分享到:

Bt杀虫基因在转基因抗虫棉中的表达与遗传稳定性的研究

Bt抗虫棉的应用和推广,为棉花生产带来了巨大的经济效益,并有效地缓解了因喷洒化学农药而造成的严重的环境污染。在Bt抗虫棉中,Bt杀虫基因能否稳定表达和遗传是影响转基因抗虫棉应用前景和商品化生产的重要因素,但是,国内外Bt抗虫棉在生产中普遍存在两个问题:①抗虫棉生长前期抗虫性强,后期抗虫性减弱。②外界环境因子(温度、光照、水分等)影响其抗虫性能,从而影响了抗虫棉的稳产性。针对这些问题,开展了一系列研究,研究内容与结果如下:利用载体pGBI121S4ABC中杀虫基因两端的HindIII酶切位点,对Bt抗虫棉GK139-20的R3、R4代材料进行Southern杂交分析,结果证明了利用花粉管通道法导入的Bt杀虫基因整合在抗虫棉GK139-20 R3、R4代材料基因组中。Xhol在杀虫基因和载体pGBI121S4ABC中具有单一酶切位点。利用Xhol酶切Bt抗虫棉GK139-20的R3、R4代材料,然后进行Southern杂交,观察Bt  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>

东北农业大学
东北农业大学

苏云金芽胞杆菌新型杀虫基因的发掘与活性分析

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)因对多种农业害虫具有特异的杀虫活性,且对非靶标生物安全、环境友好等优点,使其成为世界上应用最为广泛的微生物杀虫剂。其杀虫活性主要源自于菌株本身所产生的杀虫蛋白,这些杀虫蛋白主要由cry基因和vip基因编码,其中cry基因已被应用于转基因作物20余年。因此,发掘Bt杀虫基因对害虫的防治具有重要意义。目前杀虫基因发掘的主要手段是高通量测序技术,但是由于测序价格较高,且菌株资源库中的重复菌株较多,会造成较大的资金浪费,迫切需要建立大量菌株的比较分析方法,以去除重复菌株,获得用于杀虫基因发掘的菌株。当大量菌株测序完成后,后续通常花费较多时间对菌株的基因组测序数据组装和杀虫基因注释,因此提高杀虫基因发掘效率是十分必要的。现阶段对Bt杀虫基因的发掘仍然具有很大需求,由于某些害虫对现有的Bt杀虫蛋白不够敏感,缺少对某些新靶标害虫具有活性的Bt杀虫蛋白,以及害虫对转基因作物...  (本文共124页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业科学院
中国农业科学院

融合杀虫基因的分子设计、构建及表达研究

虫害严重影响着农业生产,转基因抗虫植物是控制害虫的最有效手段之一。但是随着转基因抗虫植物的大面积推广,昆虫会逐渐对其产生抗性。构建融合杀虫基因可能是延缓昆虫对转基因抗虫植物产生抗性的一种有效策略。根据Bt杀虫蛋白Cry1A和豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)的高级结构、杀虫机理及昆虫体内肠激酶的作用机理,本着尽量不影响二者功能的原则,设计出了构建Cry1A和CpTI融合杀虫基因CryCI的方案,即将CpTI基因的编码序列连接到GFM Cry1A基因编码区3’端,并在其间用一段编码肠激酶切割位点的序列相连。利用设计的CpTI引物扩增出282bp的CpTI基因片段,将其克隆到pUC19载体上,然后将含有肠激酶切割位点编码序列的接头连接到CpTI基因的5’端,进而把此带有接头的CpTI基因片段克隆到质粒pG4AB上GFM Cry1A基因编码区的3端,构建成携带融合杀虫基因CryCI的载体pGF4ABC。将pGF4ABC上的融合杀虫基因Cr...  (本文共102页) 本文目录 | 阅读全文>>

《河南科技》1960年10期
河南科技

杀虫基因

杀虫基因郑州牧业工程高等专科学校郭凤蕊,董五辈虫害一直是农业生产最严重的问题之一,人们一直在寻找克服的...  (本文共1页) 阅读全文>>

《中国科学(B辑 化学 生命科学 地学)》1991年08期
中国科学(B辑 化学 生命科学 地学)

苏云金芽孢杆菌杀虫基因导入中国栽培水稻品种中花11号获得转基因植株

在水稻的遗传转化中,迄今尚未见到将优良性状基因导入生产推广品种并获得转基因植株的报道。我们首次将B.t.杀虫基因导入到生产推广品种中花11号中,并建立了一套转导外源DNA的有效方法。应用剪掉内颖,同时去掉柱头保留完整外颖...  (本文共5页) 阅读全文>>

东北农业大学
东北农业大学

苏云金芽胞杆菌资源多样性分析与杀虫基因发掘

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt),革兰氏阳性细菌,在芽胞形成期可产生具有杀虫活性的伴胞晶体。Bt晶体主要由cry基因编码的杀虫晶体蛋白组成,在害虫的防治中具有重要作用,有巨大的商业价值,因此发掘新基因并进行知识产权保护是Bt资源研究的重要内容。知识产权作为综合竞争力的重要体现,而目前我国在Bt杀虫基因资源的知识产权方面处于劣势,大部分Bt杀虫基因的专利权掌握在西方各大型农业生物技术企业手中,我国掌握的Bt新的基因发明专利不足60项。高通量测序技术的发展为发掘杀虫基因提供了新思路,成为国内外发掘Bt杀虫基因的主要手段。但是测序价格较高,Bt资源库中存在的冗余菌株会造成较大的资金浪费,目前尚没有便捷的方法去除重复菌株。因此,迫切需要建立可以快速分析比较大量样品的方法,来排除重复菌株,进一步提高杀虫基因发掘效率。本论文在分离1500株Bt菌株的基础上,进一步建立了菌株多样性分析方法,对菌株多样性进...  (本文共85页) 本文目录 | 阅读全文>>