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人胃癌相关基因的克隆及胃癌混合组织cDNA文库构建

研究背景:胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,在我国居于恶性肿瘤发病之首。胃粘膜细胞癌变过程中存在多基因的变化及积累,在这个过程中,原癌基因的激活以及抑癌基因的失活起到了关键的作用。虽然现在已经肯定了很多基因在胃癌中的异常变化,对胃癌的诊断和治疗有一定的参考意义,但它们最初发现时均非通过研究胃癌所得,所以,对胃癌的特异性较差,无法用于早期诊断,且在目前发现的癌症相关基因中,任何一个单基因都不能从分子水平阐明胃癌发病的分子机制,因此,将胃癌相关基因的克隆鉴定与基因组研究相结合,以基因的差异表达为出发点,充分利用生物信息学的资料数据,确定在正常胄粘膜细胞、胃癌细胞和肿瘤发展中间阶段细胞中表达的基因,将会为揭示胃癌发生和发展过程中的分子机制并为胃癌和癌前病变的基困诊断及治疗提供理论依据。研究目的:从人胃癌组织中克隆新的相关易感基因,探讨胃癌癌变的分子机理,为胃癌的早诊早治提供理论依据。研究方法:1、采用简单高效的互补DNA(cDNA)合成技术  (本文共112页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京医科大学
南京医科大学

转移相关基因CD44和胃癌关系的研究

CD44(cluster of differentiation)是分布极为广泛的细胞表面跨膜糖蛋白,在淋巴细胞、成纤维细胞和上皮细胞表面均能检测到它的表达,最早由Dalchau等于1980年用单克隆抗体技术检测到并确定,曾被许多学者称为Pgp-1、ECM-和透明质酸受体等。我们应用半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测胃癌患者骨髓血和外周血中CD44v6mRNA的表达;应用定量酶链免疫吸附试验(ELISA)和免疫组织化学(S-P)法检测胃癌患者外周血清中可溶性CD44v6(sCD44v6)的浓度和胃癌组织中CD44v6蛋白的表达;应用荧光定量RT-PCR(FQ-RT-PCR)法检测胃癌患者手术前后外周血中CD44v6mRNA的实时定量表达,探讨并分析CD44v6基因在胃癌发生、发展过程中的作用。目的检测胃癌患者外周血(骨髓血)中/胃癌组织中CD44v6mRNA/CD44v6蛋白的表达,观察分析它与胃癌临床病理之间的相...  (本文共109页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国实验诊断学》2015年07期
中国实验诊断学

胃癌患者多种高通量谱表达数据联合分析对相关基因筛选的临床价值

胃癌为临床上一种常见的恶性肿瘤,占据所有的恶性肿瘤中较高的比例,为当前危害人类生命健康的主要疾病之一。现在,在临床上仍然没有明确的胃癌发病机制,很多学者认为,胃癌的产生为多基因参与并且是不断积累的过程,其中涉及到癌基因、生物因子的受体、微卫星的不稳定以及细胞周期的调控等诸多改变[1]。对胃癌发病机制的深入认识有助于提高胃癌的临床诊断率,为疾病的进一步治疗提供重要依据。本文主要以我院2010年1月至2013年12月50例胃癌患者的胃镜活检标本为研究对象,分析了采取多种高通量谱表达数据联合分析并筛选胃癌相关基因的临床应用价值。具体操作如下。1资料与方法1.1一般资料回顾性分析选取我院2010年1月至2013年12月50例胃癌粘膜组织胃镜活检标本。正常胃粘膜组织50例。取样后迅速置于液氮中备用。1.2数据分析与RT-PCR方法采用vNorthern筛查10个已知胃癌基因。在这其中应用了肿瘤基因的解剖工程(CGAP)它的数据库中根据ES...  (本文共3页) 阅读全文>>

《肿瘤》2017年02期
肿瘤

胃癌组织中LncRNA RP11-513G11.1的表达及其临床意义

胃癌是危害人类健康的常见恶性肿瘤之一,每年有大量的新发和死亡病例,其中男性新发病例约为女性的3倍。在中国,胃癌的发病率位居常见肿瘤的第2位,死亡率位居第3位,严重威胁人们的健康和生命[1-2]。胃癌的发生是由不同时期、不同癌基因激活和(或)抑癌基因失活导致的分子疾病,其机制尚未完全阐明。长链非编码RNA(long non-coding RNA,Lnc RNA)为具有200个核苷酸,但不具有蛋白编码能力的RNA分子;虽然不具有编码蛋白的能力,但可在转录水平、转录后水平和翻译水平等层面调控基因的表达。越来越多的研究表明,Lnc RNA在肿瘤的发生、发展及预后中发挥着重要的作用[3-5]。Lnc RNA在胃癌中表达失调,其异常表达与胃癌的发生、转移及预后密切相关[6-7]。然而,关于Lnc RNA在胃癌中作用的具体机制尚未完全阐明,有待于进一步的研究。本研究应用实时荧光定量PCR法检测胃癌组织中Lnc RNA RP11-513G11....  (本文共7页) 阅读全文>>

权威出处: 《肿瘤》2017年02期
《世界华人消化杂志》2003年01期
世界华人消化杂志

胃癌P-糖蛋白表达与化疗效果相关

0引言多药耐药(multidrugresistance,MDR)是导致胃癌对抗肿瘤药物产生耐药的重要原因之一[1-5].他编码的P-糖蛋白(p-glycoprotein,P-gp)是一种能量依赖性药物排出泵,通过ATP提供能量,可将抗肿瘤药物由胞内泵出胞外,使其细胞毒作用减弱或消失而出现耐药性[6-10].我们检测P-gp在胃癌中的表达,分析表达的临床意义,表达与化疗疗效的关系.1材料和方法1.1材料随机抽取胃癌石蜡标本101例,胃癌旁组织79例,其中88例胃癌患者已知其生存期.再随机抽取正常胃组织标本15例作为对照.1.2方法采用SP(streptacidin-peroxidose,链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶)方法.DAB染色,用PBS代替一抗作阴性对照,已知P-gp阳性结肠癌标本作为阳性对照.P-gp单抗购自福州迈新公司,结果判断以细胞膜上和(或)细胞质内出现棕黄色染色为阳性细胞,整张切片中阳性细胞数占≥5%即为阳性.统...  (本文共3页) 阅读全文>>

《实用医技杂志》2017年01期
实用医技杂志

胃癌组织中转移相关基因-1的表达及其临床意义

胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一。据世界卫生组织(world health organization,WHO)/国际癌症研究中心(international agency for research on cancer,IARC)公布的统计数据显示,2012年全球胃癌新病例95.2万,中国胃癌新发病例40.5万,占全球胃癌发病的42.6%;2012年全球范围内胃癌死亡病例72.3万,病死率为10.2/10万,我国胃癌死亡病例32.5万,病死率为21.9/10万[1]。胃癌组织的浸润转移是临床治疗中所面临的最为重要的难题。转移相关基因(metastasisassociated gene,MTA)-1是近年来研究较深入的肿瘤浸润转移基因,研究表明MTA-1蛋白在胃癌、乳腺癌、食管癌、喉癌及卵巢癌等多种恶性肿瘤中高表达,并与肿瘤侵袭与转移相关[2]。本研究拟应用免疫组织化学SP法,对胃癌组织中MTA-1蛋白表达进行对比,以探讨其与胃癌侵袭转...  (本文共2页) 阅读全文>>