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新城疫病毒F基因与鸡IL-2重组DNA疫苗的研究

本文在成功构建鸡新城疫F基因疫苗,并观察了免疫SPF雏鸡后诱导的免疫应答及免疫保护作用基础上,首次系统研究了鸡IL-2在鸡新城疫F基因疫苗免疫中的作用,证实了国内首次克隆成功的鸡IL-2基因的免疫增强作用,及作为免疫佐剂应用于禽类基因免疫的可行性;在此基础上,为进一步提高F基因疫苗免疫效率,又成功地构建了鸡新城疫病毒F基因与鸡IL-2重组DNA疫苗,研究了其接种SPF雏鸡后免疫鸡只T、B淋巴细胞增殖反应和抗体变化规律,以及强毒攻击后的免疫保护作用。研究结果如下:1.新城疫病毒F基因疫苗研究用新城疫病毒D26株F基因的cDNA与含人巨细胞病毒CMV启动子的真核表达载体pcDNA3重组,构建了新城疫F基因疫苗(pcDNA-F)。直接免疫接种SPF鸡后免疫鸡产生了针对新城疫病毒的抗体,免疫接种后前2周,免疫鸡的抗体产生并不明显,第3周后出现稍为明显的抗体反应。攻毒后,免疫鸡的抗体回忆反应十分迅速和强烈,出现一个较陡而又较高的峰值。而非  (本文共95页) 本文目录 | 阅读全文>>

安徽农业大学
安徽农业大学

鸡IL-2和NDV-F基因的克隆、表达及其融合基因重组质粒的构建

新城疫(Newcastle Disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的一种具有高度传染性的病毒性传染病。NDV能感染鸡、火鸡、鸭、鸽子和野生鹦鹉等多种禽类。由于ND给养禽业造成巨大经济损失,被国际兽疫局定为A类传染病。研究证明,在NDV感染过程中,位于病毒囊膜上的融合蛋白(F蛋白)是病毒穿入细胞,使宿主细胞产生融合和溶血的重要因子;同时也是病毒的主要保护性抗原。正因为如此,F蛋白已经成为研究新城疫基因工程疫苗和DNA疫苗等新型疫苗的首选抗原。白细胞介素2(Interleukin-2,IL-2)是由T细胞分泌的一种重要淋巴因子,它具有促进T细胞、B细胞的增殖和分化,增强单核细胞以及NK细胞的杀伤活性等免疫调节功能。IL-2的这种免疫调节功能,还表现在能够增强疫苗诱导的免疫反应。因此,近年来IL-2常被用来作为DNA疫苗的免疫佐剂,成为免疫学研究的热点。为了深入研究新城疫DN...  (本文共83页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国兽医学报》2017年08期
中国兽医学报

新城疫病毒样颗粒对树突状细胞成熟的影响

新城疫病毒样颗粒(Newcastle disease virus-(40000MW)购自美国Sigma公司;流式抗体Anti-like particles,NDV VLPs)是由基质蛋白(M)为病Mouse CD11cFITC、Anti-Mouse MHC-ⅡPE、An-毒骨架,装配血凝素-神经氨酸酶和/或融合蛋白等。ti-Mouse CD40 PE、Anti-Mouse CD80 PE、Anti-2006年,PANTUA等[1]以NDV作为副黏病毒家Mouse CD86PE购自美国eBioscience公司;胎牛血族的模式代表,建立了以禽成纤维细胞系ELL-0为清、RPMI-1640液、双抗购自Thermo公司(Gibco基础的VLP表达系统,发现单独表达M蛋白即可品牌);小鼠淋巴细胞分离液购自深圳达科为公司;促使VLPs的有效形成与释放,只是直径小于真实C57BL/6小鼠购自辽宁长生生物技术有限公司,许的NDV粒子;与M蛋白...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中国畜禽种业》2009年11期
中国畜禽种业

