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成年大鼠脑内神经干细胞的在体研究

第一部分 成年大鼠中枢神经干细胞的检测及EGF的体内作用目的:检测成年大鼠脑内神经干细胞存在部位,及表皮生长因子(EGF)对神经干细胞增殖的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠45只,体重270~320g,随机分为正常组、脑室注射EGF组、脑室注射溶剂组,每组15只。正常组不给药,EGF组通过立体定向单侧侧脑室内微量注射技术给予EGF,浓度为0.1mg/ml,微量泵控制注射速度为 1μl/min,每次5μl,每日 1次,相当于 EGF 500ng/天,连续给药7天。溶剂组脑室内注射生理盐水,注射量及方法同EGF组。3组中各有5只处死前给予5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)注射。BrdU通过腹腔注射给予,剂量 100mg/Kg,每 2小时 1次共 5次。最后一次给药后 1小时,将大鼠过量麻醉后以4%多聚甲醛动脉灌注固定,取脑标本,进行病理及免疫组织化学检查。通过神经干细胞的特异性标记物nestin染色阳性细胞计数,了解神经干细胞的存在部  (本文共59页) 本文目录 | 阅读全文>>

《神经解剖学杂志》2007年01期
神经解剖学杂志

大鼠脊髓发育过程中神经干细胞的分布

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是指具有分化为神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞的能力,能自我更新并足以提供大量脑组织细胞的细胞[1]。本实验对SD大鼠进行5-溴-2-脱氧尿嘧啶(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)腹腔注射,应用免疫荧光染色技术检测大鼠不同发育阶段脊髓内BrdU、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、巢蛋白(nestin)阳性细胞的分布情况,为分离、纯化脊髓源性神经干细胞提供实验资料,同时为干细胞移植治疗脊髓病变提供理论依据。材料方法1.实验动物分组、取材成年未经产雌性SD大鼠21只,成年雄性SD大鼠12只,体重220~250ɡ,雌鼠随机分7组,每组3只。将成年雌雄SD大鼠于晚20∶00时按2∶1比例合笼,次日晨8:00阴道涂片查精子,查到精子者记为受孕0d(E0)。将BrdU(Sigma)溶于无菌生理盐水...  (本文共5页) 阅读全文>>

《郑州大学学报(医学版)》2011年02期
郑州大学学报(医学版)

弥漫性脑损伤大鼠皮质和海马中BrdU和Nestin蛋白的表达

闭合性弥漫性脑损伤(diffuse brain injury,DBI)是法医实践经常遇到的一种颅脑损伤,这种类型的脑损伤无集中的脑挫伤表现,病理形态改变无明显的时序性变化,需要寻找与其损伤相关的生物学指标来帮助推断损伤时间。目前,国内法医病理学者[1]对特异性蛋白在脑损伤后的变化规律有部分研究,但对DBI的研究较少。作者观察了大鼠DBI后不同时间内皮质和海马中5-溴-2-脱氧尿苷(Br-dU)和巢蛋白(neuroepthelial stem cell protein,Nes-tin)表达的变化,探讨其与脑损伤时间的关系,为DBI时间的鉴定提供依据。1材料与方法1.1实验动物和分组成年健康SD大鼠36只,雌雄不限,体质量(250±20)g,由河南省实验动物中心提供。随机分为对照组(6只)和实验组(30只)。实验组根据伤后不同时间取材,分为损伤后1、3、7、14和28d组,每组6只。所有动物室温饲养,自由进食水。1.2动物模型的建立...  (本文共4页) 阅读全文>>

《神经解剖学杂志》2016年06期
神经解剖学杂志

Ro25-6981对脑缺血再灌注模型大鼠海马齿状回颗粒下层nestin和BrdU表达的影响

cells in SGZ increased from I/R 1 day and had a peak on I/R 7 days,and which dropped sharply on I/R 14 days and de-clined to the normal level on I/R 35 days.When administrated to Ro25-6981 before ischemia,the cell proliferation wasinhibited at different time points.The positive cells obviously reduced in 3,7 d and 14 d and it was statistically signifi-cant(P0.05).In the I/R saline group,Brd U positive cells in SGZ pr...  (本文共7页) 阅读全文>>

《中国卒中杂志》2009年03期
中国卒中杂志

行为学训练对海马损伤梗死大鼠齿状回区BrdU和Nestin表达的影响

卒中是由于脑循环障碍导致的中枢神经系统受累疾病,其起病急并常伴有神经功能障碍,脑梗死是卒中的一大亚型,随着人口老龄化的发展,脑梗死也呈逐年上升的趋势。脑梗死所致的神经功能障碍严重且难以恢复,为社会、家庭带来沉重的负担。因此,如何加强脑梗死后的神经功能恢复与改善,已成为目前亟待解决的问题之一。神经干细胞的发现为脑梗死后神经功能的修复提供了新的思路,相关研究表明,神经干细胞在脑梗死的治疗中主要有外源性神经干细胞移植和内源性神经干细胞自我修复两种途径。由于神经干细胞移植存在伦理道德、免疫排斥及移植细胞致瘤性等问题,如何加强脑梗死后内源性神经干细胞自身的修复能力,成为近年研究的热门问题之一。目前已经证实,内源性神经干细胞的修复主要包括增殖、迁移及分化三个基本过程,其中,内源性神经干细胞增殖是自身修复的首要过程,也是自身修复成功的基础。溴脱氧尿嘧啶核苷(Bromodeoxyuridine,BrdU)是一种胸腺嘧啶脱氧核苷类似物,在有丝分裂...  (本文共6页) 阅读全文>>

《西安医科大学学报》2002年02期
西安医科大学学报

大鼠脑发育过程中神经干细胞分布的免疫组织化学研究

近年来 ,不断有学者[1~ 3] 报道在胚胎和成年动物神经系统存在神经干细胞 ,自我更新和多分化潜能是神经干细胞的两个基本属性[4] ,打破了以往认为神经组织是非再生性组织的观念。神经巢蛋白 (nestin)是神经干细胞的标志性抗原 ,属于第Ⅵ类中间丝蛋白质。nestin表达起始于神经板的形成 ,在神经元迁移和分化开始后逐渐消失。为了明确神经干细胞在动物不同发育时期的脑内动态变化 ,本文采用免疫组织化学ABC法研究不同大脑部位nestin阳性细胞分布 ,为探讨神经系统发育提供形态学资料。1 材料和方法1 .1 实验动物及组织制备 SD大鼠 40只 ,分为胚胎 1 8d(E1 8)组、1d组、3d组、5d组、7d组、1月组、成年组 ( 4月龄 )和老年组 ( 1 2月龄 ) ,雌雄不限。取孕 1 8dSD大鼠 1只 ,用 2 0 0 g·L- 1 ( 2 0 % )乌拉糖腹腔注射麻醉后 ,颈椎脱臼法处死。取出胎鼠 ,断头取脑 ,经...  (本文共3页) 阅读全文>>