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修复软骨 骨髓基质细胞是最佳种子

本报讯(记者王雪飞通讯员张秀花)软骨下骨板穿透术、硅橡胶移植、软骨细胞移植、干细胞移植……经过长达20余年的系列临床研究,北京大学第三医院运动医学研究所在软骨损伤的临床治疗中“多管齐下”,取得重要进展,在国内处于领先水平。$$ 软骨损伤的治疗是关节外科的难题之一。北京大学第三医院运动医学研究所的经验证明,理化性能良好的硅橡胶可以用于修复关节软骨的局限缺损,20余年的随访表明临床效果满...  (本文共1页) 阅读全文>>

权威出处: 健康报2004-08-27
《中国组织工程研究》2012年41期
中国组织工程研究

构建人端粒酶催化亚单位基因慢病毒表达载体转染人骨髓基质细胞

0引言骨髓基质细胞是源于骨髓的一种成体干细胞,在目前的细胞治疗研究中占有重要的地位。骨髓基质细胞在骨髓中的数量稀少,因此在应用于细胞移植治疗时必须进行体外扩增以获得足够多的细胞。然而,骨髓基质细胞同大多数的成体细胞一样,会发生衰老[1],主要表现在两个方面:①随年龄增长,骨髓基质细胞的数量和质量均有明显下降。②骨髓基质细胞在体外传代过程中,细胞形态会逐渐发生变化(由细梭形变成宽扁平状),细胞的增殖能力、分化潜力、乃至向病灶区归巢的能力均会逐渐丧失[2]。骨髓基质细胞发生衰老的机制尚不清楚,但目前已知的一个重要原因是骨髓基质细胞不表达端粒酶[3]。人端粒酶是一种核糖核蛋白,其最重要的两个组份是人端粒酶催化亚单位(human telomerase catalytic subunit,hTERT)和模板RNA,其中模板RNA持续表达,而hTERT在大部分成体细胞中并不表达。端粒酶不同于一般的DNA聚合酶,它是一种专一的反转录酶,用自身...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国组织工程研究与临床康复》2011年40期
中国组织工程研究与临床康复

慢病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞

0引言人骨髓基质细胞(human bone marrow stromal cells,hBMSCs)因获取相对容易,具有多分化潜能而在多种退行性疾病治疗中有广泛应用[1-2]。但是对人原代BMSCs的转染由于转染困难,效率低而一直是个困扰研究者并限制其研究应用的问题[3-5]。慢病毒基因载体是由Ⅰ型人免疫缺陷病毒改造的新型病毒载体,作为一种高效的基因转染载体应用越来越广泛,经多次修饰改造其转导效率和安全性都得到了保证[6]。本实验用慢病毒转染增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP基因到hBMSCs,观察细胞在体外、体内表达目的基因的情况,探讨慢病毒介导EGFP基因修饰hBMSCs的可行性。1材料和方法设计:随机对照的细胞学观察实验。时间及地点:于2010-09/12在珠江医院医院神经外科实验室完成。材料:临床志愿者1名,女性,66岁,健康,转染率(%)=暗视野所见发绿色...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国厂矿医学》2008年04期
中国厂矿医学

脂质体方法转染人骨髓基质细胞的影响因素

骨髓基质细胞是骨髓造血微环境的重要组成部分,又被称为间质干细胞。其易于体外分离和扩增,具有广泛迁移和多向分化的能力,可在一定时间表达外源性目的基因蛋白,而且回输体内后归巢于骨髓并能长期存活,是基因治疗中最有前景的靶细胞(’〕。本实验旨在探讨和分析用脂质体介导的方法转染人骨髓基质细胞的影响因素。材料和方法1.1材料骨髓标本来源于吉林大学第一医院血液科骨髓检查正常的健康志愿者。peDNA3质粒受赠于吉林大学第一医院中心实验室,pBLAST一s日t一1质粒、U训fecfa而neZ。《x〕购于Lwitrogen公司,各EHSA试剂盒均购于北京晶美公司,各限制性内切酶均购于TaKara公司,Pe二oll分离液购自Phar- macia公司,DMEM一LG培养基购自GibC。公司,余溶液及培养基均为吉林大学第一医院血液肿瘤科实验室自配。1.2实验方法1 .2.1构建重组质粒s八一1,一peDNA3以PBLAST-sn一1质粒为模板,引物:上...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中西医结合心脑血管病杂志》2006年11期
中西医结合心脑血管病杂志

骨髓基质细胞及其治疗中枢神经系统疾病的研究进展

近年来,骨髓基质细胞(bone marrowstromal cells,BMSCs)越来越受到医学界的关注。BMSCs多潜能性的发现和向神经细胞方向定向分化的成功,为神经干细胞的来源增加了一个新的途径,也为实现自体神经干细胞移植方案提供了很好的思路,而且BMSCs定向诱导分化为神经元的研究也将对神经系统发育机制研究具有重要意义。骨髓基质细胞较其他干细胞有明显优势:①取材方便,无伦理争议;②培养增殖速度快,短期内可大量扩增;③可通过血脑屏障到达脑内各部位;④动物实验同种异体移植或异种移植都未出现免疫排斥反应;⑤容易转入外源基因。因此,BMSCs是一种理想的组织工程干细胞,作为神经系统疾病治疗或基因治疗的种子细胞,势必有更广泛的应用前景。1骨髓基质细胞的生物学特性1.1骨髓基质细胞的分离纯化培养人们很早就猜测骨髓中不只含有造血细胞,Conhei m最早提出了骨髓中存在BMSCs的观点[1]。1976年Friednstein等观察到其...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国临床康复》2005年30期
中国临床康复

胰岛素样生长因子Ⅱ基因转染骨髓基质细胞后的生物学活性

0引言骨组织工程如何获取永生化(无限传代)且无肿瘤化倾向的种子细胞成为目前研究的瓶颈。目前比较一致的观点是对其进行基因修饰,以获得有较强增殖能力的细胞。胰岛素样生长因子Ⅱ是骨基质中最丰富的生长因子之一,能有效刺激骨的生成[1]。本实验以重组人胰岛素样生长因子Ⅱ基因作为目的基因,将其转染骨组织工程中的首选种子细胞-骨髓基质细胞,观察转基因的表达以及基因表达产物的生物学活性,为种子细胞的基因改造奠定基础。1材料和方法设计:单一样本的观察对比实验。单位:解放军总医院骨科研究所。材料:实验于2004-08/12在解放军总医院骨科研究所完成。含人胰岛素样生长因子Ⅱ全长cD N A的真核细胞表达载体pcD N A3-胰岛素样生长因子Ⅱ质粒(本室构建);脂质体、G418(美国G ibco公司);SA BC免疫组织化学试剂盒(武汉博士德生物公司);Ⅰ型胶原单克隆抗体(北京中山试剂公司);雄性新西兰大白兔(解放军总医院实验动物中心提供,合格证号:...  (本文共4页) 阅读全文>>