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美开发细胞内蛋白质相互作用标识技术

本报华盛顿11月12日电 美国科学家开发出一种利用微小荧光分子快速发现和识别活细胞中蛋白质相互作用的新技术。该技术避免了旧方法中可能产生生物破坏的缺陷,相关内容发表在新出版的《自然:化学生物》杂志上。 $$通常,人们利用不同的绿荧光蛋白质(GFP)来为其它蛋白质做标识。但是绿荧光蛋白质不仅大,而且对许多活细胞具有毒性,因此难以用于研究活细胞。此外,绿荧光蛋白质还往往会自动聚集,让研究人员不容易利用和观察它们。 $$美国耶鲁大学化学教授阿兰娜?谢葩紫领导的研究小组利用名为“profluorescent”的荧光小分子而不是荧光蛋白质,开发出了新的标识技术。荧光小分子能十分容易地进入活细胞,并在蛋白质内与氨基酸标识序列“捆绑”后发出荧光。新技术让研究人员能够...  (本文共1页) 阅读全文>>

权威出处: 科技日报2007-11-14
《生命科学仪器》2007年12期
生命科学仪器

美开发细胞内蛋白质相互作用标识技术 可用于诊断帕金森等神经退化疾病

美国科学家开发出一种利用微小荧光分子快速发现和识别活细胞中蛋白质相互作用的新技术。该技术避免了旧方法中可能产生生物破坏的缺陷,相关内容发表在新出版的《自然:化学生物》杂志上。通常,人们利用不同的绿荧光蛋白质(G FP)来为其它蛋白质做标识。但是绿荧光蛋白质不仅大,而且对许多活细胞具有毒性,因此难以用于研究活细胞。此外,绿荧光蛋白质还往往会自动聚集,让研究人员不容易利用和观察它们。美国耶鲁大学化学教授阿兰娜·谢葩紫领导的研究小组利用名为“profluorescent”的荧光小分子而不是荧光蛋白质,开发出了新的标识技术。荧光小分子能十分容易地进入活细胞,并在蛋白质内与氨基酸标识序列“捆绑”后发出荧光。新技术让研究人员能够更准确地了解单个...  (本文共1页) 阅读全文>>

《湖北医药学院学报》2014年02期
湖北医药学院学报

双分子荧光互补在蛋白质相互作用中的应用

生物体是一个复杂的有机体,是物质运动的高级形式,这种运动方式是通过蛋白质来实现的。人体的生长、发育、运动、遗传、繁殖等一切生命活动都离不开蛋白质。生命活动中各项功能和行为并不是由单一的蛋白质来完成的,蛋白质间的相互作用以及功能、构象变化参与和影响着生命的全过程,因此深入理解蛋白质相互作用,研究出蛋白质相互作用网络是揭示生命活动奥秘的前提。基于生物化学、微生物学、分子生物学、生物物理学和生物信息学的知识和技术,已经建立了多种研究蛋白质相互作用的方法。目前常用的研究蛋白质相互作用的方法有:GST沉降实验(GST-pull down)、串联亲和纯化、免疫共沉淀、酵母双杂交、化学交联、荧光能量共振转移和双分子荧光互补实验等。本文综述了双分子荧光互补技术(bimolecular fluorescence complementa-tion,BiFC)的起源、原理、发展以及在研究蛋白质相互作用中的应用。1双分子荧光互补的起源绿色荧光蛋白(gr...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国生物工程杂志》2012年04期
中国生物工程杂志

糖-蛋白质相互作用在酶固定及蛋白质识别与分离中的应用

糖类化合物是生物体内除了蛋白质和核酸外的一类重要的生物分子,但与蛋白质或核酸相比,糖类研究还处于较落后的状态。近年来糖类在生物体内的重要性越来越为人们所认识,与此同时也注意到糖类的生物合成、降解和利用乃至生物功能的发挥无不与蛋白质有关。而且糖类的分离纯化以及结构研究也都离不开有关的蛋白质,所以研究糖与蛋白质的相互作用很有必要性。近些年来糖-蛋白质相互作用的本质研究越来越受到人们的重视,并通过这种相互作用在生命过程中扮演的重要角色,比如从细胞黏附、病原体感染、植物与病原菌相互作用、豆科植物与根瘤菌共生过程、细胞凋亡、受精过程、癌细胞异常增生及转移和免疫反应等[1]方面来更加深入地认识糖-蛋白质相互作用的原理。并依据这种特殊的糖-蛋白质相互作用来研究探索生命的新知识。近些年来糖-蛋白质相互作用在酶的固定方面的应用,以及在蛋白质的识别和分离方面的应用的报道越来越多,本文对这些应用做了简单的总结。1应用于酶的固定酶的固定化研究始于20世...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中国分子心脏病学杂志》2008年02期
中国分子心脏病学杂志

蛋白质与蛋白质相互作用研究技术

蛋白质间相互作用是细胞各种基本功能的主要完成者,参与几乎所有的重要生命活动。因此,蛋白质一蛋白质相互作用研究以及建立相互作用关系的网络图,具有十分重要的意义,也是目前蛋白质研究领域的热点。如何能高通量、大规模地筛选相互作用的蛋白质,从而绘制出蛋白质相互作用图谱,帮助我们了解这些蛋白质的功能,给实验技术提出巨大挑战,从而促进蛋白质一蛋白质相互作用技术的进步和完善[‘]。1酵母双杂交系统(The two一hybrid system 1.1酵母双杂交系统的原理:酵母双杂交系统由st耐叮Fielas和oK一k列song等人[’]基于对酵母转录因子GAIA的认识,在研究真核基因转录调控中创建的一种分子生物学方法。GAM由结构上可以分开、功能上相互依赖的2个结构域组成:位于N端DNA结合域(DNA binding domain,DNA一BD)和位于C端转录激活域(Aetivati。。dom苗n,DAN一AD)。DNA一BD或AD单独作用不能...  (本文共5页) 阅读全文>>

《长春大学学报》2007年04期
长春大学学报

蛋白质相互作用的研究方法及进展

蛋白质控制和调节细胞中诸多的生命活动,尽管有一些蛋白质主要以单体的形式发挥作用,但有很大一部分蛋白质,却是通过与别的配体结合或作为一个大的生物复合体中的一部分来参与细胞中的生命活动[1]。因此,了解细胞的功能必须从在孤立情况下和在与别的蛋白质分子相互作用的情况下两个层次上来认识蛋白质的功能。1已经用于鉴定和表征蛋白质间相互作用的一些标准技术1.1用GST融合蛋白研究蛋白质相互作用以GST融合蛋白为探针来鉴定蛋白质,能用新蛋白大规模筛选文库以鉴定新的相互作用,以及确定某些相互作用的蛋白质上的特定区域,虽然这种方法产生的结果是定性的,但是,GST融合蛋白可用于高度定量及复杂的分析中。1.2通过免疫共沉淀鉴定相互作用蛋白质当细胞在非变性条件下裂解时,完整细胞内许多蛋白质之间的结合保持下来,这一事实可用于检测和确定生理条件下相关的蛋白质之间的相互作用。利用该方法检测蛋白质之间的相互作用要求在一系列的清洗过程中保持复合体不变,因而该方法可...  (本文共4页) 阅读全文>>