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Germin基因的克隆和人溶菌酶基因的合成及其在烟草和油菜中的表达

草酸作为真菌分泌的毒素并参与致病,目前已在核盘菌属等9个属中有报道。草酸是核盘菌致病过程的决定因子,核盘菌在油菜、大豆、向日葵与十字花科蔬菜等植物上引起严重的菌核病。油菜菌核病位于油菜三大病害之首,由于核盘菌属广谱性非专化病原菌,油菜中至今未找到对病原菌免疫的抗源。鉴于草酸在致病中的重要作用,我们试图利用具有草酸氧化酶活性的germin,从分解草酸入手进行抗菌核病的研究。本研究通过PCR扩增克隆了小麦germin基因,构建了35S启动子驱动的germin基因植物表达载体,经遗传转化获得了转基因烟草植株。经Southern杂交证明germin基因已整合到烟草的基因组中。酶活性检测表明,源于单子叶植物小麦的germin基因能够在双子叶植物烟草中表达并正常装配成具有酶活性的同源五聚体蛋白。对病原菌细胞壁降解酶的利用一直是抗病基因工程育种的一条重要途径。人溶菌酶(human lysozyme,HL)是一种双功能酶,同时具有溶菌酶和几丁质  (本文共107页) 本文目录 | 阅读全文>>

《作物研究》2006年05期
作物研究

小麦Germin蛋白的研究现状

小麦G erm in蛋白是一种具有草酸氧化酶活性的糖蛋白。已经被广泛的研究应用。综述了G erm...  (本文共4页) 阅读全文>>

湖南农业大学
湖南农业大学

小麦germin基因的克隆及植物表达载体的构建

近年来由于基因克隆技术和遗传转化技术的进步,使得通过基因工程方法改善作物的抗病性成为了可能。谷类作物真菌病原菌常导致严重减产而给农民带来巨大的经济损失。一般来说抗真菌转基因的目标是加固植物细胞壁和产生抗真菌蛋白以直接或间接抑制真菌生长。有些植物病原菌真菌能分泌大量草酸,而草酸能导致组织腐烂,是致病过程中的关键因子。小麦中的germin是含有Mn离子的同源六聚体,具有草酸氧化酶活性,可将草酸氧化生成H_2O_2,在发育和防御过程中起了重要作用。因此将草酸氧化酶基因导入易感病的作物中就是针对真菌分泌的草酸的抗病基因工程最新认识。本研究的目的是获得小麦germin基因并构建植物表达载体,为转germin基因研究提供基础。主要结果如下:1.小麦germin基因的克隆与序列分析小麦germin具有较强的草酸氧化酶活性。根据GenBank中的germin gf-2.8同源序列设计引物,通过PCR扩增,从湘麦13基因组DNA中得到了长度为81...  (本文共48页) 本文目录 | 阅读全文>>