分享到:

成年大鼠脑内神经干细胞的在体研究

第一部分 成年大鼠中枢神经干细胞的检测及EGF的体内作用目的:检测成年大鼠脑内神经干细胞存在部位,及表皮生长因子(EGF)对神经干细胞增殖的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠45只,体重270~320g,随机分为正常组、脑室注射EGF组、脑室注射溶剂组,每组15只。正常组不给药,EGF组通过立体定向单侧侧脑室内微量注射技术给予EGF,浓度为0.1mg/ml,微量泵控制注射速度为 1μl/min,每次5μl,每日 1次,相当于 EGF 500ng/天,连续给药7天。溶剂组脑室内注射生理盐水,注射量及方法同EGF组。3组中各有5只处死前给予5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)注射。BrdU通过腹腔注射给予,剂量 100mg/Kg,每 2小时 1次共 5次。最后一次给药后 1小时,将大鼠过量麻醉后以4%多聚甲醛动脉灌注固定,取脑标本,进行病理及免疫组织化学检查。通过神经干细胞的特异性标记物nestin染色阳性细胞计数,了解神经干细胞的存在部  (本文共59页) 本文目录 | 阅读全文>>

南方医科大学
南方医科大学

Protocadherin11X对神经干细胞增殖和分化的调控作用研究

在大脑皮层的发育过程中,皮层神经元是由位于大脑皮层侧脑室表层室管膜区和亚室管膜区的神经干细胞分裂产生的,并沿着暂时存在的放射状胶质细胞的纤维向皮层远端迁移,最后定居于固定细胞层,并最终参与产生结构严整的大脑皮层。从放射状前体细胞,至中间前体细胞,直至最终迁移至皮层板分化产生皮层神经元,这几个阶段是序列产生的,每个阶段都有其特异性的标记物(Pax6, Tbr2, Tbr1等)。已有研究表明成体干细胞的周围,存在着大量具有特定功能的细胞,它们提供了干细胞赖以生存的各种物质基础,对干细胞的自我更新和分化能力具有调控作用。胚胎期室管膜区和亚室管膜区存在大量的神经干细胞,它们周围存在的微环境是否同样对神经干细胞增殖、分化功能发挥调控作用,以及通过何种机制发挥作用,尚未可知。研究发现大脑皮层的神经干细胞干性的维持与周围环境之间可能存在某种联系,因此,研究神经干细胞与周围环境之间发生联系的物质基础,对于深刻理解神经干细胞具有自我更新及分化能力...  (本文共146页) 本文目录 | 阅读全文>>

《神经解剖学杂志》2007年01期
神经解剖学杂志

大鼠脊髓发育过程中神经干细胞的分布

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是指具有分化为神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞的能力,能自我更新并足以提供大量脑组织细胞的细胞[1]。本实验对SD大鼠进行5-溴-2-脱氧尿嘧啶(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)腹腔注射,应用免疫荧光染色技术检测大鼠不同发育阶段脊髓内BrdU、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、巢蛋白(nestin)阳性细胞的分布情况,为分离、纯化脊髓源性神经干细胞提供实验资料,同时为干细胞移植治疗脊髓病变提供理论依据。材料方法1.实验动物分组、取材成年未经产雌性SD大鼠21只,成年雄性SD大鼠12只,体重220~250ɡ,雌鼠随机分7组,每组3只。将成年雌雄SD大鼠于晚20∶00时按2∶1比例合笼,次日晨8:00阴道涂片查精子,查到精子者记为受孕0d(E0)。将BrdU(Sigma)溶于无菌生理盐水...  (本文共5页) 阅读全文>>

《郑州大学学报(医学版)》2011年02期
郑州大学学报(医学版)

弥漫性脑损伤大鼠皮质和海马中BrdU和Nestin蛋白的表达

闭合性弥漫性脑损伤(diffuse brain injury,DBI)是法医实践经常遇到的一种颅脑损伤,这种类型的脑损伤无集中的脑挫伤表现,病理形态改变无明显的时序性变化,需要寻找与其损伤相关的生物学指标来帮助推断损伤时间。目前,国内法医病理学者[1]对特异性蛋白在脑损伤后的变化规律有部分研究,但对DBI的研究较少。作者观察了大鼠DBI后不同时间内皮质和海马中5-溴-2-脱氧尿苷(Br-dU)和巢蛋白(neuroepthelial stem cell protein,Nes-tin)表达的变化,探讨其与脑损伤时间的关系,为DBI时间的鉴定提供依据。1材料与方法1.1实验动物和分组成年健康SD大鼠36只,雌雄不限,体质量(250±20)g,由河南省实验动物中心提供。随机分为对照组(6只)和实验组(30只)。实验组根据伤后不同时间取材,分为损伤后1、3、7、14和28d组,每组6只。所有动物室温饲养,自由进食水。1.2动物模型的建立...  (本文共4页) 阅读全文>>

