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FEN-1基因功能及其在遗传不稳定形成中的作用研究

遗传不稳定是肿瘤及遗传性疾病发生的重要原因之一。对遗传不稳定的研究表明其发生机制具有多样性,DNA复制保真度的降低、DNA修复系统的障碍、细胞周期DNA损伤校正点(DNA damage checkpoint)功能的紊乱都可成为其发生的原因。对遗传不稳定的进一步研究还发现细胞在受到离子辐射、致癌物(如烷化剂)攻击后,也可产生延迟发生遗传不稳定。本实验室曾证明烷化剂甲基硝基亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG)可诱发vero细胞的遗传不稳定状态,表现为延迟发生的非损伤部位DNA突变率的增加(非定标突变)。用0.2μmol/L MNNG处理vero细胞2.5小时后,继续培养12小时,将含有靶基因SupF tRNA的穿梭质粒pZ189转染入细胞并复制48小时,发现在未受MNNG直接攻击过的穿梭质粒pZ189中存在较高的突变率。非定标突变表现出特定的突变谱并具有时相特征。实验还表明  (本文共80页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物化学与生物物理进展》2000年02期
生物化学与生物物理进展

结构特异性核酸酶FEN-1的功能和结构

Lyamichev[1] 在实验中发现位于E .coliDNA聚合酶Ⅰ和Taq酶N端的 5′ 核酸酶除了具有外切酶活性外 ,还具有独特的内切酶活性 ,能切下双链和单链核酸分叉处的 5′单链DNA或RNA .这种核酸内切酶能识别和结合特定的核酸结构 ,即具有游离5′末端单链核酸的双链和单链DNA的分叉结构 ,并切下含游离 5′末端的单链核酸 .这种反应只与5′ 核酸酶所识别的核酸结构有关 ,而与其所识别核酸的序列无关 .这就是结构特异性核酸酶的概念 .由于在细胞DNA的复制、修复和重组过程中 ,都存在这样的DNA分叉结构 ,所以这种结构特异性核酸酶对维持细胞的遗传稳定性起着重要的作用 .  然而 ,在真核细胞中 ,所有已知的DNA聚合酶都不具有 5′ 核酸酶的活性 ,这表明真核细胞中5′ 核酸酶的存在形式不同于原核细胞 ,为一独立的蛋白质 .真核细胞中类似的 5′ 核酸酶分别在HeLa细胞、小牛胸腺、鼠细胞、酿酒酵母中被分离和鉴定...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国寄生虫病防治杂志》2005年01期
中国寄生虫病防治杂志

恶性疟原虫海南株FEN-1基因的克隆及序列分析

DNA复制和修复是维持基因组稳定的必要的生理活动。1997年美国国立环境卫生科学研究所(NIE HS)提出了环境基因组计划,DNA修复基因被列为第一[1],可见 DNA 修复之重要性。侧翼核酸内切酶 1(Flap endonuclease, FEN 1)是参与生物体核酸复制和修复的重要的酶之一,尤其是在滞后链合成过程中的切补修复。目前,国外对鼠、人、爪蟾及植物等的FEN 1 已有一些研究[2~6]。但对于疟原虫的 FEN 1的研究还未见有文章报道,而对寄生虫细胞和分子生物学的深入了解有助于产生有效防治寄生虫病的新靶点和策略[7]。作者等对本室构建的恶性疟原虫海南株(FCC1/HN)cDNA 表达文库的研究显示,其 FMPf01cDNA的表达产物有较强的抗原性[8],该 cDNA即为恶性疟原虫FEN 1基因近 3′端的一部分。为了研究疟原虫FEN 1的活性和功能,进一步为疟疾的诊断和治疗奠定基础,本研究以恶性疟原虫海南株基因组为模...  (本文共3页) 阅读全文>>

《现代生物医学进展》2016年13期
现代生物医学进展

FEN-1和AXL表达与上皮性卵巢癌化疗耐药相关分析

Chinese Library Classification(CLC):R737.31 Document code:AArticle ID:1673-6273(2016)13-2533-04前言卵巢癌是死亡率最高的妇科肿瘤[1]。化疗耐药为影响卵巢癌疗效的主要原因。片状核酸内切酶1(Flap endonuclease-1,FEN-1)位于人类11q12-13.1染色体上,其转录产物是一种参与DNA复制修复的蛋白。FEN1与自身免疫疾病、癌症等疾病的发生发展相关。在许多癌症组织中存在FEN1过表达,如乳腺癌,子宫体癌,肾癌,卵巢癌及直肠癌[2-4]。近年来,有研究者发现乳腺癌及卵巢癌FEN1 m RNA及蛋白高表达均与其不良预后密切相关[5]。目前,尚未见FEN-1与卵巢癌化疗耐药相关报道。受体酪氨酸激酶AXL(AXL receptor tyrosine kinase,AXL)是TAM家族成员之一,其表达与实体肿瘤细胞存活、增殖、...  (本文共5页) 阅读全文>>

《生物化学与生物物理学报》2001年03期
生物化学与生物物理学报

FEN-1基因对细胞周期和遗传稳定性的影响

结构特异性核酸酶FEN 1(flapendo/exonucle ase 1)具有对DNA复制和修复都必需的双重功能[1] 。在DNA复制过程中 ,FEN 1去除了冈崎片段前端RNA引物的最后一个核糖核苷。在DNA修复中 ,FEN 1参与了损伤碱基的修复过程。对酵母FEN 1同源基因RAD2 7的缺失突变体的研究还发现该突变体的遗传不稳定性显著增高 ,并主要导致重复性突变和插入突变的发生[2 ] ,说明FEN 1在维持细胞的遗传稳定性方面也起着重要作用。目前有关FEN 1在高等动物和人类中的系统研究尚无报道。  本实验室曾通过构建一特定的哺乳动物细胞突变检测系统 (图 1) ,在细胞受低浓度的短寿期化学致癌物甲基硝基亚硝基胍 (N methyl N′ nitro N nitrosoguanidine ,MNNG)处理后 12h ,转入正常的穿梭质粒 pZ189,使其在这些细胞中复制 4 8h后 ,发现该 pZ189靶基因SupFt...  (本文共6页) 阅读全文>>