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pELNS-BMPs与pELNS-wnt3a联合构建表达对成骨细胞系成骨效能的作用研究

目的:骨再生是治疗骨骼系统相关疾病如骨缺损、骨折不连接和治疗骨质疏松的关键环节。组织工程骨有望解决植骨后新骨形成缓慢的问题,其中如何促进种子细胞的增殖和成骨分化成为组织工程技术的关键环节和研究热点。在促进骨形成的众多调节因子中,骨形成蛋白(BMPs)家族在胚胎发育及骨骼形成中扮演着重要的角色,目前较多研究显BMP2,BMP4,BMP6,BMP7,BMP9具有骨诱导活性的;另外,Wnt3a在成骨细胞分化和增殖过程起着重要作用。上述调节因子的联合作用很可能加强诱导成骨分化,但是有关的研究少见报道。利用基因治疗技术可以将成骨诱导因子导入种子细胞,通过持续高水平表达成骨诱导因子促进种子细胞的成骨分化。选择理想的载体,使目的基因靶向、可控并有效地表达,是基因治疗成功的关键。非病毒载体系统的基因转移方法效率较低,其应用受到了很大限制;目前常用的病毒性载体主要有逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒等,存在着只能瞬时表达、基因丢失、细胞恶化风险等不足  (本文共98页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中科技大学
华中科技大学

脂肪来源间充质干细胞外囊泡行钛材料表面改性促进骨再生的相关研究

目的:1.检验h ADSC-EV是否能够促进成骨分化;2.探索将MSC-EV用于Ti材料表面改性的可行性;3.研发一种适用于金属植入物表面锚定MSC-EV的方式;4.检验经h ADSC-EV表面活化改性的Ti材料是否具备更好的促进骨再生能力,为临床医用金属植入物的表面改性提供新的思路。方法:1.采用超速离心法制备h ADSC-EV,并通过SEM、颗粒跟踪分析、Western-blot等方式对其进行鉴定;以人成骨样细胞MG63为对象,通过茜素红染色与钙定量检测等方式检验h ASC-EV是否具备促进成骨分化的作用;通过基因芯片以及生物信息学分析等手段对h ASC-EV中可能发挥生物学效应的物质进行初步筛选。2.应用恒电位法制备Bio-Ppy-Ti(生物素-聚吡咯-钛),设置实验分组:Ti、Ppy-Ti、Bio-Ppy-Ti,通过SEM、AFM、荧光显像等手段对各组材料的表面形貌、粗糙度以及生物素负载量进行表征;将生物素修饰的h AD...  (本文共99页) 本文目录 | 阅读全文>>

上海交通大学
上海交通大学

通过生物材料结构/成分改性促进干细胞存活及血管化骨再生的研究

研究目的 肿瘤、炎症、外伤等多种原因均可造成颌骨组织缺损。干细胞在介导骨再生过程中起到了重要作用。然而,针对大块颌骨再生,一方面由于血管化问题,往往导致负载干细胞过早凋亡坏死;另一方面由于支架材料缺乏足够的成骨诱导能力,导致干细胞参与成骨受限,大大降低了骨再生效果。为此,本研究尝试通过生物材料管道设计、氧化石墨烯铜纳米颗粒(GO-Cu)涂层等手段来调控干细胞体内存活以及血管化骨再生,为促进大块颌骨再生的生物材料设计提供新的思路。材料与方法 1.分离培养犬骨髓干细胞(BMSCs)和脂肪干细胞(ADSCs);体外使用RT-PCT、免疫荧光等方法系统比较二者的成骨分化能力;GFP标记示踪观察裸鼠皮下异位成骨能力;进一步在犬上颌窦提升模型上,采用序贯荧光标记和硬组织切片等手段评估二者的快速骨再生效果。2.使用多孔/管道丝蛋白支架体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),检测HUVECs的生长、分泌活性及血管样结构预构情况;移植于裸鼠皮下...  (本文共120页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

