分享到:

水仙转化系统的建立与Agamous基因的克隆及油菜素内脂应答基因鉴定与分析

中国水仙(Narcissus tazetta-Var Chinensis)花乳白色,是我国传统名花。水仙是一种单子叶鳞茎花卉,低温条件下进行营养生长,高温时地上部分死亡,较大的鳞茎进入花芽分化。过去的学者主要是对水仙的快速繁殖和辐射处理后形态差异进行了研究,尚无关于花发育和花卉基因工程等方面的研究报道。通过愈伤组织再生植株,建立一个高效的再生体系是基因工程的基础。研究发现水仙进行组织培养时必须经过40~60天左右的低温处理,否则外植体极易死亡;低温时间太长,则易受真菌感染。通过对9种类型2700块外植体在8种不同植物激素配比的培养基上愈伤诱导和形成情况研究发现花芽是最好的外植体,愈伤诱导培养基是MS+BA0.2mg/1+ 2,4-D1.0mg/1+ NAA0.2mg/1。形成愈伤以后将其再转入分化培养基(6-BA0.1mg/1+2,4-D0.5 mg/1 +NAA0.2mg/1)培养基上继代培养,愈伤组织在分化培养基(MS+6-  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中农业大学
华中农业大学

枫香基因转化体系的研究以及枫香AGAMOUS基因的初步功能分析

枫香(Liquidambar formosana Hance.)是我国乡土树种,分布于淮河长江流域以南地区。由于其生长迅速,抗逆性强,秋叶红色鲜艳可爱,是我国亚热带地区的典型秋色叶树种,故而在长江流域以南地区被广泛用作公路、街道、庭院和工厂绿化树种。但是在城市园林应用过程中,枫香球果存在数量多、个体大、果实硬、不易降解等问题,球果掉落时易砸伤行人及车体,给市民出行带来不便,同时也给城市环境造成了一定的污染。针对这种情况,利用基因工程培育无球果枫香成为一种行之有效的解决方法。本研究首先建立了枫香的离体微繁及植株再生体系,对影响枫香叶片再生植株的不同因素进行了系统的探讨,并在此基础上对根癌农杆菌介导枫香的遗传转化条件作了初步探索,为枫香的基因工程改良奠定了一定的基础。同时,根据拟南芥花器官发育AGAMOUS(AG)基因控制雄蕊和心皮发育的功能,我们克隆了枫香的AG同源基因LfAG,并进行了初步功能研究,最终以通过转基因抑制枫香内源A...  (本文共101页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物技术通报》2011年11期
生物技术通报

平榛AGAMOUS基因的克隆与生物信息学分析

AGAMOUS(AG)基因首先从拟南芥中被分离出来,属于花器官发育模型C类基因,控制雄蕊和心皮的发育[1]。目前为止,研究人员已从欧榛(Corylus avellana)、桦木(Betula pendula)、桃(Prunus persica)、葡萄(Vitis vinifera)、柑橘(Citrusunshiu)和领春木(Euptelea pleiosperma)等多种植物中分离克隆了AG同源基因全长cDNA[2-7]。平榛归于桦木科榛属植物,具有重要的经济价值和营养价值,平榛的花为雌雄同株异花,即单性花,先花后叶,雄花为柔荑花序,但近代学者大多认为榛属植物是桦木与桤木之间的过渡类群,可单独列为榛科,与桦木科、壳斗科共同组成壳斗目;与花发育相关的MADS-box基因亚家族通常被用于系统发育研究[8]。本研究挑选平榛AG基因来研究,对于人们理解榛属植物的进化,揭示榛属植物的起源以及分化的分子机制具有重要作用。1材料与方法1.1材...  (本文共5页) 阅读全文>>

三峡大学
三峡大学

星花木兰AGAMOUS同源基因的可变剪接与功能分化

星花木兰(Magnolia stellata)是木兰科(Magnoliaceae)木兰属(Magnolia)观花小乔木。其花被片12-45,变异十分丰富,是研究木本植物花发育的理想材料。AGAMOUS(AG)是C类MADS-box基因,在花发育过程中可促进花芽分生组织形成,调控雄蕊和雌蕊的正常发育与内2轮花器官的形态建成,并抑制A类基因的活性。本研究采用同源克隆方法,从星花木兰花芽中分离得到3种不同形式的AGAMOUS同源基因剪接转录本,并结合表达特性分析和基因功能分析,系统研究了这3种形式的剪接转录本的表达模式差别与功能差异,进而分析不同的剪接转录本在星花木兰花发育过程中的功能,在此基础上探讨AG同源基因的可变剪接与星花木兰花器官形态建成的分子机制。为观赏木兰的花型改良与新品种选育积累资料。主要结论如下:(1)星花木兰AG同源基因的可变剪接与结构分析利用同源克隆方法,从星花木兰花芽中分离出了3个参与花发育的C类MADS-box...  (本文共89页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中农业大学
华中农业大学

百合AGAMOUS同源基因的克隆、载体构建及遗传转化

百合(Lilium spp.)为多年生球根花卉,花朵硕大,花色艳丽,花姿优美,寓意百年好合,是重要的切花之一,深受人们的喜爱。但百合的花型却很单一,野生的百合原种绝大多数为单瓣花,此外,百合花粉量大,污染花瓣,十分影响美观,瓶插寿命也会大大缩短。长期以来,人们将百合花形育种视为最重要的育种目标之一,希望获得具有更高观赏价值的百合新品种。然而,在自然界突变的重瓣或无花粉百合很难找到,即使遇到这样的材料也很难将它作为育种亲本培养百合新品种,分子生物学与生物技术的发展为这些问题的快速解决提供了可能性。花发育ABC模型是近年来的研究热点,通过对拟南芥,金鱼草等模式植物的深入研究,人们已经对ABC模型有了更深层次的了解。本实验从百合品种‘西伯利亚’中克隆出了花发育C类基因LLAG,构建了该基因的超量表达载体、反义载体以及干涉载体,一方面将这三个载体转化烟草对该基因进行功能验证,同时将这三个载体转化矮牵牛,期待对矮牵牛的花型产生改变,以丰富...  (本文共71页) 本文目录 | 阅读全文>>

《河南农业大学学报》2017年06期
河南农业大学学报

萼脊兰AGAMOUS(AG)基因的克隆与表达分析

花器官是植物营养生长到生殖生长转变过程中的重要功能器官,花器官发育遗传机制的研究可以促进人们对被子植物花结构的了解[1-2]。近年来,随着分子生物学和细胞生物学等学科的发展,对花卉的基因以及育种的研究更加深入[3-5]。兰科植物高度特化的花器官结构,也使其成为研究花器官发育调控机制的理想材料[6-8]。兰科植物相关基因特别是开花相关基因及其表达也成为当今研究的热点,但对萼脊兰开花相关基因的研究却是刚刚起步[9]。在经典的植物花发育的模型中最著名的是“ABCD”模型,1990年,YANOFSKY等[10]在拟南芥中首次克隆了花同源异型基因AGAMOUS(AG),使AG基因成为最早被克隆的花的发育调控基因,针对拟南芥花发育调控基因的正向遗传学研究,初步建立了简单的花发育调控网络模型。高志红等[11]以拟南芥为试验材料对AG基因的结构、功能以及同源基因的分离和AG基因的表达调控等方面进行了系统阐述。AG基因作为重要的MADS基因之一,...  (本文共7页) 阅读全文>>