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表达和共表达H9亚型禽流感病毒血凝素基因和鸡Ⅱ型干扰素基因的重组鸡痘病毒

H9亚型禽流感病毒(AIV)近年在我国部分地区广泛流行,给养禽业造成了严重的经济损失。油乳剂全病毒灭活苗虽对该亚型禽流感的控制发挥了重要作用,但由于其存在干扰免疫监测及成本较高等缺点,使用受到了限制。为了研制新型禽流感疫苗以克服上述缺点,我们对H9亚型AIV中国分离株的血凝素(HA)基因和鸡Ⅱ型干扰素基因(IFN-Ⅱ)进行了克隆、测序和分析,构建了表达HA基因及共表达HA基因和鸡IFN-Ⅱ基因的两种重组鸡痘病毒(rFPV-HA、rFPV-HA-IFN-Ⅱ),并测定了它们的免疫效力。1 H9亚型AIV中国分离株HA基因cDNA的克隆及序列初步分析以酚-SDS法提取H9N2亚型AIV中国分离株A/Chicken/China/F/1998(简称F株)的基因组RNA,以此为模板,采用cDNA合成法及反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增到长度分别为1.1Kb和0.8Kb的两段HA基因片段。测序结果表明,这两个片段覆盖了HA基因的完整  (本文共111页) 本文目录 | 阅读全文>>

扬州大学
扬州大学

共表达新城疫病毒融合蛋白基因和H9亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力

新城疫是由副粘病毒科的新城疫病毒(Newcastle diseae virus,NDV)引起的一种烈性家禽传染病,它对我国养禽业的危害最为严重。低致病性H9亚型禽流感病毒(Avian Influenza virus,AIV)是目前影响我国养禽业的主要AIV亚型,它对我国养禽业也已造成了严重的经济损失。当前我国对ND和H9亚型AI的控制主要应用常规疫苗的免疫接种。但是作为我国目前控制ND和H9亚型AI流行的重要手段,常规疫苗的免疫接种会干扰现有技术条件下的免疫监测和流行病学调查。而且油乳剂灭活疫苗使用后会引起严重应激,并且生产成本偏高等。为了研制一种可以克服上述缺点的新型载体联合疫苗,本研究用鸡痘病毒(Fowlpox viros,FPV)作为表达载体,构建了能够同时表达NDV融合蛋白(Fusion protein,F)基因和H9亚型AIV血凝素(Hemagglutinin,HA)基因的重组鸡痘病毒,并对其免疫效力进行了评估。1.共...  (本文共124页) 本文目录 | 阅读全文>>

《微生物学报》2002年04期
微生物学报

表达H9亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力

禽流感病毒 (AIV)属正粘病毒科、A型流感病毒属。根据AIV对禽类致病性的差异 ,可将AIV分为高致病性AIV和低致病性AIV。高致病性AIV所导致的禽流感对养禽业具有毁灭性的打击 ,是国际兽疫局规定的A类疾病之一 ;低致病性AIV导致的禽流感对养禽业也有较大的危害性[1 ] 。因此 ,综合采用各种手段 ,包括疫苗接种的手段来控制H9亚型禽流感的进一步蔓延和扩散就显得十分必要[2 ] 。然而 ,目前在临床上较广泛使用的抗H9亚型禽流感全病毒灭活疫苗却存在着诸多缺限 ,包括价格较高、使用不便和使用后产生的针对AIV血凝素 (HA)和NP蛋白的抗体会干扰免疫监测和流行病学调查等[3] 。为了克服灭活苗的这些缺陷 ,本研究以鸡痘病毒作为表达系统 ,构建了表达H9N2亚型AIV中国分离株HA基因的重组鸡痘病毒 (rFPV HA) ,并初步研究了其免疫效力 ,旨在为控制H9亚型禽流感在我国的发生和流行提供一种新型疫苗。1 材料和方法1 ...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中国兽医杂志》2006年09期
中国兽医杂志

