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上海基因小鼠身世探秘

$T从2001年4月上海南方模式生物研究中心筹建至今,已接到了14份合作协议、100万元的订单,出售的商品只有一种:基因老鼠。$$要不是记者亲眼所见,绝对想像不到老鼠会过着如此优越的生活,它们居住在每立方厘米仅1万粒尘埃的超清洁房子里,吃的食物、喝的水、住的笼子都经过高压高温消毒,连每天的白天和黑夜都经程序控制若,各为12小时,分秒不差。$$在普通人的眼中,一只基因老鼠最高3万美元的售价令人咋舌;在科学家的眼中,这些基因老鼠不同一般,将代替人类承担转基因和基因剔除的实验.帮助找到克服绝症、大病的方法。$$近日,这个由国内规模最大的“基因小鼠”基地建立起的技术平台,在张江通过专家验收。$E$$老鼠“祖宗”一年出生60种$$就像人类有白人、黑人、黄种人等,老鼠也有种族之分,每种基因老鼠,就可能是一种品系的“老鼠祖宗”,与正常老鼠相比,这些“祖宗”身上的基因或多或少,虽说外貌相似,但身体结构已发生变化,世上绝无仅有。$$“老鼠祖宗”也...  (本文共2页) 阅读全文>>

权威出处: 辽宁日报2003-01-31
第二军医大学
第二军医大学

规范化基因剔除小鼠技术体系的研究

基因剔除小鼠的技术体系是生命科学研究,尤其是人类基因组计划和医学实验动物模型等领域所急需的关健技术。基因剔除小鼠的建立是一项复杂的系统工程,本研究对基因剔除小鼠技术体系的关键技术环节进行了完善和规范:优化了ES细胞的基本培养条件;应用条件培养液筛选、富集高嵌合潜能的ES细胞;成熟嵌合体的制备技术提高嵌合体的制备效率;改变胚胎的移植方式提高移植胚胎的产仔率等等,建立了一套高效的嵌合体制备体系。在此基础上,本研究还进行了小鼠糖皮质激素受体基因、核孔蛋白155基因和常染色体显性遗传型多囊肾病基因1基因剔除小鼠的研究,并分别获得了嵌合鼠。本研究还进行了诱导型基因剔除小鼠配套的Cre转基因小鼠的制备及Cre重组酶体外活性的检测。  (本文共106页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)
中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)

γ-氨基丁酸转运蛋白亚型Ⅰ(GAT1)基因剔除小鼠系的建立与表型分析

(第一、第二章)GAT1基因剔除与酒精的行为作用γ-氨基丁酸能系统(GABAergic system)参与调节多种酒精体内作用的事实已经被广泛接受。在哺乳动物的中枢神经系统中,GABA转运蛋白亚型1(GABA transporter subtype 1,GAT1)通过其对GABA的高亲和的重摄取功能(reuptake)调节神经细胞外(突触间隙)神经递质GABA的平衡浓度,从而对保持正常的GABAergic系统功能起着非常重要的作用。本文中,我们利用传统的同源重组方法获得GAT1基因剔除小鼠,PCR和Southern-blot证明纯合子小鼠的GAT1基因缺失,RT-PCR、Western-blot证实纯合子小鼠脑中没有GAT1基因的表达,体外突触体重摄取实验证实纯合子小鼠的GABA重摄取能力显著下降;采用多种行为模型在GAT1基因缺失的杂合子和纯合子小鼠上酒精作用的变化。这些测试包括:酒精、糖精和奎宁溶液的饮用量和偏爱;酒精诱导的...  (本文共101页) 本文目录 | 阅读全文>>

