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成年大鼠脑内神经干细胞的在体研究

第一部分 成年大鼠中枢神经干细胞的检测及EGF的体内作用目的:检测成年大鼠脑内神经干细胞存在部位,及表皮生长因子(EGF)对神经干细胞增殖的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠45只,体重270~320g,随机分为正常组、脑室注射EGF组、脑室注射溶剂组,每组15只。正常组不给药,EGF组通过立体定向单侧侧脑室内微量注射技术给予EGF,浓度为0.1mg/ml,微量泵控制注射速度为 1μl/min,每次5μl,每日 1次,相当于 EGF 500ng/天,连续给药7天。溶剂组脑室内注射生理盐水,注射量及方法同EGF组。3组中各有5只处死前给予5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)注射。BrdU通过腹腔注射给予,剂量 100mg/Kg,每 2小时 1次共 5次。最后一次给药后 1小时,将大鼠过量麻醉后以4%多聚甲醛动脉灌注固定,取脑标本,进行病理及免疫组织化学检查。通过神经干细胞的特异性标记物nestin染色阳性细胞计数,了解神经干细胞的存在部  (本文共59页) 本文目录 | 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

表达GDNF的骨髓基质干细胞治疗帕金森病的实验研究

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是60岁以上患者高发的一种神经系统变性疾病,其主要特征是由于黑质纹状体多巴胺(DA)神经元缺失,临床表现为运动徐缓、静止性震颤、齿轮样强直等症状。但目前仍没有有效的方法中止和延缓黑质多巴胺神经元的进行性病变。近年来,PD的治疗的研究发展迅速,方法也是多种多样,基因治疗已进入临床实验。由于表达稳定、表达时程长,干细胞介导的基因治疗已成为目前研究的热点,因此,本文对应用表达GDNF的骨髓基质干细胞治疗帕金森病进行了初步研究。细胞介导的基因治疗的疗效取决于两个方面,即目的基因和载体细胞。根据文献报道,我们选择胶质细胞源性神经营养因子(glial cell linederived neurotrophic factor,GDNF)为目的基因。GDNF是中脑多巴胺神经元的神经营养因子,也是TGF-βs超家族中的一员,被认为是目前保护多巴胺能神经元最有效的神经生长因子,以往的实验表明G...  (本文共85页) 本文目录 | 阅读全文>>

第四军医大学
第四军医大学

人参皂苷Rd对成年大鼠脑内神经干细胞神经发生的影响及机制研究

长期以来,神经病学领域都认为中枢神经系统成熟的神经元属于终末分化细胞,很难再进行分裂和增殖。因而中枢神经系统的损伤、变性导致的神经元丢失及神经元的损伤难以得到自我修复,神经功能的重建被视为不可能。科学家们对体外神经干细胞(NSCs)分离培养和增殖的成功,为中枢神经系统的再生和功能重建带来了新的希望。但目前已有的促进NSCs增殖和分化的方法都因其临床治疗可操作性不强而制约了临床转化应用。因此找到一种促进NSCs增殖和定向分化的药物可能为神经系统疾病的临床治疗提供新的可行途径。人参皂苷Rd(GSRd)是从人参和三七中提取的一种单体化合物,是它们主要活性成分之一。我们前期的临床和基础研究发现,GSRd具有明确的神经保护作用:治疗脑梗死安全有效、减少脑缺血模型大鼠梗死体积、减少神经元死亡、促进大鼠运动功能恢复等。但GSRd是否能促进成年哺乳动物脑内NSCs的神经发生从而发挥神经修复功能呢?目前还鲜有报道。为此本研究拟在在体和离体探究GS...  (本文共75页) 本文目录 | 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

少突胶质细胞在早期放射性脑损伤中变化与作用的实验研究

少突胶质细胞在早期放射性脑损伤中变化与作用的实验研究目前电离辐射是占全身肿瘤1/3的大脑原发性、继发性肿瘤和头颈部肿瘤主要的、有时甚至是唯一的治疗措施,并且越来越多的用于治疗脑动脉瘤及癫痫等其它非肿瘤性中枢神经系统疾病。但可能发生的近期与远期放射性脑脊髓损伤会使患者的生活质量明显下降,因此限制了放射治疗措施的广泛应用。因此研究放射性脑损伤的发病机理和治疗药物对放射医学和肿瘤放射治疗学的发展有重要的理论意义和应用价值。研究发现,少突胶质细胞和血管内皮细胞是电离辐射的靶细胞;中枢神经系统亚急性放射性反应与电离辐射后早期脑组织的短暂脱髓鞘有关;晚期放射性反应与白质病变、迟发性脱髓鞘和少突胶质细胞脱失有关。由此可见,少突胶质细胞的放射性反应是脑组织电离辐射后的主要反应之一,并可能是促成放射性脑损伤和修复的重要因素。因此,研究少突胶质细胞谱系(少突胶质祖细胞、未成熟少突胶质细胞、成熟少突胶质细胞)放射性反应,尤其是早期变化,有助于了解放射...  (本文共106页) 本文目录 | 阅读全文>>

第二军医大学
第二军医大学

胎鼠脑神经干细胞鉴定纯化与生物学特性观察

神经干细胞概念的确立,对既往50年中有关神经系统的发育和神经再生的设想给予了充分的肯定。同时,随着对神经干细胞的生物学特性和体外、在体研究结果的不断丰富与充实,研究者对神经干细胞可能给临床神经科学带来充满希望的应用前景寄予厚望。以体外诱导分化的神经干细胞移植实现组织学和功能治疗脑损伤和衰变后产生的神经功能障碍的重建和康复;以神经干细胞或神经前体细胞为载体实现对特异性基因的脑内导入,从而达到治疗恶性肿瘤或提供特殊神经营养物质及神经递质的目的,成为神经干细胞临床应用研究的焦点。这些工作开展的前提是首先完成神经干细胞的鉴定检测与纯化富集,并完成神经干细胞的体外扩增,通过体外培养观察神经干细胞的生物学活性。我们在上海市科委、上海市卫生局基金的支持下开展神经干细胞的系列研究,主要开展了以下几方面的工作:1.检测神经上皮干细胞蛋白在神经干细胞膜上的分布。目的:判明神经上皮干细胞蛋白在胎鼠脑神经干细胞膜中的存在。方法:实验中采用取孕16-18...  (本文共84页) 本文目录 | 阅读全文>>

复旦大学
复旦大学

骨髓间充质干细胞移植治疗帕金森病模型鼠的研究

帕金森病(PD)是一种锥体外系疾病,主要病理改变为中脑黑质多巴胺神经元进行性变性和坏死。由于患者的黑质纹状体通路受损,导致黑质转运到纹状体的多巴胺含量减少,从而引起静止性震颤、肌强直和运动障碍等临床症侯群。目前神经干细胞和胎脑组织的移植被认为是可能有潜在应用价值的手段,但由于存在伦理问题和免疫排斥等问题,限制了它们在临床上的应用。因此,最理想的移植是移植物既能保持一定的数量和长期在体内存活,而且能产生多巴胺和分泌各种营养因子,从而改善移植区的营养状况和阻止PD进行性恶化,达到治愈PD的目的。本研究首先从体外探讨了骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stemcell,MSCs)神经分化的可能性,研究了MSCs对MPP~+损伤的离体脑片的保护作用及其机理。在此基础上,将MSCs移植至PD模型鼠脑内,应用MR成像技术在体观察了移植的MSCs在脑内分布和迁徙情况,探讨了MSCs移植治疗PD的效果,为MSCs移植治疗PD提...  (本文共92页) 本文目录 | 阅读全文>>