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新城疫病毒F基因与鸡IL-2重组DNA疫苗的研究

本文在成功构建鸡新城疫F基因疫苗,并观察了免疫SPF雏鸡后诱导的免疫应答及免疫保护作用基础上,首次系统研究了鸡IL-2在鸡新城疫F基因疫苗免疫中的作用,证实了国内首次克隆成功的鸡IL-2基因的免疫增强作用,及作为免疫佐剂应用于禽类基因免疫的可行性;在此基础上,为进一步提高F基因疫苗免疫效率,又成功地构建了鸡新城疫病毒F基因与鸡IL-2重组DNA疫苗,研究了其接种SPF雏鸡后免疫鸡只T、B淋巴细胞增殖反应和抗体变化规律,以及强毒攻击后的免疫保护作用。研究结果如下:1.新城疫病毒F基因疫苗研究用新城疫病毒D26株F基因的cDNA与含人巨细胞病毒CMV启动子的真核表达载体pcDNA3重组,构建了新城疫F基因疫苗(pcDNA-F)。直接免疫接种SPF鸡后免疫鸡产生了针对新城疫病毒的抗体,免疫接种后前2周,免疫鸡的抗体产生并不明显,第3周后出现稍为明显的抗体反应。攻毒后,免疫鸡的抗体回忆反应十分迅速和强烈,出现一个较陡而又较高的峰值。而非  (本文共95页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国预防兽医学报》2001年02期
中国预防兽医学报

鸡新城疫病毒F基因和鸡IL-2重组DNA疫苗的构建

DNA疫苗 (DNAvaccine)又称基因疫苗 (geneticvaccine) ,核酸疫苗 (nucleicacidvaccine) ,是伴随基因治疗而发展起来的新型疫苗 ,它是将编码目的抗原蛋白基因序列的真核质粒经各种基因转移途径导入机体细胞 ,通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白 ,诱导宿主产生针对该抗原蛋白的免疫应答 ,从而达到免疫的目的。DNA疫苗作为第 3代疫苗的代表 ,以其独特的理化特性及免疫效应 ,引起生物医学界的广泛重视 ,并已用于多种传染病、肿瘤的研究[1] ,其中艾滋病、乙肝DNA疫苗已被批准用于人体实验 ,结果令人瞩目。目前DNA疫苗应用的关键问题是如何增强其免疫效果 ,提高诱导机体免疫应答效率。现在有免疫激素之称的细胞因子正逐渐作为佐剂用于疫苗的研制[2 ] 。新城疫 (ND)是由新城疫病毒 (NDV)引起的一种鸡的急性、高度接触性传染病 ,是目前危害我国养鸡业最严重的传染病。虽然传统弱毒疫苗能给免疫鸡...  (本文共4页) 阅读全文>>

安徽农业大学
安徽农业大学

鸡IL-2和NDV-F基因的克隆、表达及其融合基因重组质粒的构建

新城疫(Newcastle Disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的一种具有高度传染性的病毒性传染病。NDV能感染鸡、火鸡、鸭、鸽子和野生鹦鹉等多种禽类。由于ND给养禽业造成巨大经济损失,被国际兽疫局定为A类传染病。研究证明,在NDV感染过程中,位于病毒囊膜上的融合蛋白(F蛋白)是病毒穿入细胞,使宿主细胞产生融合和溶血的重要因子;同时也是病毒的主要保护性抗原。正因为如此,F蛋白已经成为研究新城疫基因工程疫苗和DNA疫苗等新型疫苗的首选抗原。白细胞介素2(Interleukin-2,IL-2)是由T细胞分泌的一种重要淋巴因子,它具有促进T细胞、B细胞的增殖和分化,增强单核细胞以及NK细胞的杀伤活性等免疫调节功能。IL-2的这种免疫调节功能,还表现在能够增强疫苗诱导的免疫反应。因此,近年来IL-2常被用来作为DNA疫苗的免疫佐剂,成为免疫学研究的热点。为了深入研究新城疫DN...  (本文共83页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国家禽》2017年14期
中国家禽

