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成年大鼠脑内神经干细胞的在体研究

第一部分 成年大鼠中枢神经干细胞的检测及EGF的体内作用目的:检测成年大鼠脑内神经干细胞存在部位,及表皮生长因子(EGF)对神经干细胞增殖的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠45只,体重270~320g,随机分为正常组、脑室注射EGF组、脑室注射溶剂组,每组15只。正常组不给药,EGF组通过立体定向单侧侧脑室内微量注射技术给予EGF,浓度为0.1mg/ml,微量泵控制注射速度为 1μl/min,每次5μl,每日 1次,相当于 EGF 500ng/天,连续给药7天。溶剂组脑室内注射生理盐水,注射量及方法同EGF组。3组中各有5只处死前给予5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)注射。BrdU通过腹腔注射给予,剂量 100mg/Kg,每 2小时 1次共 5次。最后一次给药后 1小时,将大鼠过量麻醉后以4%多聚甲醛动脉灌注固定,取脑标本,进行病理及免疫组织化学检查。通过神经干细胞的特异性标记物nestin染色阳性细胞计数,了解神经干细胞的存在部  (本文共59页) 本文目录 | 阅读全文>>

《Biomedical and Environmental Sciences》2014年03期
Biomedical and Environmental Sciences

S Phase Cell Percentage Normalized BrdU Incorporation Rate, a New Parameter for Determining S Arrest

In this study,a new parameter,S phase cellpercentage(S fraction)normalized BrdU(SFN-BrdU)incorporation rate,was introduced to detect Sarrest.The results showed a positive linearcorrelation between the BrdU incorporation rateand the S fraction in unperturbed 16HBE cells.Theoretical analysis indicated that only S arrestcould result in a decrease in the SFN-BrdUincorporation rate.Additionally,the decrease inSFN-BrdU inc...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国医药指南》2013年06期
中国医药指南

BrdU免疫荧光染色方法的改进

5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)为胸腺嘧啶脱氧核苷类似物,在细胞周期的S期DNA合成过程中整合到细胞核内,只要细胞不凋亡,BrdU将永久地存留在细胞核DNA中,并能通过免疫组织化学方法检测到,可用于标记BrdU暴露期间进行DNA合成的细胞,故BrdU是反应在体脑神经干细胞增殖能力的一个非常可靠的标志物,目前广泛应用于神经再生领域的研究[1,2]。二联苯亚胺(bisbenzimide)是一种体外活性的与DNA小沟(minor groove)结合的染料,作为核酸染料,它可通过细胞膜与DNA结合,并可被紫外光及大多数荧光光源激发,比较适用于与其他紫外光激发的荧光染料一起作多重荧光标记,目前已被广泛应用[3]。这类染料中的Hoechst 33342在BrdU插入DNA的位点上发生荧光淬灭现象,因此可用来确定BrdU处理过的活细胞的增殖状态,对于BrdU免疫荧光染色假阳性的现象具有很好的...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国组织工程研究与临床康复》2009年19期
中国组织工程研究与临床康复

人骨髓间充质干细胞的分离培养及BrdU标记鉴定

0引言骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)是具有多向分化能力的非造血多能干细胞[1-2]。此类细胞易于分离、培养和扩增,扩增后仍保留分化潜能,且具有低免疫原性和免疫调节功能,同时易于转染和稳定表达外源基因[3-4],成为组织工程较为理想的种子细胞,也为利用骨髓间充质干细胞作为细胞及基因治疗的靶细胞来促进组织工程皮肤的血管化提供了一种新的方法和思路。组织工程化皮肤为皮肤缺损的修复和愈合提供了极具发展潜力的治疗途径,但目前各种组织工程化皮肤移植存活率明显低于自体断层皮片[5],其首要原因之一是组织工程化皮肤移植后缺乏足够的血管化而导致低灌注和缺血损伤[6]。利用转基因技术,可将血管生成调控因子基因导入目的细胞,使其表达某些调控因子,进而利于血管生成[7-8]。实验拟通过血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)...  (本文共5页) 阅读全文>>

《Science Bulletin》1985年12期
Science Bulletin

SISTER CHROMATID IN DIFFERENTIAL STAINING OF BrdU-RESISTANT SUBLINE AND THE PRELIMINARY STUDY ON ITS MECHANISM

5‘一romodeoxyeytidine(BrdU)一resi叭anee 15 a mark二widely姗d in幼恤al somatieeell gen眺105.The BrdU一resistance 15 the retardation of BrdIJineorPoration into DNA,whiehprevents the eell£rom phosphorating th·。thylllidine or BrdU【‘12].BrdU一restanoe。an be manifested by the ehallge of osmolarity of cytoPlas刀iie melnbr皿e〔314,or OUlerunkown ea~ts一。,.It has been rePorted that even BrdU一resistallt eells requiring BrdUw二e induoed in Sy...  (本文共5页) 阅读全文>>

《化工劳动保护(工业卫生与职业病分册)》1987年01期
化工劳动保护(工业卫生与职业病分册)

3—氨基苯酰胺诱发SCE与BrdU无关

近年来有些研究表明,多(AJ)F一核糖) 聚合酶抑制剂如3一氨基苯酞胺(3 AB)、 苯酞胺和燕酞胺的其他类似物,可使姊妹染 色单体互换(SC]rL)明显增高。但与其它多 数SCE诱发剂不同,多(八DP一核糖)聚合 酶抑制剂不损伤DNA。对3 AB已进行了广 泛研究,它没有细胞毒性和诱变性,且不抑 制DNA链的增长。 作者以中国地鼠卵巢10欣细胞培养进行 SCE的检测,不仅检查在BrdU存在下二个’ DNA合成周期的细胞中3 AB诱发的SCE,也 检查在楠加无放射活性胸腺啼淀的培养基中 第二周期复制后,在“H一dT存在下复制一个 周期的细胞中3AB诱发的SCE。在第一种 情况下,第二个复制周期发生在含BrdU的 DNA链,可经FPG染色观察SCE;在第二 种情况下,含有“H一dT的模板DNA,采用自 动放射照相的方法。为了检测在第一和第二 DNA合成周期中3 AB诱发的SCE水平,作 者采用了Taglor(1 058)的“双”和...  (本文共2页) 阅读全文>>