可降解稀土改性镁合金及其羟基磷灰石涂层在骨再生的应用研究

种植修复因其具有不损伤天然牙、修复后咀嚼效率高、而且美观舒适等优点,成为当今修复牙列缺损及缺失的最佳技术手段。然而在临床应用中,由于牙列缺损后牙槽骨的吸收萎缩及牙周病和外伤后遗症等因素,导致牙槽嵴低平等骨量不足,这在一定程度上限制了种植修复的应用。临床上常采用多种方法来增加缺损区的骨量,而引导骨再生(Guided bone regeneration,GBR)成为临床实践中唯一常用的方法。引导骨再生术的基本原理是通过放置机械屏障膜保护血凝块,将骨缺损与周围结缔组织分离,保证了骨形成细胞优先进入骨缺损区,经过增殖、分化,最终完成骨修复,实现骨再生。对于引导骨再生膜,临床上主要分为两大类:生物不可吸收膜和生物可吸收膜。但是目前对这两种引导骨再生膜的研究并不完善,各自存在应用缺陷。生物不可吸收膜在临床应用最大的缺陷是在体内无法降解,需要二次手术取出;而生物可吸收膜由于不稳定的降解周期以及较弱的机械强度,往往会对其屏障功能有一定的影响。因...  (本文共121页) 本文目录 | 阅读全文>>

北京协和医学院
北京协和医学院

可注射、自愈合水凝胶促进骨坏死区域骨再生的研究

背景股骨头坏死是一种常见的主要影响中青年人群的致残性疾病,常见病因包括股骨颈骨折、激素使用、大量饮酒和减压病等。目前治疗股骨头坏死的方法基于ARCO分期,在股骨头尚未塌陷的ARCO Ⅰ/Ⅱ期提倡保髋手术,主要的保髋手术方式为股骨头髓心减压后进行骨移植、干细胞注射、钽棒置入、以羟基磷灰石和磷酸三钙为代表的钙基材料以及有机多聚物等填充。其中自体骨移植为临床金标准,但是术后供区疼痛、感染等是其弊端;同种异体或异种骨移植的的缺点为免疫排斥、骨诱导性和骨引导性差于自体骨移植;干细胞注射后,局部滞留少、干细胞凋亡增加等导致干细胞的骨修复作用不足;以钽棒或钛合金为代表金属材料的生物惰性和应力遮挡作用影响了其周围的成骨;磷酸三钙和羟基磷灰石等钙基材料在生物体内通过不断的相转化,形成难以溶解的羟基磷灰石,占位效应阻挡了新骨的形成。有机多聚物以透明质酸为代表,来源广泛,生物相容性好,但是获得自愈合性能的条件相对苛刻,且对生物体有毒有害,因此急需开发...  (本文共96页) 本文目录 | 阅读全文>>

上海交通大学
上海交通大学

羟基磷灰石涂层的镁—钕—锌—锆合金促进骨再生的体内外研究

目的:1、明确合金及其涂层对MC3T3-E1细胞生物学行为的影响;2、明确合金及其涂层植入体内后的材料降解及成骨情况。研究方法:1、体外实验通过采用空白组、钛合金组、JDBM组、HA-JDBM组的浸提液培养MC3T3-E1细胞;采用CCK-8法检测细胞增殖活力;流式凋亡法检测细胞凋亡;免疫荧光检测细胞骨钙素(osteocalcin,OC)和转录因子RUNX2;RT-PCR检测ALP、COL I、OC和OPN基因表达情况。2、体内实验通过采用钛合金组、JDBM组、HA-JDBM组3组材料固定大鼠胫骨骨折,通过苦味酸品红染色观察成骨情况;X线和Micro-CT扫描观察植入材料降解和成骨情况。结果:1、HA-JDBM组的细胞活性最高,且在6d内呈递增趋势。随着培养时间的延长,ALP表达呈上升趋势。JDBM组和HA-JDBM组ALP表达水平总体较空白组和Ti合金组高。2、流式凋亡显示HA-JDBM组存活细胞比例最高,死亡和凋亡细胞比例最...  (本文共45页) 本文目录 | 阅读全文>>