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脾虚证Ca~(2+)/CaM信号系统的实验研究

脾为后天之本,气血生化之源,在生命活动过程中占有重要地位。长期以来,脾虚证一直是人们研究的热点。尤其近年来,中医证候动物模型研究的广泛开展,加之分子生物学的兴起,为更深入探讨“脾虚”的本质奠定了理论基础。所以,我们把“脾虚证Ca~(2+)/CaM信号系统的实验研究”纳入研究范围,立其为题。目 的寻求脾虚失运,化源亏乏,同空肠平滑肌细胞内Ca~(2+)/CaM信号系统的内在联系。继而从胃肠动力学角度,对“脾主运化”的实质以及“脾虚失运”的发生机制作出一个分子水平的诠释,并为阐明四君子汤的作用机理提供实验资料。材料与方法1、脾虚模型复制将wistar大鼠按性别、体重随机分成3组,每组10只。①模型组:破气苦降加饥饱失常法,即每日灌饲小承气汤煎剂,隔日半量进食;②正常对照组:常规饲养,以等量生理盐水代替药物;③复健组:每日灌饲四君子汤煎剂,1~2h后,灌饲小承气汤煎剂,余同模型组。共15天。2、空肠平滑肌细胞悬液制备将大鼠断头处死,在  (本文共55页) 本文目录 | 阅读全文>>

武汉大学
武汉大学

Ca~(2+)诱导大肠杆菌摄取外源DNA的研究

本文通过测定大肠杆菌感受态细胞中Ca~(2+)的含量和分布,并分别以AMP及非选择性DNA分子、La~(3+)和量子点为探针,研究Ca~(2+)诱导大肠杆菌建立感受态并介导摄取外源DNA的分子机理,得到以下研究结果:1.实验发现在二价金属离子ca~(2+)、Mn~(2+)、Mg~(2+)中,Ca~(2+)诱导大肠杆菌建立感受态并实现质粒DNA转化的作用效率最高:Ca~(2+)2可促进大肠杆菌的生长,但生长在含较高浓度(50,100mmol/L)Ca~(2+)培养基中的大肠杆菌,其摄取外源DNA的能力并未发生改变;大肠杆菌实现摄取外源DNA的必备条件是大肠杆菌细胞、适当浓度的Ca~(2+)和转化DNA同时共处于同一体系;Ca~(2+)诱导大肠杆菌摄取外源DNA的作用发生在转化过程中,与转化前的处理无关;转化步骤中的DNA与受体细胞冰浴静置、热激和温育等过程也不是DNA进入受体细胞的必需条件,但这些操作可或多或少地提高DNA的转化效...  (本文共146页) 本文目录 | 阅读全文>>

大连医科大学
大连医科大学

肌球蛋白轻链的非Ca~(2+)依赖性磷酸化特征及其影响因素

已知平滑肌收缩机理可简述为:在Ca~(2+)-CaM 存在的条件下,肌球蛋白轻链激酶(MLCK)使肌球蛋白轻链(MLC2)磷酸化,磷酸化MLC2与肌动蛋白(actin)相互作用而产生张力收缩。细胞内Ca~(2+) 降至静息水平及MLC2 脱磷酸化后,平滑肌仍然保持一定的张力,这一现象难以用现有的Ca~(2+) 依赖性调节理论解释,提示在平滑肌收缩过程中还存在着Ca~(2+) 依赖性调节以外途径。本研究以胃、子宫平滑肌及心肌肌球蛋白(myosin)的非Ca~(2+)-CaM 依赖性磷酸化(CIPM)为研究对象,初步揭示了MLCK 使CIPM 的一些特征,期望这些研究有助于进一步揭示平滑肌、心肌张力维持的机理提供新的研究途径。 该部分研究指出: 在Ca~(2+)-CaM 不存在条件下,MLCK 也可使平滑肌myosin 非Ca~(2+) 依赖性磷酸化(CIPM)。与myosin 的Ca~(2+)-CaM 依赖性磷酸化(CDPM)相比...  (本文共85页) 本文目录 | 阅读全文>>