禽流感病毒H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的制备和鉴定

禽流感(A v ian In fluenza,A I)是由A型流感病毒(A IV)引起的一种禽类烈性传染病[1]。A型禽流感由表面抗原血凝素和神经氨酸酶不同分为H 1~15和N 1~9亚型。近年来,禽流感在许多国家和地区暴发造成严重经济损失,严重威胁养禽业,甚至威胁人类健康[2]。虽然1997年香港和2003年荷兰发生的禽流感病毒感染人并造成死亡的是高致病性禽流感病毒H 5N 1[3]和H 7N 7[4,5],但H 9N 2的危害也不容小视。近几年,通过血清学调查,不仅发现在221个禽流感阳性鸡群中93.6%为H 9亚型[6],而且发现H 9N 2型禽流感病毒不仅能感染人而且在深圳、汕头地区人群和禽类中广泛分布,人H 9N 2很大可能来源于鸡H 9N 2毒株[7,8]。这就要求我们在对高致病性禽流感病毒防制高度重视的同时也要重视H 9亚型禽流感病毒的监控和防制。尽管不同国家对禽流感的防制策略不尽相同,但都把禽流感的早期快速诊断作...  (本文共3页) 阅读全文>>

《畜牧与兽医》2006年04期
畜牧与兽医

鸭源H9亚型禽流感病毒的分离与鉴定

禽流感(avain influenza,AI)是由A型禽流感病毒(avain influenza virus,AIV)引起的禽类传染病。水禽是禽流感病毒的主要宿主,多呈无症状感染。但自上世纪90年代以来,由高致病性禽流感病毒引起的鸭、鹅及其他野生鸟类感染和死亡也时有报道[1,2],监测水禽尤其是鸭群中AIV感染情况,对于禽流感的早期预测和防制有着十分重要的意义。为此,我们于2003年6~12月对广东部分地区鸭群AIV感染情况进行了调查,现将结果报告如下。1材料与方法1·1材料SPF鸡胚购自北京梅利亚实验动物有限公司;AIV琼脂扩散抗原、AIV型特异性血清、抗禽流感病毒HA亚型(H1-H14)血清、禽流感阳性血清购自哈尔滨兽医研究所;ND、EDS-76阳性血清购自中国兽药监察所。1·2样品采集与处理选取广东省21个健康鸭群,用无菌棉拭子采集鸭泄殖腔内容物392份,浸泡于灭菌生理盐水,挤出液于4℃、3 500r/m离心20 m in...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国预防兽医学报》2011年06期
中国预防兽医学报

H9亚型禽流感病毒血凝素特异性单因子血清制备

禽流感(Avian influenza,AI)是由正粘病毒科A型流感病毒引起的一种禽类(家禽和野禽)的感染和/或疾病综合征[1],AI病毒(AIV)亚型众多,其中H9N2亚型AIV在我国家禽中广泛存在[2],虽然该亚型病毒致病力低,但临床上常与大肠杆菌和支原体等混合感染,影响家禽的产蛋率,同时给养禽业造成一定的经济损失。相关文献显示H9N2亚型AIV能够感染人类,使得H9N2亚型AIV具有比较*Corresponding authorpCAGGS的293T细胞阴性对照。荧光显微镜下观察试验结果。1.5 H9亚型AIV抗血清的制备将24只1月龄SPF鸡分为6组,每组4只。每只腿肌注射200μg(1μg/μL)重组质粒。免疫后每周采血,HI试验检测抗体效价,待效价达到峰值时心脏采血收获血清。1.6敏感性试验将收获的血清与同源抗原、H9亚型AIV标准血清和抗原进行交叉HA-HI试验,检测其灵敏度。1.7特异性试验将收获血清及H9亚型A...  (本文共4页) 阅读全文>>

《畜牧与饲料科学》2016年11期
畜牧与饲料科学

H9亚型禽流感疫苗研究进展

1禽流感病毒的病原学特点禽流感病毒分类上属正黏病毒科,流感病毒属,核酸类型是单链负股RNA。流感病毒囊膜表面上有2种糖蛋白纤突,分别是血凝素和神经氨酸酶。根据这2种纤突的不同,可将禽流感病毒分为16个HA(H1~H16)亚型和9个NA(N1~N9)亚型[1]。H5和H7亚型由于致病性比较强,可引起禽类的大批死亡,同时可以感染人类,并导致人的死亡,所以称为高致病性禽流感。H9亚型为低致病性禽流感,感染后不会导致群体大批死亡,但是感染率比较高,会导致产蛋率大幅度下降,给养殖业也会带来较大的经济损失。同时,流感病毒变异速度极快,H9亚型禽流感极有可能由原来的低致病性禽流感进化为致病能力更强的毒株[2]。陈陆的研究发现,H9N2还具有免疫逃避的特点,这些特点决定H9亚型禽流感往往会导致免疫失败[3]。2 H9亚型禽流感的流行病学特点1994年,广东省某鸡场分离到H9亚型禽流感病毒。自此以后,全国各地区均陆续报道从发病的鸡体内分离到H9亚...  (本文共2页) 阅读全文>>