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猪链球菌2型毒力相关蛋白的检测及其基因片段的克隆与表达

136kD的溶菌酶释放蛋白(muraminidase-releasedprotein,MRP)和110kD的胞外蛋白因子(extracellular proteinfactor,EF)是猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)的毒力相关蛋白。提取猪链球菌2型江苏分离株HA9801的胞壁蛋白和胞外蛋白,分别进行SDS-PAGE,切割相对分子量为136kD的MRP和110kD的EF,按常规方法制备其抗体。用此抗体分别以免疫转印和ELISA法检测猪源链球菌18株国内分离株、1株德国分离株及1株猪链球菌2型人分离株的毒力相关蛋白。提取20株待检菌株的胞壁和胞外蛋白,经测SDS-PAGE,与HA9801株的MRP和EF的抗体作免疫转印。结果显示,11株MRP阳性,10株EF及EF~*阳性,MRP及EF的分布存在4种表型:MRP~+EF~+(8/20),MRP~+EF~*(1/20),MRP~+EF~-(1/20)  (本文共114页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
南京农业大学

猪链球菌2型在模型动物豚鼠体内的动态分布及基因免疫

用豚鼠建立了猪链球菌2型(Streptococcus suis Type 2)引致脑炎和败血症的动物模型,研究了猪链球菌2型在动物模型体内的动态分布。并将该菌毒力相关的溶菌酶释放蛋白基因(mrp)克隆到真核表达载体构建了真核表达质粒,并研究其对豚鼠的免疫效果。1 选用对猪具有致病性的猪链球菌2型江苏分离株HA9801感染豚鼠,引致脑炎及败血症,建立了动物模型。结果显示16~24日龄的豚鼠较易感,最佳感染途径是皮下注射,鼻腔、腹腔次之。感染豚鼠表现出典型脑炎的临床症状及病理变化。经重复试验检测了该菌株对豚鼠的LD_(50),从感染死亡豚鼠体内包括脑脊液、大脑、血液及各实质器官均可分离出该病原菌,与仔猪自然感染情况相似。该动物模型的建立,为进一步探究猪链球菌2型感染的体内动态分布、感染机制、毒力因子及免疫应答奠定了基础。2 用猪链球菌2型江苏分离株HA9801,皮下或鼻腔接种豚鼠,检测体内动态分布。结果显示:皮下接种后,该菌最早可于...  (本文共120页) 本文目录 | 阅读全文>>

《华北农学报》2017年04期
华北农学报

猪链球菌ssnA基因缺失突变菌株的构建及毒力分析

猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)是当前严重危害养猪业的一种最重要的病原菌,能够引起猪关节炎、脑膜炎、肺炎、心内膜炎、败血症甚至急性死亡[1-3]。根据猪链球菌表面多糖抗原分型,其目前主要分为35个血清型[4]。其中猪链球菌2型(SS2)分布最广,分离率最高,致病性最强,同时也是一种重要的人兽共患病原菌[5-6]。1968年丹麦首次报道了人感染猪链球菌的病例,随后在英国、美国、巴西、澳大利亚、西班牙及新西兰等国均有过人感染猪链球菌的报道[7-9]。1998年和2005年在中国江苏和四川分别发生了较大规模的人感染猪链球菌疫情,累计报告发病229例,死亡52例,对公共卫生安全造成了严重影响[10]。最近研究证实,多种血清型的猪链球菌均能感染人类[11]。目前,国内外缺乏对猪链球菌毒力因子和致病机制的全面了解,已确认与猪链球菌的致病性相关的毒力因子包括荚膜多糖(CPS)、溶血素(SLY)、胞外因子(EF)、...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中国预防兽医学报》2017年08期
中国预防兽医学报

广东地区猪群中猪链球菌流行病学调查分析

猪链球菌(,SS)是一种在猪体2结果中正常携带,能够导致猪和人发病的人畜共患病的动物源性微生物,该病原不仅能够导致猪的脑膜2.1 SS分离鉴定挑取在血平板上生长良好,菌炎、关节炎和败血症等[1],还能够引起人的脑膜炎落形态较小,灰白色、透明、边缘整齐、稍黏,肉和中毒性休克综合症,严重的可导致人畜死亡[2]。眼可见琢或茁溶血环菌落,经革兰氏染色,显微镜根据荚膜多糖(Capsular polysaccharide,CPS)合成基下观察一般呈蓝紫色,链状(长链或短链)排列的单因簇的差异,SS被分为35个血清型(1-34型,1/2菌落,扩大培养后进行16S r RNA的鉴定,保留阳型)[3],因32及34型与其它型差异较大,Nill建议性样品。将二者划为新种,命名为鼠口腔链球菌()[3]。2.2 SS PCR血清定型采用分型PCR方法检测另有相当数量无法定型的菌株存在[3]。SS 31种血清型(1~13、15~31、33)参考菌株基因S...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国兽医杂志》2012年07期
中国兽医杂志

猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性试验

猪链球菌病是由猪链球菌(Streptococcus suis,SS)感染引起的一种常见传染病,其危害日益严重。链球菌可引起猪的多种疾病,侵害各年龄段的猪只,通常以败血症、脑膜炎、关节炎、淋巴结炎为主要特征。人接触病死猪可感染发病[1]。按照荚膜多糖的差异,猪链球菌可分为35个血清型(1型~34型和1/2型),其中2型对猪和人均有很强的致病力,是一种重要的人兽共患病原体,此外,1型、7型、9型、14型也是引起猪感染的重要血清型[2]。本文为调查鲁西地区猪链球菌病的流行状况,对送检的186头份病死猪病料和采集的545头份临床症状健康猪的鼻拭子,分别进行了猪链球菌的分离鉴定、耐药性分析、致病性分析和血清型鉴定。结果病死猪分离到的猪链球菌占11.3%,表观健康猪群平均带菌率为5.14%,分离菌株的致病性不同,不同猪场菌株的耐药性存在差异,为该地区猪链球菌病的诊治提供了依据。1材料1.1菌株、试剂及实验动物C群马链球菌兽疫亚种(C5513...  (本文共5页) 阅读全文>>

《现代畜牧兽医》2010年07期
现代畜牧兽医

猪链球菌2型研究进展

猪链球菌(Streptococcus Suis,SS)属于球菌科、链球菌属,1966年由Elliott首次报告[1],1987年由Kilpper-Balz等再次进行了化学分类及DNA同源研究,认为应属于一个新种猪链球菌,并于同年得到官方承认的链球菌种别[2]。依据细菌荚膜多糖(CPS)将猪链球菌分为35个血清型,分别为1/2型和1~34型,其中2型猪链球菌致病性强、流行广,并可引起人类感染、甚至死亡,具有重要的公共卫生意义。1病原1.1分类猪链球菌2型(Streptococcus suis type2,SS2)又称猪链球菌血清2型或荚膜2型猪链球菌,分类上属于兰氏(Lancefield)R群[3],人医称之为血液链球菌2型,分类上属于兰氏分类法的R群。该病菌于1954年首先在英国从暴发败血症、脑膜炎和多发性关节炎的乳猪中分离到1株α溶血猪链球菌。1.2培养与生化特性猪链球菌2型多为圆形或椭圆形,单球或双球,少数呈短链状;直接经血...  (本文共3页) 阅读全文>>