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神经元NMDA损伤:脑片及神经元模型、药物保护作用及信号转导特点

脑缺血疾病是多发的中枢神经病变,是常见的致死致残原因,在人口老龄化的现代社会,其防治意义越来越重要,本类疾病的早期发现和治疗可以极大程度地降低致死致残率。故研究其损伤/抗损伤机制,探索其防治措施,具有重大的意义。在过去的10~15年越来越多的证据表明兴奋性毒性是缺血性脑损伤的最主要发病机理。NMDA受体在介导急性谷氨酸兴奋性毒性中起了关键性作用,NMDA受体的拮抗剂的使用能降低缺血性或低糖脑损伤动物模型中的神经元死亡。许多实验室都证明阻断了NMDA受体能降低短暂或永久性局灶性缺血模型的梗死面积。本实验室在脑缺血损伤研究中,已建立了整体局灶性脑缺血(大脑中动脉阻塞,MCAO)和全脑缺血(四血管阻断,4VO)模型。在局灶性脑缺血模型中,已经发现半胱氨酰白三烯受体拮抗剂ONO-1078(pranlukast)对脑缺血损伤有保护作用。为了更加深入地研究脑缺血损伤机制,探讨脑缺血损伤中起主要作用的兴奋性氨基酸毒性一机制及其治疗药物,本研究  (本文共100页) 本文目录 | 阅读全文>>

《徐州医学院学报》2000年04期
徐州医学院学报

脑缺血再灌注对海马NMDA受体2A亚基酪氨酸磷酸化的影响

脑缺血时 ,胞外Ca2 +可通过N -甲基 -D -天冬氨酸受体 (N -methyl -D -aspartatereceptor,NR)等离子通道大量内流 ,导致胞内钙超载 ,引起细胞损伤[1] 。而NR通道的开放性可能与其磷酸化状态有关[2 ,3] 。本实验以四动脉结扎SD大鼠建立前脑缺血模型 ,研究了在缺血性脑损伤中NMDA受体 2A亚基 (NR2A)酪氨酸磷酸化水平的变化 ,以期进一步揭示NR在缺血性脑损伤中的作用机制。1 材料和方法1.1 试剂 抗NR2A抗体、Na3VO4 和Leupeptin等所有蛋白酶抑制剂为Sigma产品。抗磷酸酪氨酸单抗为Pharmingen产品。ProteinAsepharoseCL - 4B和硝酸纤维素薄膜 (NC膜 )为Pharmacia产品。MOPS和HEPES为Amresco产品。NBT BCIP染色剂为Pro mega产品。其余试剂为国产分析纯。1.2 动物及脑缺血模型制备 雄性S...  (本文共3页) 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

大鼠全脑缺血及NMDA脑损伤中ONO-1078保护作用及相关分子变化特点

脑缺血是致死致残率很高的常见疾病,因此,深入研究脑缺血损伤及抗损伤机制,寻找安全有效的治疗措施,已成为当前神经药理学研究的重要任务之一。兴奋性氨基酸受体N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体在脑缺血损伤的病理过程中起重要作用。脑缺血引起NMDA受体的异常表达和激活,钙离子大量内流,后者进一步触发神经元损伤和迟发性神经元死亡。另一方面,炎症细胞黏附分子,如血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)也参与脑缺血损伤过程。脑缺血后,细胞黏附分子表达上调,诱导随后的脑组织炎症反应和神经损伤。半胱氨酰白三烯(LTC_4,D_4,and E_4)受体拮抗剂ONO-1078{pranlukast,4-oxo-8-[p-(4-phenylbutyloxy)benzoyl-amono]-2-(tetrazd-5-yl)-4H-1-benzopyran hemihydrate}具有强大的抗炎和抗哮喘作用,用于哮喘的临床治疗。已有越来越多的证据表明,脑缺血...  (本文共98页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

纳米型NMDA对肥育猪生长和胴体组成的影响及NMDA调控生长机理研究

本课题以N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)为试验材料,以“杜洛克×长白×大白”肥育猪为试验对象,研究普通型、吸附型(纳米硅酸盐为载体)和钠米型(纳米级)NMDA对猪生长性能、胴体组成和内分泌水平的影响,探讨了NMDA对猪生长激素和生长抑素动态分泌模式、腺垂体生长激素(GH)mRNA丰度和下丘脑生长激素释放激素(GHRH)mRNA丰度的影响,并通过体外细胞培养试验,研究NMDA对腺垂体生长激素和下丘脑细胞信使物质分泌的影响。饲养试验中每种形式NMDA均以50,100,150mg/kg剂量添加于基础日粮。选择300头体重接近的肥育猪,随机分为10组,每组3个重复,每个重复10头,公母各半。其中一组设为对照,其余分别饲喂上述相应试验日粮,饲养试验为期6周。饲养试验结束前,从对照组及生长最佳组分别选取试验猪6头,喂食相应试验日粮,1h后,分别耳静脉采血,试验于13∶00至16∶00,15min间隔采样一次,并分别制备血清进行生长激素及生...  (本文共127页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

NR2A亚单位胞内C末端区对NMDA受体装配、运输以及表面表达的影响

NMDA受体是由NR1和NR2亚单位组成的异聚体复合物,亚单位之间的装配对于NMDA受体通道的形成和表面表达至关重要。以往的研究提示,NR2亚单位胞内C末端区可能参与调节NMDA受体的表面表达和突触定位。本研究的第一部分通过一系列C末端截短的NR2A亚单位突变体的构建以及NMDA受体膜表面表达和功能的检测,在HEK293细胞和培养海马神经元研究了NR2A亚单位的C末端在NMDA受体装配和表面表达中的作用。结果发现,当NR2A亚单位的C末端截短后其TM4下游分别剩下59、5、3个氨基酸残基时(2AΔC59、2AΔC5和2AΔC3),它们均能与NR1-1a形成有功能的受体通道并表达于细胞膜表面,但是与未截短的NR2A相比其表面表达均有所下降;并且,当2AΔC5的TM4下游仅存的5个氨基酸EHLFY突变成EAAAA(2AΔC5_(EAAAA))时,仍可与NR1-1a形成受体复合物并表达于细胞膜表面。若将NR2A的C末端截短仅保留TM4...  (本文共79页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军军事医学科学院
中国人民解放军军事医学科学院

人NMDA受体主亚基M3M4环靶片段自身免疫抗兴奋毒性神经保护研究

脑血管疾病、脑外伤、脑肿瘤及其继发的脑内综合征(如脑心综合征、消化道出血等)、焦虑、抑郁、疼痛、癫痫、痴呆等重大神经、精神疾患,尽管发病原因各异,但其发生、发展均被证明与N-甲基-D-门冬氨酸受体(NMDAR,NR)异常有一定关联。试图通过选择性干预NMDA受体过度激活所介导的神经兴奋毒性,为上述若干致死、致残性疾患提供有效的防治手段,是近20多年以来基础与临床神经科学研究始终追求的一个重要目标。然而这种努力至今尚未在临床上取得相应成功。其原因可能至少有二:(1)已有NMDA受体拮抗剂或阻断剂的应用“空间窗”过大。NMDA受体在神经系统内分布广泛,具有重要生理功能。以往所检验的NMDA受体拮抗剂或阻断剂均能弥散通过血脑屏障,所以不仅作用于受累脑区的NR靶点,还会广泛影响未受累脑区的重要功能,这应该是导致“天使粉”苯环己哌啶(PCP)与Dizocilpine(MK-801)等显示有严重毒副作用因而难以进入临床的一个主要原因。(2)...  (本文共71页) 本文目录 | 阅读全文>>