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紫杉醇诱导成骨肉瘤细胞凋亡及Caspase-6基因对成骨肉瘤细胞的凋亡诱导作用

紫杉醇是新型广谱高活性抗癌药,其独特的作用机理是促进微管聚合并稳定微管结构,诱导肿瘤细胞凋亡。本文应用形态学观察,MTT分析法,DNA梯状电泳,流式细胞术检测术,研究了紫杉醇对成骨肉瘤细胞系SOSP-9607的细胞毒效应。结果发现,紫杉醇对SOSP-9607的细胞毒作用主要是通过诱导凋亡实现的。并且证实紫杉醇在体外对成骨肉瘤细胞株SOSP-9607有较强的杀伤作用。哺乳动物体内发现了多种半胱氨酸蛋白酶,这些结构特点相似的酶构成了一个蛋白酶家族,称之为Caspase家族。它在细胞凋亡过程中起着重要作用,根据Caspase在级联反应中的作用和活化的先后,Caspase的14个成员分为启动性和效应性Caspase。启动性Caspase在细胞凋亡信号和调节因子的作用下首先活化,再激活效应性Caspase、活化的效应性Caspase作用于相应的箩四军医大学博士学位论文底物导致凋亡。Caspase-6是一种效应Caspase分子,研究表明o  (本文共72页) 本文目录 | 阅读全文>>

山东大学
山东大学

棉铃虫Ha caspase-1和Ha hsc70基因克隆及表达研究

棉铃虫(Helicoverpa armigera)属于鳞翅目夜蛾科(Lepidoptera Noctuidae),在世界各地广泛分布,危害棉花、谷物、玉米、土豆、大豆、高粱和烟叶等农作物达上百种,往往造成巨大的经济损失,是我国和世界农业的主要害虫之一。目前棉铃虫防治中使用的大多数化学农药对环境和人类健康有害,而对于转基因作物如Bt抗虫棉的安全性也存在争议。因此在理论研究的基础上,发展新型生物农药一直是害虫防治的研究热点。细胞凋亡,又称程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD),系机体生长发育、细胞分化以及病理状态中细胞自主性死亡,以清除多余、受伤或有害细胞而维持机体动态平衡,是机体正常生长发育过程中所必需的。本文从棉铃虫中克隆了两个在细胞凋亡中发挥重要作用的基因,Ha caspase-1和Ha hsc70,对它们的基因及演绎蛋白的序列进行了分析,并对Ha caspase-1的表达模式、调控和功能进行了研...  (本文共136页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
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抗氧化剂在噪声性毛细胞损伤中的作用及其对凋亡相关基因表达的影响

本实验建立大鼠NIHL及抗氧化剂干预模型,测试噪声暴露前、后听阈阈值,应用耳蜗基底膜铺片苏木素染色及PI染色,明确单纯噪声与抗氧化剂干预实验对细胞凋亡的影响及听阈阈值变化。通过检测大鼠耳蜗组织中MDA含量及SOD活性变化,从生化代谢水平明确NIHL的致病机制及抗氧化剂的拮抗途径,通过分析细胞凋亡与Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、NF-κB表达的相关性,从分子及蛋白水平明确抗氧化剂对噪声暴露所致耳蜗细胞凋亡的保护作用及可能的调节机制;同时采用抗氧化剂联合干预实验,探讨了联合应用对噪声损伤耳蜗及听功能的协同保护作用。首次发现VC和GSH通过抑制耳蜗组织caspase-3和caspase-9的转录和表达,降低噪声导致的毛细胞死亡和听阈值增高,VE实施听觉保护的途径独立于caspase系统,可能与NF-κB活性抑制有关。另外还发现VE、VC和GSH通过促进耳蜗组织Bcl-2的转录和表达,降低噪声导致的毛细胞死亡和听阈...  (本文共104页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国医科大学
中国医科大学

Fas, caspase-3, bcl-2在骨关节炎软骨中的表达及意义

前言骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种最常见的关节疾病,也是引起中老年人关节疼痛的最常见原因,严重影响中老年人的生活质量。近十年来,随着现代人活动频率和强度的增加,世界范围内OA的发病率出现了一个新特点,即发病年龄逐步年轻化。然而,临床上对OA患者的治疗,主要是缓解关节疼痛、改善功能以及人工关节置换术,目前尚缺乏从根本上控制和治疗OA的关键(软骨破坏和骨赘形成)的有效方法。OA涉及整个滑膜关节,包括软骨、滑膜及软骨下骨,这些组织的细胞都有相对独立的启动能力并引起OA的发生,无论最初的损伤是什么,其最后通路都是关节软骨的破坏、关节的重塑及软骨下的骨质硬化。OA发病机制至今尚不十分清楚,涉及全身及局部的许多因素,可能是一种综合的机制。研究表明,细胞凋亡参与了OA的发生发展。在OA关节软骨的一定区域尤其是钙化层,经常发现大量的空白区,被证实是细胞凋亡的结果。凋亡细胞的增多导致功能软骨细胞的减少,而且由软骨细胞合成的细...  (本文共57页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国医科大学
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小鼠皮肤切创愈合过程中caspase抑制剂对caspase活性的影响和对细胞凋亡抑制作用的研究

皮肤切创愈合过程是机体保持组织完整性而产生的一个连续而复杂的过程,大致分为三个阶段,即炎症期、增生期和组织重建期,有多种细胞因子和炎症细胞参与。研究表明,皮肤损伤愈合过程中保持细胞数量的平衡是通过程序性细胞死亡(programmed cell death),即细胞凋亡(apoptosis)这一机制完成的[1]。我们的前期研究认为caspase家族成员可能参与皮肤损伤愈合过程中多型核细胞、单核细胞、成纤维细胞这三种细胞的凋亡,并且caspase家族成员有望成为用于皮肤损伤时间推断的指标[4-5]。而且在皮肤切创愈合过程中caspase的表达、激活情况对参与损伤愈合中细胞凋亡的影响和对组织愈合的影响尚未见报道,也未见关于在体研究参与皮肤损伤愈合过程中细胞凋亡机制的研究报道。Q-VD-OPH(Quinolyl-Valyl-O-methylaspartyl-[-2,6-difluorophenoxyl]-rr,ethyl ketone)...  (本文共96页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中科技大学
华中科技大学

细胞凋亡过程中caspase蛋白酶激活的光学成像研究

细胞凋亡(Apoptosis)又称程序性细胞死亡(Programmed cell death简称PCD),是指细胞在内、外因子的严格控制下一种有步骤有活性的生理性自行消亡的过程。现已公认,细胞凋亡后期的共同途径是caspases的激活。因此细胞内caspase蛋白酶的激活情况对研究细胞凋亡发生发展的机制变得尤为重要。然而传统方法,如化学荧光染色、免疫荧光、放射性标记等很难做到在活细胞生理条件下实时的对细胞内caspase蛋白酶的激活进行动态研究。目前,一种被称为荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer, FRET)也称为非辐射能量转移的技术可以很好地成像活细胞内包括蛋白酶激活的一些分子活动,从而弥补了这种缺陷。本研究基于FRET技术,应用基因工程手段针对特定的caspase蛋白酶设计FRET探针,对多种caspase蛋白酶的酶活动力学进行了实时动态地成像,在获得稳定表达该探针...  (本文共115页) 本文目录 | 阅读全文>>