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成年大鼠脑内神经干细胞的在体研究

第一部分 成年大鼠中枢神经干细胞的检测及EGF的体内作用目的:检测成年大鼠脑内神经干细胞存在部位,及表皮生长因子(EGF)对神经干细胞增殖的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠45只,体重270~320g,随机分为正常组、脑室注射EGF组、脑室注射溶剂组,每组15只。正常组不给药,EGF组通过立体定向单侧侧脑室内微量注射技术给予EGF,浓度为0.1mg/ml,微量泵控制注射速度为 1μl/min,每次5μl,每日 1次,相当于 EGF 500ng/天,连续给药7天。溶剂组脑室内注射生理盐水,注射量及方法同EGF组。3组中各有5只处死前给予5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)注射。BrdU通过腹腔注射给予,剂量 100mg/Kg,每 2小时 1次共 5次。最后一次给药后 1小时,将大鼠过量麻醉后以4%多聚甲醛动脉灌注固定,取脑标本,进行病理及免疫组织化学检查。通过神经干细胞的特异性标记物nestin染色阳性细胞计数,了解神经干细胞的存在部  (本文共59页) 本文目录 | 阅读全文>>

《西安交通大学学报(医学版)》2017年05期
西安交通大学学报(医学版)

3-HB协同bFGF诱导促进神经干细胞向神经元方向分化

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是一类具有自我更新、增殖和分化能力的多潜能干细胞。NSCs移植可促进脑损伤修复,并改善脑缺血引起的空间学习障碍[1]。虽然NSCs移植弥补了内源性NSCs再生功能的不足,但是研究表明,植入非神经发生部位的NSCs却倾向于向胶质细胞分化,而分化成的神经元较少[2]。因此,仅仅通过NSCs移植来代替各种神经元的方法并不理想。目前,通过体外定向诱导分化[3]后再进行移植的方法已经取得显著成果。神经干细胞的体外诱导分化受多种细胞因子调控,其中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,bFGF)是体外诱导神经干细胞分化的基础细胞因子,有研究表明EGF可诱导神经干细胞向胶质细胞分化,而bFGF可诱导神经干细胞向神经元方向分化[4-6]。前期工作中,我们发现接种于3-羟基丁酸-3-羟基己...  (本文共6页) 阅读全文>>

《现代生物医学进展》2017年20期
现代生物医学进展

MiR-381下调Hes1表达调控神经干细胞增殖和向神经元的分化

新鲜NSCs生长培养基;37℃的CO前言2细胞培养箱中孵育48 h,检测转染效果。神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)是一类具有不断增1.2.3细胞免疫荧光实验细胞融合度达到60%-70%,去除殖、自我更新能力和向神经功能细胞分化能力的细胞群体,用培养上清,以PBS缓冲液轻轻冲洗两遍,4%多聚甲醛室温固定以提供充足的脑组织细胞。随着年龄的增长,神经元数量会逐15 min,PBS洗5 min×3次,0.2%Triton-X破膜,室温孵育30渐减少,使得神经系统的自我修复功能也随之降低。而神经干min,PBS洗5 min×3次,10%山羊血清封闭,室温作用1 h,甩细胞特有的生物学特性则为中枢神经系统的发育和受损神经掉马血清,不洗,分别加入一抗兔抗大鼠-nestin(1:200),β-tubu-组织的修复提供了充足的细胞来源,能够修复和替代受损脑组lin-III(1:200),阴性对照加PBS,4℃孵育过夜,P...  (本文共7页) 阅读全文>>

《西南军医》2013年02期
西南军医

神经干细胞分化调节因子的研究进展

1神经干细胞神经干细胞(Neural Stem Cell,NSC)是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的神经细胞。在成年人中枢神经系统中分布于脑室壁周围、海马、嗅球、小脑皮质等处[1],并主要存在于海马和嗅球[2]。神经干细胞来源的神经元参与学习、记忆和病理状态下的自我修复等生理过程。研究发现在正常情况下神经干细胞处于静止状态,在多种疾病状态下神经干细胞会被激活并根据其周围微环境的诱导而分裂、迁移、增殖、分化为各种神经元和神经胶质细胞。迁移分化的神经干细胞其形态和功能与附近的宿主细胞非常类似[3],并与周围神经元融合[4],从而重塑神经突触结构、重建神经网络帮助修复损伤。激活、诱导神经干细胞治疗中枢神经系统疾病,利用自身细胞重建神经系统功能,无排异反应、安全性好、不涉及伦理问题,具有广阔的研究和应用前景。诱导神经干细胞向神经元分化,修补缺损的病灶,可能成为非常有价值的神经系统疾病治疗手段。目前,针对神经干细胞的生物特性的研究日益...  (本文共4页) 阅读全文>>

《生物医学工程与临床》2012年05期
生物医学工程与临床

揭示调节神经干细胞分裂及分化的关键分子

据2012年7月30日Lim S[Stem Cells&Devel Cell,2012,30(7):1509-1520]报道,新加坡A-STAR研究机构的研究人员通过研究发现,某种分子组分可以有效阻止神经干细胞分裂,但确可以促进其分化为不同类型的大脑细胞。在神经系统发育过程中,名为周期依赖性蛋白激酶(Cdks)的蛋白质可以紧密调节神经干细胞增殖和分化之间的平衡,但是在这个调节过程中扮演的角色却无人知道。为了研究Cdks,研究人员改造了缺乏编码Cdk2和Cdk4基因的突变体。结果Cdk2和Cdk4均可调节细胞分裂,通过研究缺乏Cdk2和Cdk4的突变体动物模型发现其后脑部较大,且相比正常动物,其脑室扩...  (本文共1页) 阅读全文>>

《现代生物医学进展》2012年29期
现代生物医学进展

神经干细胞迁移浅识

迁移是细胞从一个区域到另一个区域运动的现象,是神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖、分化、发育成熟并获得正常功能的必经过程和显著特征。高等脊椎动物中枢神经系统神经元基本源于胚胎室管膜前下区(anterior subventricular zone,SVZa),神经干细胞通过不对称分裂转变为神经前体细胞,然后神经前体细胞通过长距离的迁移,到达某些特定区域并分化成神经细胞[1]。有研究表明,当NSCs的迁移性受到抑制时,其分化能力也同样受到抑制,因此NSCs必须迁移到靶区域才能表现出神经的再生修复和可塑性[2]。NSCs的迁移是中枢神经系统(CNS)再生修复过程中实现大脑神经回路重排、功能得以重建的前提和必经环节,在中枢神经系统中发挥着极其重要的作用。目前神经干细胞的应用为许多神经系统疾病带来了希望,已成为神经系统研究的热门。因此本文整理国内外近年来对神经干细胞迁移情况的研究报道,以期了解神经干细胞迁移的研...  (本文共4页) 阅读全文>>