分享到:

鸡传染性支气管炎病毒JS/95/03和SD/97/01株S1糖蛋白在昆虫细胞中的表达及其免疫原性评价

用RT-PCR法分别扩增了IBV肾型毒株JS/95/03和呼吸型毒株SD/97/01的S1全基因,并克隆到pMD18-T克隆载体中。通过酶切鉴定基因的插入和连接方向,构建了分别含JS/95/03和SD/97/01的S1基因的重组质粒pMDJS95032S1和pMD9701S1。对两个毒株的S1基因测序后与10个参考毒株进行了比较和分析。结果表明,JS/95/03和SD/97/01分别与M41和H120株亲缘关系最近,它们可能是疫苗毒株的变异株;JS/95/03和SD/97/O1的亲缘也较近,两者S1蛋白间仅有23个氨基酸的差异,其中有15个位于前130个氨基酸中。在126位氨基酸附近存在着6个氨基酸的差异(116、117、118、128、129、130位),该区域可能与两毒株的致病性差异有关。根据氨基酸序列对两毒株S1蛋白的二级结构进行了预测,比较后发现一个或极少数氨基酸的差异即可导致S1蛋白二级结构和抗原性的改变。为了构建表达  (本文共112页) 本文目录 | 阅读全文>>

《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2001年03期
浙江大学学报(农业与生命科学版)

禽传染性支气管炎病毒S1基因植物表达载体的构建

禽传染性支气管炎病毒 (Avian InfectiousBranchitis Virus,IBV)属冠状病毒科冠状病毒属 ,因 IBV抗原性的漂变可引起呼吸型、肾型、腺胃型、肌肉型等不同病变类型的鸡传染性支气管炎 ,对养禽业危害极大 ,是最重要的传染病之一[1] .该病毒属单股正链 RNA病毒 ,具有 S、M和 N三种结构蛋白 . S蛋白是由 S1和 S2组成的寡聚蛋白 ,S1和 S2均为糖蛋白多肽 ,其分子量分别为 90 k D和 84k D,用酶去除寡糖后S1和 S2的分子量分别为 6 4k D和 6 1 k D[2 ,3] .Cavanagh[4 ]确证 S1蛋白是宿主的主要保护性抗原 ,能诱导机体产生中和抗体和血凝抑制抗体 ,继而使机体得到保护 ,在免疫学方面起着重要作用的 S1基因一直是世界各国研究该病毒的热点 .自 2 0世纪 90年代以来 ,国内外对 IBV的研究取得了长足进展 ,已有关于 IBV S1基因在昆虫杆...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国兽医学报》2007年06期
中国兽医学报

禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的表达

禽传染性支气管炎是由禽传染性支气管炎病毒(In fectious bronch itis v irus,IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触性的传染病。IBV的基因组为单股正链RNA病毒,包括主要编码4种结构蛋白:纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)、核蛋白(N)、小囊膜蛋白(sE)。S蛋白构成了IBV的最表层纤状突起,包括2种糖多肽S1和S2。S1蛋白是IBV最主要免疫原基因,其作用主要表现为:(1)刺激机体产生特异性中和抗体和血凝抑制抗体,决定病毒的组织嗜性;(2)在病毒吸附细胞过程中发挥重要作用;(3)在血清学分类上起决定性作用。已有在大肠杆菌、昆虫杆状病毒、马铃薯、毕赤酵母pP ICZA中表达IBV S1蛋白的报导,但是还未见IBV S1蛋白利用分泌型表达载体pP IC 9K在毕赤酵母中表达的报导。毕赤酵母表达系统是一类能以甲醇为唯一碳源和能量来源的酵母菌,它和其他真核、原核表达系统相比,具有高表达、高稳定、高密度发酵、适度糖基...  (本文共4页) 阅读全文>>

《扬州大学学报》2006年02期
扬州大学学报

鸡传染性支气管炎病毒S1基因的真核表达及其产物的免疫原性

鸡传染性支气管炎(IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病。IBV主要侵害呼吸道、肠道和泌尿生殖道,导致鸡的生产性能下降和大量死亡。虽然灭活苗和减毒苗的应用使该病的损失有所降低,但由于IBV具有高度的变异性,其血清型很多,各种血清型间的交叉保护反应较低,IB在免疫群内爆发频率逐渐增加,给养禽生产造成严重的经济损失[1-2]。IBV属单链RNA病毒,是冠状病毒中第1个被发现的病毒。病毒粒子有4种结构蛋白,分别为纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)、小囊膜蛋白(E)和核衣壳蛋白(N),其中纤突蛋白(S)为其主要结构蛋白,由1 145个氨基酸组成,转译后分为S1和S2[3]。中和表位和细胞黏附部位主要位于S1。目前研究显示,S1蛋白是研制IB新型疫苗的主要候选抗原。本试验通过RT-PCR扩增出IBV M 41株的S1基因,将S1基因与真核表达质粒pVAX 1进行连接,构建出重组真核表达质粒pVAX 1-S1,并...  (本文共4页) 阅读全文>>

《华南农业大学学报》1980年20期
华南农业大学学报

鸡传染性支气管炎病毒D_(41) 株S1基因部分序列的测定

鸡传染性支气管炎病毒D41株S1基因部分序列的测定廖明辛朝安王林川(华南农业大学动物医学系,广州,510642摘要通过反转录及变退火温度PCR方法扩增出含先导序列的IBV广东地方分离株D41的S1基因cDNA,长度约1.7kb.利用双脱氧链终止法对其5′端测序,准确读到342个碱基,并确定了翻译起始密码子ATG的位置.关键词鸡传染性支气管炎病毒(IBV);D41株;S1基因;测序中图分类号S855.3鸡传染性支气管炎(IB)是严重危害世界养鸡业的一种病毒性疾病,其病原为鸡传染性支气管炎病毒(IBV).IBV的基因组核酸在复制过程中易发生突变和高频重组,从而导致该病毒血清型众多(Cavanaghetal,1992),并给IB的防治工作带来很大麻烦.现已证实,在IBV的3种主要结构蛋白中,纤突(S)蛋白的S1糖多肽亚单位与IBV的免疫原性关系最密切,血凝抑制抗体和多数病毒中和抗体由S1诱发,血清型特异抗体也主要是针对S1糖多肽的....  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国预防兽医学报》1999年04期
中国预防兽医学报

鸡传染性支气管炎病毒S1基因免疫对鸡的保护作用

鸡传染性支气管炎(AvianInfectiousBronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(AvianInfectiousBronchitisVirus,IBV)引起的一种鸡的高度接触性、急性呼吸道疾病。感染鸡表现为喘息、气管罗音、咳嗽、打喷嚏等呼吸道症状,感染肾型毒株的病鸡还表现为严重的肾病变[1]。蛋鸡感染IBV表现为产蛋下降、产畸形蛋等。该病是继鸡新城疫、传染性法氏囊病和马立克氏病三大禽病后的又一较重要的传染病,给养禽业造成了严重损失。IBV属冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus),是有囊膜的单股正链RNA病毒。IBV基因组全长27608个核苷,编码三种主要的结构蛋白即纤突糖蛋白(S)、膜糖蛋白(M)和核衣壳蛋白(NP)。S蛋白存在于病毒表面,是由分别有2个(或3个)拷贝的S1和S2蛋白组成的寡聚蛋白,位于病毒粒子的表面,构成纤突结构[2]。S1蛋白是IBV最主要的免疫原蛋白...  (本文共4页) 阅读全文>>