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四军医大首次构建成永生化胚胎肝细胞系

本报陕西讯 第四军医大学唐都医院感染病中心李羽博士等采用脂质体转染法,在国内首次构建成功一株“永生化胚  (本文共1页) 阅读全文>>

《广州医学院学报》1989年01期
广州医学院学报

肝细胞转化中细胞骨架的改变

用组织化学染色法显示新生大鼠肝细胞和诱发转化细胞的细胞骨架。正常肝上皮细胞呈现直的纤维细丝状、成束平行,整齐排列,由核向四周放射,布满于整个细胞质中...  (本文共5页) 阅读全文>>

上海交通大学
上海交通大学

SUMO特异蛋白酶3在非酒精性脂肪肝中的作用及机制研究

目的:非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种以肝细胞内过量脂质堆积为特点的临床综合征。SUMO(small ubquitin-like modifier)特异蛋白酶SENPs参与去SUMO化修饰,SUMO特异蛋白酶3(SUMO-specific protease 3,SENP3)对应激产生快速应答,在许多生命过程中发挥重要作用。本研究的目的是明确SENP3在非酒精性脂肪性肝病发生过程中的作用并探索SENP3参与脂代谢的机制。方法:首先在NAFLD临床肝脏标本、NAFLD动物模型肝脏、细胞模型中分别检测SENP3的表达变化。然后,在肝细胞中过表达或敲低SENP3的表达水平,观察FFA诱导下肝细胞内脂质堆积的程度变化。之后,使用RNA-seq高通量测序寻找SENP3调控肝细胞脂肪变性相关的基因。结合生物信息学分析得到差异基因,在肝细胞水平使用qRT-PCR验证其准确...  (本文共118页) 本文目录 | 阅读全文>>

扬州大学
扬州大学

鸡源Shp-2的克隆表达、单抗研制以及敲除Shp-2的鸡肝细胞系构建

Src同源区2(SH2)蛋白酪氨酸磷酸酶2(Shp-2)是一种非受体酪氨酸磷酸酶,在各种脊椎动物的细胞中普遍表达,参与细胞的分化等多种生物学功能的调控及信号转导过程。作为原癌基因PTPN11编码的酪氨酸磷酸酶,Shp-2的表达及其活性改变已被证明与造血细胞的恶性增生、儿童白血病及多种人的恶性肿瘤疾病有关。然Shp-2在禽类疾病中所起的作用研究鲜见报道。为探究鸡源Shp-2功能及其在相关疾病中作用,本研究在克隆、表达了鸡源Shp-2基因的基础上,研制出了针对鸡Shp-2的特异性单克隆抗体,且利用CRISPR-Cas9技术建立了稳定敲除Shp-2的鸡肝细胞系。1、鸡Shp-2基因克隆及表达为获得用于制备抗鸡Shp-2单克隆抗体的免疫原和筛选抗原,本研究将Shp-2基因克隆至线性化载体pGEX-6p-1和pcDNA3.1上,成功构建了 Shp-2原核表达载体pGEX-6P-1-Shp-2 及真核表达载体 pcDNA3.1-Shp-2。...  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

广西医科大学
广西医科大学

PP2A在微囊藻毒素-LR诱导的肝细胞早衰中的作用研究

微囊藻毒素(Microcystins,MCs)是由富营养化水体中的铜绿微囊藻、水华鱼腥藻、颤藻等产生的一组具有肝脏毒性的单环多肽毒素。目前已知有90多种异构体,微囊藻毒素-LR(MC-LR)是其中分布最广、毒性最强的一种异构体。研究表明,MC-LR可以通过主动转运的方式进入肝细胞导致细胞氧化损伤。它能抑制真核细胞丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶PP1和PP2A的活性,引起蛋白磷酸化水平升高。细胞衰老(cellular senescence)是指细胞进入稳定不可逆转的细胞周期停滞状态,并被免疫系统清除的过程。细胞衰老分为复制型衰老(replicative senescence)和早衰,前者是因细胞复制过程中端粒耗损产生,而细胞早衰(cellular premature senescence)是细胞受到DNA损伤、缺氧或代谢应激,抑或肿瘤基因激活引起的衰老,除了出现细胞周期停滞外,还分泌大量的细胞因子,引起免疫清除。细胞早衰是细胞水平上对抗...  (本文共61页) 本文目录 | 阅读全文>>

中南民族大学
中南民族大学

一种新的分泌蛋白Plac9的功能初探

分泌蛋白是人类蛋白质组中很重要的一类蛋白质,大约占总蛋白的十分之一。人体中一些重要的酶、激素、细胞因子等都属于分泌蛋白。它还参与了细胞的增殖、分化、凋亡,细胞间的信号转导,个体的发育、血液凝固、免疫防御等过程。在研究胚胎发育的过程中发现了一个新的分泌蛋白Plac9。并由该研究结果可知Plac9可能影响胚胎的器官发育。但是,大量相关的资料显示,对该基因的功能研究尚为空白。首先,运用生物信息学的方法得知该基因在人类10号染色体长臂22.3区域,其cDNA全长691bp,含有4个外显子,能编码一个大小为10kd左右的小分子蛋白。然后再对该蛋白的二级结构和三级结构通过生物信息分析预测该蛋白多为α螺旋结构,其三级结构类似一个小弹簧。然后对该蛋白的疏水性和信号肽进行分析可知,该蛋白可能是一个分泌到细胞外的分泌蛋白。众所周知,分泌蛋白的分泌途径有经典途径和非经典途径2种,通过一系列蛋白与细胞内质网和高尔基体共定位的实验得知,Plac9蛋白是一...  (本文共60页) 本文目录 | 阅读全文>>