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慢病毒的发现

1957年2月,一位哈佛大学毕业生丹尼尔·葛求塞克,到巴布亚新几内亚东部高原弗纳族原始部落进行考察,亲眼见到了一种在医学史上从未记载过的神经系统综合征──库鲁病,并发现它的病原完全不同于人类以往所知的一切病原体。经过详尽调查,他确认这种传染病与当地的陋俗,即吃死去男亲属的大脑作为一种哀悼仪式有关。1965年,他以库鲁病人的脑组织悬液为黑猩猩进行脑内接种,经过20个月的潜伏期,黑猩猩发作了这种疾病。$$葛求塞克...  (本文共1页) 阅读全文>>

吉林大学
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慢病毒介导Med19基因沉默对胃癌细胞生物学行为的影响

[目的]:探讨Med19基因在胃癌组织中的表达,以及应用RNA干扰技术抑制Med19基因表达对胃癌细胞生物学行为的影响。[方法]:检测胃癌组织中Med19的表达并分析其与胃癌临床病理的关系,利用基因重组技术构建靶向Med19的shRNA慢病毒载体,感染胃癌SGC7901和MGC803细胞,检测Med19 mRNA及蛋白抑制效率,并观察其对胃癌细胞增殖、周期和克隆形成能力的影响。[结果]:胃癌组织中的Med19的表达显著高于癌旁组织,与肿瘤的大小、细胞分化程度及TNM分期相关。重组shRNA慢病毒载体能有效感染胃癌细胞,下调Med19基因的表达,并抑制肿瘤细胞增殖,使细胞周期阻滞于G1期,克隆形成能力显著减弱,但对肿瘤的侵袭转移没有明显的影响。[结论]:Medl9在肿瘤组织中特异性高表达可能是胃癌形成的一个原因,慢病毒介导的RNAi能有效沉默胃癌细胞Med19基因及蛋白表达,抑制体内胃癌细胞增殖并影响细胞周期,有望成为肿瘤基因治疗...  (本文共112页) 本文目录 | 阅读全文>>

西北农林科技大学
西北农林科技大学

线粒体抗病毒信号蛋白在猪瘟病毒感染中的作用及病毒免疫逃逸机制的研究

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起猪的一种急性烈性传染病,以高热、全身组织弥散性出血和免疫抑制为主要特征,给养猪业造成了巨大的经济损失。天然免疫应答作为机体抗病毒感染的第一道防线,发挥着重要的作用。CSFV在感染过程中能抑制宿主细胞的免疫应答,从而维持自身的持续性感染。因此,深入研究CSFV与天然免疫应答的相互作用,有助于进一步理解宿主抵抗CSFV的机制,以及CSFV逃逸宿主天然免疫应答的机理,为猪瘟的防控提供理论基础。线粒体抗病毒信号蛋白(Mitochondrial antiviral-signalling protein,MAVS)作为一种接头蛋白,在调节宿主天然免疫信号通路过程中发挥重要的作用。视黄酸诱导基因蛋白I(RNA helicases retinoic acid-inducible gene I,RIG-I)...  (本文共111页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
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慢病毒载体介导的RNAi特异性沉默猪Myostatin基因的研究

Myostatin (MSTN)是肌肉生长抑制素,又称GDF-8,属于TGF-β超家族成员。该基因已被证明是是肌肉生长的负调控因子。自发突变或遗传操作(敲除或下调)造成的MSTN失活,已经被报道可以增加许多种动物的骨骼肌数量。RNA干扰(RNAi)是dsRNA介导的一种序列特异性的转录后基因沉默(PTGS)现象。RNAi技术的出现为研究基因功能提供了一种快速而有效的基因敲除方法。病毒载体已经被开发用于在哺乳动物细胞中递送siRNA,其中利用慢病毒载体表达shRNA则是获得稳定RNA干扰的非常有效的办法。靶向1myostatin的RNA干扰策略将可能用于增加动物的骨骼肌数量。因此,本研究拟探索用慢病毒载体表达shRNA沉默猪胎儿成纤维细胞中myostatin基因的可行性,为深入研究myostatin在猪的骨骼肌发育过程中的作用提供一些细节。通过这一策略,先用表达特异性shRNA的DNA载体瞬时转染PEF细胞,结果成功地抑制了细胞中...  (本文共76页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
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猪圆环病毒Ⅱ型诱导Ⅰ型干扰素产生的信号途径

猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)是一个小的共价闭合的单股环状负链DNA病毒。该病毒是断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemic syndrome, PMWS)的主要病原,另外它与多种猪病密切相关,如繁殖障碍、肉芽肿性肠炎、猪皮炎肾病综合征等,给养猪产业造成巨大经济损失。本研究首先通过TMT标记的定量磷酸化蛋白组技术,对PCV2作用猪肺泡巨噬细胞(pulmonary alveolar macrophages, PAMs) 6 h后的差异磷酸化蛋白进行分析,共发现了 213个差异表达磷酸化蛋白;其中线粒体抗病毒信号(mitochondrial antiviral signaling protein, MAVS )磷酸化蛋白显著上调,提示PCV2引发先天免疫激活;进一步研究发现髓样分化因子88 (myeloid differentiation prima...  (本文共158页) 本文目录 | 阅读全文>>

内蒙古农业大学
内蒙古农业大学

马传染性贫血病毒受体选择剪接变异体的鉴定及功能性研究

病毒特异性的细胞受体是病毒入侵细胞的门户,决定病毒的宿主范围、组织及细胞嗜性。从受体角度阐明病毒入侵机制,是病毒性疾病的药物研发及疫苗研制的重要方面。选择性剪接可使同一基因编码出功能不同蛋白,选择性剪接对满足生物体复杂性所需蛋白多样性具有重要意义。鉴定不同选择性剪接变异体的功能已成为生物学界研究的热点。马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus, EIAV)受体(ELR1)是2005年Zhang等通过克隆表达技术发现的,其属于肿瘤坏死因子受体(TNFR)蛋白家族,本研究在原代培养的马的单核巨噬细胞上克隆ELR1的过程中,发现其mRNA基因序列存在选择性剪接形式,即其cDNA序列除所报导的序列ELR1外,还存在插入序列ELR1-IN和缺失序列ELR1-DE,ELR1-IN在已公布的序列的786-787位之间插入153bp,ELR1-DE型序列缺失了所公布序列415-478位64bp。不论序列的插...  (本文共105页) 本文目录 | 阅读全文>>