皖南医学院
皖南医学院

ApoM基因剔除小鼠模型构建及其在胰岛素抵抗信号通路中的作用研究

第一部分ApoM基因剔除小鼠模型的构建目的:Crispr/Cas9技术是用于靶向编辑细胞和动物基因组的重要方法。为探究ApoM对糖代谢的影响,本研究采用Crispr/Cas9技术构建ApoM基因敲除的杂合子小鼠模型(ApoM+/–小鼠),将其与野生型的C57BL/6J(ApoM~(+/+)小鼠)小鼠进行合笼繁育,获得敲除ApoM基因的纯合子小鼠模型(ApoM~(–/–)小鼠)。方法:利用基因组靶向编辑技术Crispr/Cas9,针对ApoM基因外显子ATG之后的共有序列设计导向核糖核苷酸(g RNA)。利用Not I位点将Cas9质粒线性化,分别通过相应的试剂盒在体外进行转录并纯化,将纯化后的样品稀释后注射到来自C57BL/6J雌鼠的受精卵的胞质中,并将受精卵移植到同品系假孕小鼠输卵管内。待孕鼠产仔后,剪尾进行基因型鉴定。根据测序结果,选取基因序列移码的小鼠与野生型小鼠交配,获得子代小鼠,经尾基因型鉴定,并根据测序结果验证Apo...  (本文共96页) 本文目录 | 阅读全文>>

《第二军医大学学报》2003年02期
第二军医大学学报

凝血因子Ⅸ基因剔除小鼠近交系的建立

血友病 B是 X连锁隐性遗传的出血性疾病。1 997年 Stafford等 [1]采用凝血因子 ( F )基因剔除法建立了血友病 B小鼠动物模型 ,并于同年 9月由复旦大学遗传学研究所引种至我校实验动物中心保种。 F 基因剔除小鼠现已广泛应用于基因治疗及F 在体内突变功能的研究[2~ 4] ,而遗传性状均一、通过生殖系稳定遗传的纯合子 F 基因剔除小鼠近交系培育的工作国内外尚未见报道[5,6] 。我们自1 997年 1 0月起开始此项研究工作 ,经 PCR鉴定、F 活性、血浆凝血酶原时间 ( PT)、白陶土部分凝血活酶时间 ( KPTT)测试 ,结果表明本研究成功建立了 F 基因剔除小鼠近交系 ,该品系小鼠遗传性状稳定、血液学指标明确 ,小鼠临床症状显著。1 材料和方法1 .1  F 基因剔除小鼠 血友病 B基因剔除小鼠由美国北卡罗莱那大学生物系 Stafford博士构建并惠赠 ,小鼠为 C5 7BL/6J品系 ,毛色呈黑色 ...  (本文共3页) 阅读全文>>

《上海实验动物科学》2002年04期
上海实验动物科学

凝血因子Ⅸ基因剔除小鼠的生长繁育和主要血液学指标观测

血友病B是x连锁隐性遗传的出血性疾病。1997年stafford[’’等采用凝血因子Ⅸ基因剔除法建立血友病B小鼠动物模型,并于同年11月由复旦大学遗传所引种至我校动物中心保种,国内未见有关基因剔除小鼠的饲养、保种及血液学指标测定等生物学特性的报道,通过近四年的定向培育,遗传符合孟德尔遗传定律,基因能稳定遗传,而且临床症状与人类血友病B相似。该鼠已广泛应用于基因治疗研究,且用于凝血因子Ⅸ基因在体内突变功能的研究,是基因治疗临床前研究良好的动物模型[2]。 凝血因子Ⅸ基因剔除小鼠目前已培育到第十二代,现将饲养管理及繁殖性能、血液生理、生化指标等生物学特性报告如下:1材料和方法1.1基代来源 凝血因子Ⅸ基因剔除小鼠由美国北卡罗林那大学生物系Stafford博士构建并惠赠,来源于近交小鼠C57BI,/6J,毛色呈黑色,雌雄一对,1997年7月4日出生。1.2饲养环境 . 本校清洁级动物实验室(合格证号为医动字第02~25号),每周三次打...  (本文共3页) 阅读全文>>