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中国蓝舌病毒S10、L2基因序列分析及S10基因克隆表达

蓝舌病病毒(Bluetongue disease virus,BTV)是呼肠孤病毒科(Reoviridae)环状病毒属(Orbivirus)的成员,是引起反刍动物蓝舌病的病原。本研究首次对我国BTV疫苗株进行序列分析,并与野毒株(自然分离毒株)比较,建立了S10和L2基因系统发育进化树,经对S10基因编码NS3蛋白的二级结构和三级结构预测分析,进一步揭示了我国BTV的遗传背景。同时对BTV群特异性和型特异性RT-PCR鉴定方法,及NS3蛋白的克隆表达进行了研究。其主要内容和结果为:1、对25株中国BTV各血清型(其中1株疫苗株)及1株南非BTV-1型毒株S10基因进行RT-PCR扩增和核苷酸序列分析,并与Genbank中8株美国、1株澳大利亚及7株中国BTV毒株相应序列,共42株蓝舌病毒S10基因序列分析比较,构建了毒株间遗传关系的系统进化树。S10基因系统发生树分析,将BTV分为China group和US group二大基因  (本文共99页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物技术通讯》2008年05期
生物技术通讯

蓝舌病毒核酸检测技术研究进展

蓝舌病(bluetongue,BT)是一种侵害反刍动物的虫媒传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为须通报疾病(以前为A类传染病)[1],是国内外动物防疫和出入境检疫检验机构监测和防控的重点,也是牛源/羊源原料或制品病毒安全性检测中必检的主要疫病之一。在19世纪后期,南非引入美利奴羊后出现了致死性疫病——蓝舌病,这是对蓝舌病的最早报道。1949年后,蓝舌病广泛分布于热带、亚热带、温带的50多个国家和地区,成为世界性危害的虫媒传染病。随着全球气温逐渐变暖,2006-07~2006-10、2007-07~2007-11,欧洲许多国家纷纷暴发蓝舌病,使蓝舌病的分布范围发生了北移,引起国际社会和各国政府的高度关注[2-3]。我国于1979年在云南首次发现蓝舌病,目前已在云南、新疆、甘肃、陕西、四川等29个省、区检出蓝舌病毒(bluetongue virus,BTV)抗体阳性动物。目前,蓝舌病的确诊方法主要包括病毒分离鉴定、特异性血清学试...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国兽医科技》1986年04期
中国兽医科技

澳大利亚从牛体分离出2株新的蓝舌病毒株

澳大利亚分篙的第一株蓝舌病病毒系于1975年从在北部地区(澳)采集的库檬混合材料中被发现(StGeorge等1976b),后来证明该病毒(CSIRO)是一种新的蓝舌病病毒血清型并称之为 20型(Della一Porta等198la)。1979年,证明了从北部地区牛的血液中发现的另外两株病毒CSIRO154和CSIRO156也是蓝舌病病毒群的成员,但是不同于20型毒株(St George等1980)。把CSIRO154定为新的蓝舌病病毒血清型一21型(B.Erasmus,私人交流),同时证明了CSIRO156在血清学上与蓝舌病病毒 1型完全相同(Della—Porta等1981b)。在此。我们报道另外 2株澳大利亚蓝舌病病毒型的发现。 病毒株DPP90是1982年 2月23日从Torilla Flat研究农场的一头圈养阉牛的肝素抗凝血中分离到的。该毒株是按照St George等的方法,用BHK21细胞分离出来。于1982年3月 2日...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国兽医科技》1988年10期
中国兽医科技

凝胶电泳技术在蓝舌病毒核酸研究中的应用

蓝舌病毒(Bluetongue Virus,BTV)属于环状病毒属,其基因组为双股核糖核酸(RNA),由10个片段组成,分子量范围为0.3~2.5x10’。BTV的血清型较多,变异快,这在遗传上反映了其核酸有较大的异质性,在电泳表型上,不同型的毒株亦呈现不同的电泳图谱,因此,BTV的核酸电泳在诊断或分类上具有重要意义,同时,它又是进行BTV分子生物学研究最基本的技术。本文首先以BTV血清型10(BTV卫0)为代表型,建立应用琼脂糖和聚丙烯酚胺凝胶电泳技术来鉴定蓝舌病毒核酸的基本方法。 (一)材料与方法 1.BTV10的培养及核sk的抽提:BHH-21细胞在80%HEM、10%LH和10%犊牛血清的培养条件下长成单层,然后感染BTVI。(美国疫苗弱毒株),2~3天后收毒。BTV-10的核酸抽提分两个途径进行:①从感染细胞中抽提:基本上按KO08lik(1987)的方法进行,并稍加改进过程如下:收集感染后 2~3天的细胞,悬浮于NT...  (本文共2页) 阅读全文>>

《新疆畜牧业》2016年08期
新疆畜牧业

澳大利亚:蓝舌病检测获突破 澳期盼加大对华活牛出口

蓝舌病毒已成为中澳活牛贸易的最大阻碍,也级产业部资助。是澳大利亚与其它国家进行活畜、牲畜胚胎和精子蓝舌病毒检测:目前,几百个样品的病毒检贸易的障碍之一。蓝舌病毒主要在澳洲北部和东北测与识别可在1d内完成,以前这些则需耗时数周地区出现,未受感染地带也并非绝对安全,会受季才能完成。柯克兰表示,澳洲目前有可能在5万节影响而变化。目前南澳州、塔州和维州尚未发现多种昆虫中检测出单个的外来摇蚊。通过这项新这种病毒。ACBNews《澳华财经在线》报道,澳洲技术,科学家们甚至能发现每种昆虫都以哪种动科学家一直致力于蓝舌病毒监测测试技术的研发,物为宿主。并在近日取得突破性进展。最新研发出的一种新型科学家们认为,有了更加先进的蓝舌病毒检高科技监测技术能够检测出外来昆虫携带的蓝舌病测技术,澳洲将能保障活牛顺利出口,巩固向中毒,监测结果的更新进程也获得突破,变原先的每国等市场的准入地位。新州初级产业部高级研究周更新为每日更新。该突破性技术由国家虫媒病毒...  (本文共1页) 阅读全文>>

《武汉大学学报(医学版)》2014年06期
武汉大学学报(医学版)

一种针对蓝舌病毒两个不同基因片段的荧光定量PCR检测技术

蓝舌病毒(Bluetongue virus,BTV)为双链RNA病毒,基因组由10个RNA双链组成,无包膜,有双层蛋白质衣壳,是呼肠孤病毒科(reoviridae)环状病毒属的成员[1],该病毒是引起反刍动物蓝舌病的病原体,我国已有29个省(市、自治区)发现蓝舌病[2],由于目前尚无十分有效的治疗药物和疫苗,蓝舌病的预防和控制已经成为国际社会和各国政府高度重视的问题之一[1,2]。BTV不能感染人的正常细胞和引起人的疾病,但研究发现,BTV能选择性地杀死人肿瘤细胞,是一种有效的溶瘤病毒,具有临床肿瘤治疗的潜在应用前景[3];此外,该病毒还可作为一种干扰素诱生剂,激活天然免疫功能,发挥抗病毒感染的作用。因此,BTV相关的研究已逐渐成为生命科学领域的研究热点之一[4,5]。由于BTV基因组存在频繁的基因漂移、重组和基因重排,目前应用的BTV定量检测技术只能检测少数几种BTV血清型,其灵敏度和特异性也有待进一步提高,而且针对不同血清型...  (本文共4页) 阅读全文>>