第四军医大学
第四军医大学

腮腺腺细胞体外培养模型建立及细胞外Ca~(2+)对细胞的作用

唾液腺腺细胞的结构、生长、分化和生理功能的研究已是探讨唾液腺疾病的主要途径。早期,由于缺乏较长期体外培养的唾液腺腺细胞,人们利用体内动物模型和分离的唾液腺腺细胞研究其生长、分化及生理特点,为认识唾液腺提供了重要信息。然而,体内细胞所受的影响因素较多,体外分离的唾液腺腺细胞存活的时间很短,所以,唾液腺许多细胞生物学特性并不十分清楚。已经知道,细胞Ca~(2+)对细胞的结构与功能起重要作用。细胞内游离Ca~(2+)[Ca~(2+)]i作为第二信使,调节细胞的功能。细胞外Ca~(2+)更是与细胞增殖和分化有关。以往的研究均集中在低于Ca~(2+)生理浓度,而高Ca~(2+)对细胞的作用迄今未见报道。本实验针对高浓度Ca~(2+)与正常腮腺腺细胞结构、生长、分化、生理功能及调节的关系进行系列研究。实验共分三部分:第一部分,建立正常腮腺腺细胞体外培养模型。以期获得结构、分化及功能类似体内的较纯的体外培养腮腺腺细胞,并可在体外存活较长时间;...  (本文共144页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川大学
四川大学

流体切应力对破骨细胞Ca Ⅱ、Cat K mRNA表达的影响

在口腔医学领域,口颌系统处于复杂而精密调控的应力应变环境,许多生理过程和病理变化,如牙萌出、牙正畸性移动、种植体周围炎、牙周炎等,与机械应力应变关系密切。机械刺激下发生的局部改建维持和重塑骨组织的结构,以适应外部力学环境的不断变化。目前,骨细胞对载荷的反应特征及机械信号传导的机制仍不清楚。生理性载荷不仅产生梯度张力,也产生局部梯度压力,从而导致骨组织缝隙内的流体切应力。局部的流体切应力在骨组织的改建中发挥重要作用。研究骨细胞对不同载荷的反应特征、力学信号在细胞中的传导机制,是深入研究骨改建机理的重要内容,相关的细胞力学研究已成为口腔医学、骨科学等诸多领域的研究热点。由于破骨细胞是终末分化细胞,细胞脆弱,组织含量少,目前尚不能传代,体外培养和纯化比较困难。而在体外获得高产量高纯度的破骨细胞又是进行分子生物学等相关研究的必要条件。因此,破骨细胞的分离纯化成为进行分子水平的破骨细胞力学研究的技术瓶颈,也是相关研究的热点之一。目前,在破...  (本文共96页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

铅染毒对淋巴细胞[Ca~(2+)]i、钙调素及细胞增殖的影响

研究背景与目的铅是对人体健康有害的重金属元素。主要损害神经、消化、造血、免疫系统和肾脏,可引起细胞一系列的功能变化。铅不仅具有神经毒性还具有免疫毒性,免疫系统是铅作用的重要靶器官之一。虽然人们对铅的免疫毒性作用已做了许多工作,但铅的免疫毒性机理尚未完全明了。铅吸收后进入血循环,约有95%的铅以不溶性磷酸铅稳定地沉积于骨骼系统,少量铅以磷酸氢铅、甘油磷酸化合物、蛋白复合物或铅离子(Pb~(2+))状态分布全身各软组织。有研究资料表明Pb~(2+)可通过细胞膜离子通道进入细胞内,主要分布在细胞核和细胞浆以及线粒体、溶酶体、微粒体。众所周知,Ca~(2+)在信号传导中起着极其重要的作用,Ca~(2+)信号是淋巴细胞行使正常功能、识别抗原的关键性调节因素之一,细胞的多种功能受Ca~(2+)信号调控,而多种胞外的信号也影响细胞内Ca~(2+)信号,Ca~(2+)信号失常会导致一系列病理过程。由于Pb~(2+)和Ca~(2+)的离子半径较近...  (本文共89页) 本文目录 | 阅读全文>>