新城疫病毒分子生物学研究进展

新城疫是由新城疫病毒(NDV)引起的一种能导致大多数禽类消化道、胃肠道和中枢神经系统损伤为主要特征的、急性高度接触性传染病。1926年该病首次被发现于印度尼西亚的爪哇,1927年Doyle在英国的新城首次分离报道并将其命名为新城疫病毒,引起的疾病称为新城疫。我国于1948年分离到NDV,但据载1935年曾有过“鸡瘟”流行,可能是由NDV引起。近年来,随着分子生物学技术的成熟,根据NDV基因的核苷酸和氨基酸顺序对NDV分离株进行分类逐渐成为NDV分子流行病学研究的热点。Toyoda等首先根据NDV F或HN全基因两种核苷酸序列分别对60年代前流行于世界各地的NDV分离毒株绘制进化树,结果将分离的11个毒株分为A、B、C三组,这说明F和HN基因的变异具有很强的正相关性。Yang等在1997年根据HN基因头部保守区的382nt核苷酸片段对1884~1995年分离于流行台湾的14株NDV分离株进行系统发育进化分析,证明1995年分离株明...  (本文共1页) 阅读全文>>

《中国兽医学报》2008年11期
中国兽医学报

异源新城疫病毒感染对雏鸭组织抗氧化酶活性的影响

目前,已知许多疾病的发生都与机体内的自由基有关。机体在正常情况下体内自由基的产生和清除保持着动态平衡。但在某些情况下,如感染了某些病毒或者是机体的某些功能发生了紊乱,从而打破了这种动态平衡,使自由基的产生远远超出了清除的水平,自由基在体内越积越多,引起了多种细胞成分发生改变,甚至使细胞受到损伤;因而机体表现出病态[1]。机体内自由基的清除主要依靠体内的各种抗氧化酶,例如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等。这些酶不但协同防止自由基损伤效应而且相互间起着保护作用[2]。另外自由基引发的组织损伤是通过脂质过氧化反应实现的[3]。检测组织及血液中的各类抗氧化酶活性及MDA含量,是研究机体抗氧化损伤的方法之一。进入20世纪80年代,出现了“非典型”新城疫,并且广泛流行,这几年又表现得特别突出,并且能在高免的禽类中发生并且流行。国内外对此病的研究主要在鸡病方面,但近年来,鸭...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国家禽》2007年14期
中国家禽

智利鸟类感染新城疫病毒

智利农业部农牧业检疫局局长弗朗西斯科·巴阿蒙德7月16日宣布,智利南部第七大区的孔斯蒂图西瓮市发现有3只死亡野生鸬鹚感染了新城疫病毒。巴阿蒙德表示,政府将加强对孔斯蒂图西瓮附近野生鸟类的监控,并严防这一区域内饲养的家禽感染这一病毒。上月底,孔斯蒂图西瓮的海边地...  (本文共1页) 阅读全文>>

《山东家禽》2001年04期
山东家禽

什么是新城疫病毒的脑内致病指数

今年5月25日,在对中国关闭了5年之后,欧盟终于打开了大门,同意让包括青岛正大有限公司、诸城外贸、上海大江在内的山东、上海两地共14家禽肉食品企业对欧盟出口禽肉。但是,本次开关不是无条件的。条件之一是每批禽肉必须检测新城疫病毒的脑内致病指数,其结果不得大于0.4。 什么是脑内致病指数呢?脑内致病指数,英文原文是Intracerebral Pathogenicity IndeS,缩写为ICPI。ICPI是指被分离的新城疫病毒对1日龄的SPF雏鸡经脑内接种后观察8d所表现的健康状况或病、死情况的评分平均值。从评分平均值来判定接种材料中是否含有高致病力的新城疫强毒。 具体做法:每批肉鸡在出栏前5~7d现场采集气管或泄殖腔拭子60个,以每5个一组分别置于含抗菌素的等渗磷酸盐缓冲溶液中。气管或泄殖腔拭子在4℃条件下运送和保存,最多不得超过4d。 每组样品拭子经离心取上清液接种到不少于5枚孵龄为9~11d的SPF鸡胚尿囊腔内...  (本文共1页) 阅读全文>>