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禽白血病病毒J亚群囊膜糖蛋白基因的生物学和生物化学特性

J亚群禽白血病病毒(ALV—J)是90年代由英国鉴定出来的ALV新的亚群,主要引起肉鸡的骨髓瘤白血病。ALV—J的囊膜蛋白决定病毒的表型和病毒中和反应类型。本研究应用PCR的方法从感染了ALV—J美国分离株ADOL-4817和ADOL—Hc1的DF1细胞中分别扩增出特异性囊膜基因(env),并克隆进大肠杆菌TA载体,得到了相应env克隆的重组质粒TA—4817env和TA-Hc-env。对ADOL—4817 env基因进行定序分析表明,ADOL—4817株env基因大小为1746b,经计算机分析可翻译成581个氨基酸的蛋白质,分子量为64643daltons;经翻译后再加工的gp85和gp37由517个氨基酸组成,分子量为57677 daltons。ADOL—4817 env蛋白质有15个潜在的糖基化位点,氨基酸序列分析进一步表明,虽然在整个env与ALV—J原型毒株HPRS—103相比有一些氨基酸的变异,但整个env基因表达的  (本文共124页) 本文目录 | 阅读全文>>

《畜牧兽医学报》2001年06期
畜牧兽医学报

抗J亚群禽白血病病毒囊膜糖蛋白特异性单克隆抗体的研制及其特性

鸡群中引起肿瘤的禽白血病病毒 (ALV)可分为A、B、C、D、E和J亚群 ,其中J亚群是 90年代鉴定出来的新的病毒亚群 ,在商品肉用型鸡中ALV呈现流行趋势。由于肿瘤死亡 ,胴体废弃等而造成严重的经济损失[1,2 ] 。在ALV -J特异的蛋白质中 ,病毒子的表面囊膜糖蛋白是主要的亚群特异性决定因素[3] ,这些新毒株作为一种新的独立的囊膜亚群已得到其核酸序列的验证[2 ,4] ,然而 ,有关J亚群病毒的快速检测方法目前尚未建立 ,ELISA检测病毒群特异性抗原 ( gsa) [5 ] 虽然可以检测ALV -Jgsa ,但这种试验同时也能检测出某些样品中的内源性的病毒 gsa。PCR方法受到ALV -J的env基因序列和正常鸡群中同源基因的干扰[6] ,另外还受到抗原变异性的困扰[7] 。单克隆抗体在分子生物学和临床诊断中是非常有用的工具 ,本研究试图通过研制抗ALV -J特异性单克隆抗体以用于ALV -J分子生物学上更深入的...  (本文共7页) 阅读全文>>

《中国兽医学报》2002年06期
中国兽医学报

马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B基因原核细胞表达产物单克隆抗体的制备

马立克氏病病毒 (MDV) g B是 MDV最保守的一个结构基因 [1 ,2 ] ,编码产物糖蛋白 B含有 8个糖基化位点 [3 ] ,参与病毒吸附、侵入细胞等过程 [4] ,是主要的中和性抗原。其细胞表面的粘附性已在鸡白细胞上得到证实 [5]。近 30年来 ,MDV呈现出明显的毒力增强趋势 [6] ,g B一直作为研究的重点 [7] ,在MDV毒力变异的过程中其保护性降低的原因 ,还不太清楚。虽然国际上针对 g B的单抗早在 2 0世纪 80年代就开始研制 ,但迄今为止都不能通过 Western- blot检测到 MDV感染细胞中 g B抗原 ,影响了对 g B生物学功能的深入研究。本研究以大肠杆菌表达的 MDV g B N末端约 1.6 kb基因片段作为免疫原 ,通过 EL ISA 和 IFA制备单抗 ,显示出较强的 dot-EL ISA反应性 ,为进一步研究 g B基因在不同毒株中的表达提供了基础。1 材料与方法1.1 重...  (本文共3页) 阅读全文>>

《第四军医大学学报》1998年02期
第四军医大学学报

在大肠杆菌中分别表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1和G2

利用**R方法扩增厂汉滩病毒7小118株囊膜糖蛋杠1(门和(u的地码区基囚,片将卜(V产物州摸到*-载体小,川限制忖内切酶将(川和GZ的编码区基冈切F,#克隆到表达叔体沁V220中构建*1和G的左达质粒.诱#决达后在SI)SI,A(iF:凝胶中未见表达产物带,表达的(门和(沾能与部分抗(门和CZ的中尤隆抗体发牛止I入,川用*。。h、ti。M(门力沾个能价测到表达...  (本文共1页) 阅读全文>>

《江苏农业学报》2017年06期
江苏农业学报

A亚群禽白血病病毒env基因在昆虫细胞中的表达与鉴定

根据病毒囊膜蛋白中gp85蛋白抗原性的不同,将禽白血病病毒分为11个(A-K)亚群,其中只有A亚群、B亚群、C亚群、D亚群、E亚群、J亚群和K亚群能感染鸡[1-2]。外源性禽白血病以A亚群、B亚群、J亚群和K亚群为主[3-5],A亚群(尤其是来航鸡)被认为是商业产蛋鸡群中最普遍的外源性病毒亚群,可导致淋巴细胞性白血病[6-7]。近几年,对禽白血病病毒(ALV)感染的血清学调查结果也证明了AH10毒株感染的普遍性,并且A亚群禽白血病病毒(ALV-A)会与其他亚群ALV混合感染[8-9],临床症状以淋巴细胞性白血病为主,引起鸡的免疫抑制[10-11]。因此,若能研制出A亚群禽白血病病毒的快速检测试剂盒[12],将会对临床禽白血病的检测发挥一定的作用[13-15]。本研究拟利用Bac-to-Bac系统克隆和表达A亚群禽白血病病毒env蛋白,以期为进一步研制ALV-A单克隆抗体并建立检测方法等提供试验材料,为实现A亚群禽白血病的快速特异...  (本文共5页) 阅读全文>>

《微生物学报》2005年04期
微生物学报

昆虫细胞表达的网状内皮组织增殖症病毒囊膜糖蛋白及其免疫性

禽网状内皮组织增殖症(Reticuloendoetheliosis,RE)是由反转录病毒科的禽网状内皮组织增殖症病毒(Reticuloendoetheliosisvirus,REV)引起的鸡、鸭、火鸡和其他禽类的一组综合症,包括致死性网状细胞瘤、矮小综合症以及淋巴组织和其他组织的慢性肿瘤[1,2]。REV感染后禽生长迟缓,淘汰率和死亡率升高;引起感染鸡的免疫抑制,干扰其它禽病疫苗的免疫效果,导致免疫失败。REV已经成为继马立克氏病病毒(MDV)、禽白血病病毒(ALV)之后又一重要的禽肿瘤病毒[1,3]。它不但可以引起雏鸡严重的免疫抑制,还严重影响雏鸡的正常发育。如果用被REV污染的鸡胚制备弱毒疫苗,更会污染疫苗。目前,REV在我国的流行越来越严重,在某些鸡场中对REV阳性抗体的检出率可能高达21.4%~71.0%,其中出现免疫抑制状态的鸡群对REV抗体阳性率要比正常鸡群高的多[2,4]。但到目前为止,世界上还没有商品化地用于预防...  (本文共5页) 阅读全文>>