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二氢吡啶类钙拮抗剂对大鼠胃底平滑肌5-HT受体功能的影响及其机制的研究

本研究以富含5-HT_(2B)受体的大鼠胃底平滑肌细胞为模板,观察了二氢吡啶类钙拮抗剂2,6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-1,4-二氢-3,5-吡啶二羧酸-3-甲酯-5-正戊酯(Mn9202)、拉西地平(lacidipine)对5-HT_(2B)受体功能的影响,并对其影响机制进行了较为深入的研究。1.5-HT在大鼠胃底平滑肌细胞中对钙离子的调节机制实验中选用单细胞Ca~(2+)时空变化为指标,研究了5-HT在大鼠胃底平滑肌细胞中对钙离子的调节机制。结果表明,在大鼠的胃底平滑肌细胞,5-HT激动了5-HT_(2B)受体,通过CICR机制引起的[Ca~(2+)]i的升高,且这一作用受到G蛋白、PLC和PKC的调控。2.二氢吡啶类钙拮抗剂Mn9202的抗5-HT的作用通过离体收缩实验,观察了二氢吡啶类钙拮抗剂Mn9202对5-HT收缩胃底平滑肌的影响,结果发现,Mn92021、10μmol/L孵育后,使5-HT的量效曲线右移,且剂量  (本文共102页) 本文目录 | 阅读全文>>

《第四军医大学学报》2002年04期
第四军医大学学报

大鼠胃底平滑肌细胞的培养

1 材料和方法1 .1 材料 高糖 DMEM培养液 ,Gibco公司 ;新生小牛血清(NBS) ,杭州四季青生物技术研究所 ;胰蛋白酶 ,华美公司 ;胶原酶 型 ,Sigma公司 ;兔抗鼠α- actin单克隆抗体 ,武汉博士德公司 .1 .2 方法 无菌条件下剪取大鼠及乳鼠胃底 (1~ 3 d) ,将剪下后的组织立即置于预冷含双抗的无菌 Hanks液中 ,去除食物残渣及内膜 ,留下肌层和外膜 ,以无菌的 Hanks液冲洗 4~5次 ,刮除内膜 ,用冷的 Hanks液冲洗 3~ 4次 ,剪成 1 mm3的小块备用 . 1贴块法培养 :用吸管将置于培养液 (含小牛血清 ,0 .3 g· L-1 谷氨酰胺 ,1× 1 0 5U· L-1 青霉素 ,1 0 0 mg·L-1链霉素 )中的成年大鼠胃底小组织块种植于培养瓶壁上 ,密度约 5块· cm-2 ,接种后补足培养液至所需体积 ,翻转放于培养箱内 ,4h后将培养瓶轻轻翻转过来 ,绝...  (本文共2页) 阅读全文>>