《西安医科大学学报》2002年02期
西安医科大学学报

大鼠脑发育过程中神经干细胞分布的免疫组织化学研究

近年来 ,不断有学者[1~ 3] 报道在胚胎和成年动物神经系统存在神经干细胞 ,自我更新和多分化潜能是神经干细胞的两个基本属性[4] ,打破了以往认为神经组织是非再生性组织的观念。神经巢蛋白 (nestin)是神经干细胞的标志性抗原 ,属于第Ⅵ类中间丝蛋白质。nestin表达起始于神经板的形成 ,在神经元迁移和分化开始后逐渐消失。为了明确神经干细胞在动物不同发育时期的脑内动态变化 ,本文采用免疫组织化学ABC法研究不同大脑部位nestin阳性细胞分布 ,为探讨神经系统发育提供形态学资料。1 材料和方法1 .1 实验动物及组织制备 SD大鼠 40只 ,分为胚胎 1 8d(E1 8)组、1d组、3d组、5d组、7d组、1月组、成年组 ( 4月龄 )和老年组 ( 1 2月龄 ) ,雌雄不限。取孕 1 8dSD大鼠 1只 ,用 2 0 0 g·L- 1 ( 2 0 % )乌拉糖腹腔注射麻醉后 ,颈椎脱臼法处死。取出胎鼠 ,断头取脑 ,经...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国应用生理学杂志》2013年02期
中国应用生理学杂志

血管性痴呆大鼠脑室管膜下区和齿状回神经干细胞增殖分化的动态变化

近年来的研究已证实,在成年哺乳动物脑内存在大量神经干细胞(neural stem cell,NSCs),而且在一定条件下能够增殖,并向特定方向分化为神经元、少突胶质细胞和星形细胞等神经细胞[1],但对NSCs增殖分化的研究结果并不一致,而且缺乏长期的动态研究。神经颗粒素(neurogranin,Ng)是一种成熟神经元突触后特异性蛋白和特异性标记物[2],本课题组前期研究表明,血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马CA1区Ng及其磷酸化水平持续降低可能与空间学习记忆功能障碍有关[3],那么,NSCs分化的神经细胞能否表达Ng,进而参与VD大鼠脑损伤的修复与重建目前尚未见报道。因此,本研究采用BrdU/Ng免疫荧光单标和双标技术,观察不同时间点VD大鼠SVZ和DG区NSCs增殖和分化的动态变化,以期为临床治疗VD提供理论依据和新的思路。1材料与方法1.1动物分组与处理健康SD大鼠,月龄3~4月,雄性,体重(2...  (本文共5页) 阅读全文>>

遵义医学院
遵义医学院

促红细胞生成素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后BrdU、Nestin表达的影响

目的研究促红细胞生长素(erythropoietin, EPO)早期对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后(hypoxic ischemic brain damage, HIBD)海马齿状回颗粒下带(SGZ)5-溴脱氧尿嘧啶(5-bromo-2-deoxyuridine, BrdU)和海马齿状回DG区巢蛋白(Nestin)表达变化的影响,从神经细胞再生分化和行为学两方面探索不同剂量EPO早期对新生鼠HIBD的保护作用,为临床应用EPO治疗新生儿缺氧缺血性脑病选择合适的治疗剂量提供实验依据。方法新生7日龄Wistar大鼠160只随机分为HIBD生理盐水对照组、假手术组、EPO治疗Ⅰ组、EPO治疗Ⅱ组、EPO治疗Ⅲ组,每组32只,通过结扎并剪断7日龄新生大鼠右侧颈总动脉,吸入8%02+92%N2的低氧气源2小时制备新生鼠HIBD模型。EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别于缺氧缺血完成后即刻注射rhEPO5u/g、10μ/g、15u/g, HIBD对照组...  (本文共47页) 本文目录 | 阅读全文>>