邵武市鸭群新城疫病毒感染现状分析

新城疫是一种禽类的烈性传染病,对家禽危害极大。新城疫病毒原始宿主为鸡,经过世界范围的几次大流行后,其宿主范围明显扩大,现已报道鹅[1]、鸭[2]、企鹅[3]、孔雀[4,5]、鸽[6]、鸵鸟[7]等均能感染发病。近年来新城疫病毒的致病力和宿主范围发生了变化,特别对鹅表现出较强致病性[2],对鸭也开始表现致病性[1],打破了鸭和鹅等水禽只带毒而不发病的论点。吴峻华[8]2006年对福州市的部分鸭场进行新城疫病毒抗体监测发现血清阳性率达28.7%。黄金龙等[9]对福州周边地区鸭场新城疫病毒抗体检测发现,新城疫病毒抗体阳性率高达57.66%,其中马尾、晋安区高达75%以上。表明福建省鸭存在新城疫病毒感染,并且感染率逐年提高,但临床上没有发病,说明鸭群对新城疫病毒存在天然抗性。为了掌握邵武市鸭新城疫病毒感染情况,2016年秋季动物防疫抗体集中监测时,采用新城疫病毒抗原对该市19个乡镇、街道办事处的鸭散养户和部分鸭场共177份血清样品进行了...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国动物检疫》2017年09期
中国动物检疫

我国新出现基因Ⅻ型新城疫病毒的分布及特性

新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)强毒株感染引起的一种急性、高度接触性禽类烈性传染病,其不仅对家禽造成严重损害,还会影响国际贸易。世界动物卫生组织(OIE)将ND列为必须报告的动物疫病。我国将其列为一类动物疫病,并在《国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)》中列为优先防治和重点防控的动物疫病之一[1]。NDV具有遗传学多样性,可分为Class I和Class II两类,每类又可进一步分为多种基因型或基因亚型。目前Class II至少包括18个基因型[2]。其中,不同基因型病毒具有一定的宿主特异性和地域分布特征[3]。监测表明,基因VI型和VII型是我国目前流行的主要优势基因型,其中基因VI型主要在鸽群中流行,而基因VII型则主要在鸡和水禽中流行。目前在东南亚、中亚等地区流行的NDV与在我国流行的病毒具有一定的差异性。因此,在ND防...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国兽医学报》2017年08期
中国兽医学报

新城疫病毒样颗粒对树突状细胞成熟的影响

新城疫病毒样颗粒(Newcastle disease virus-(40000MW)购自美国Sigma公司;流式抗体Anti-like particles,NDV VLPs)是由基质蛋白(M)为病Mouse CD11cFITC、Anti-Mouse MHC-ⅡPE、An-毒骨架,装配血凝素-神经氨酸酶和/或融合蛋白等。ti-Mouse CD40 PE、Anti-Mouse CD80 PE、Anti-2006年,PANTUA等[1]以NDV作为副黏病毒家Mouse CD86PE购自美国eBioscience公司;胎牛血族的模式代表,建立了以禽成纤维细胞系ELL-0为清、RPMI-1640液、双抗购自Thermo公司(Gibco基础的VLP表达系统,发现单独表达M蛋白即可品牌);小鼠淋巴细胞分离液购自深圳达科为公司;促使VLPs的有效形成与释放,只是直径小于真实C57BL/6小鼠购自辽宁长生生物技术有限公司,许的NDV粒子;与M蛋白...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中国兽医科学》2017年09期
中国兽医科学

鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及其生物学特性的研究

新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的禽类呼吸道、消化道及中枢神经系统损伤的高度接触性传染病[1]。NDV具有单股、负链、不分节的线性RNA基因组,是副黏病毒科、禽腮腺炎病毒属的一员[2-3]。NDV基因组长度约15 kb,满足“六碱基原则”,这对于NDV的复制非常重要[4-5]。NDV基因组编码至少六种蛋白,即核衣壳蛋白(nu-cleocapsid protein,NP)、磷蛋白(phosphate protein,P)、基质蛋白(matrix protein,M)、融合蛋白(fusionprotein,F)、血凝素-神经氨酸酶蛋白(heamagglu-tinin-neuraminidase protein,HN)、大分子蛋白(largeprotein,L),顺序依次为3′-NP-P-M-F-HN-L-5′[6]。根据毒力将NDV分为强毒株、中毒株和弱毒株。OIE将ICPI≥0.7...  (本文共8页) 阅读全文>>