂质体组(G组)以及空白对照组(H组)的抗体水平和...  (本文共56页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业大学
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新孢子虫NcSRS2 DNA疫苗的研究

新孢子虫(Neospora caninum)是引起犬运动神经系统疾病的一种顶复合体寄生原虫,并且是世界范围内造成奶牛流产的主要原因。目前,还没有防治新孢子虫病的有效措施。一般认为疫苗免疫是预防奶牛流产和降低经济损失的可行性措施。为此,我们进行了新孢子虫NcSRS2DNA疫苗的研究。根据新孢子虫NcSRS2基因序列,设计了一对含有Kozak序列、Pst Ⅰ和Xba Ⅰ酶切位点的引物。以含有NcSRS2基因的质粒P43为模板,利用聚合酶链反应(PCR)扩增获得NcSRS2 ORF基因片段,用Pst Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切该片段,回收得到含有以上两个酶切位点粘端的NcSRS2 ORF基因,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的pcDNA3.1(+)真核表达载体中,获得重组质粒PcNCSRS2。经PCR鉴定、限制性内切酶分析和克隆片段序列测定、比较,证实了重组质粒的正确性。纯化无内毒素的重组真核表达质粒pcNcSRS2,脂质体介导方法转染哺乳...  (本文共101页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国海洋大学
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淋巴囊肿病毒(Lymphocystis disease virus)核酸疫苗的免疫效果评价及安全性研究

随着人们对水产品需求量的增加,水产养殖业得到了快速发展。但大规模高密度养殖造成的水环境污染,致使水产病害日趋严重,特别是病毒性疾病造成的损失更加惊人。淋巴囊肿病毒(Lymphocystis disease virus, LCDV),属于虹彩病毒科(Iridoviridae)病毒,是在我国养殖牙鲆、真鲷、大菱鲆、军曹鱼以及野生虾祜鱼等多种鱼中暴发的首例病毒。目前,世界上报道的、可被淋巴囊肿病毒感染的鱼类至少有42科、125种以上,其中海水鱼占30科。继南方养殖石斑鱼中发生淋巴囊肿病以来,1997年山东省荣成市养殖牙鲆也发生了此病,后来迅速蔓延到威海、乳山、青岛等主要养殖区;1998年,河北省唐山、乐亭等也大量发生该病毒病。由于鱼类被感染后,其口唇、鳃、鳍、尾及体表各处会长出大小不一的肿瘤,形象丑陋、活力减弱,有直接或间接的死亡,所以造成的经济损失是严重的。当前,我国海水鱼养殖者大多使用化学合成或抗生素类药物“抵抗”疾病,但由于药物...  (本文共151页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
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肌肉生长抑素基因的克隆、表达和基因工程疫苗的研制及在猪体上的应用

肌肉生长抑制激素(myostatin,MSTN)是骨骼肌的负调控因子,是影响肌肉生长与发育的重要因素。为了促进猪生长后期肌肉的快速增长,就需要消除MSTN对肌肉的负调控作用。本研究通过基因工程的手段,从狮头鹅大腿肌肉中获得MSTN作为免疫原,并采用不同的免疫佐剂,制备了肌肉生长抑制激素的基因工程疫苗,对生长肥育猪进行主动免疫,使猪产生抗MSTN抗体,以颉颃体内产生的肌肉生长抑制激素,促进猪肌肉的生长,并分别比较以油乳剂和脂质体为免疫佐剂的两种疫苗免疫效果。1.狮头鹅肌肉生长抑制素基因成熟肽的克隆及其在大肠杆菌中的表达根据扩增的狮头鹅的MSTN基因cDNA全长序列以及成熟肽序列,设计一对引物,并分别在两引物前设计2个酶切位点BamH Ⅰ和Sac Ⅰ,亚克隆狮头鹅肌肉生长抑制激素的成熟肽蛋白编码基因,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,经酶切、PCR鉴定后,构建了狮头鹅原核单纯表达载体pRSETA-MSTN-m,经测序鉴定表明...  (本文共95页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中农业大学
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猪繁殖与呼吸综合征双基因及佐剂活病毒载体疫苗与DNA疫苗研究

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的传染病。PRRS自1987年首次报道发现于美国以来,现已遍及世界各主要养猪国家与地区,并已成为危害养猪业最严重的传染病之一。同其它多数病毒病的防制一样,免疫接种仍是预防与控制PRRS的主要措施。目前用于预防PRRS的主要商用疫苗是传统常规疫苗弱毒疫苗和灭活疫苗。但已证实弱毒苗存在散毒及高几率毒力返强的安全隐患,国外许多国家已禁用弱毒苗。灭活苗尽管安全性较好,但不仅需多次重复接种,而且免疫效果不理想,还经常可导致免疫失败。因此,迫切需要更安全、高效、廉价的新型疫苗来预防和控制PRRS的发生与流行。蛋白转导是新近发展和建立起来的一种富有生命力的新技术。其高效的跨膜转运功能和在细胞间自主传递的特点,为提高新型疫苗免疫效应提供了新的思路和有效手段。目前已证实具有独特蛋白转导特性的来源于a-疱疹病毒亚...  (本文共136页) 本文目录 | 阅读全文>>