分享到:

RbAp46——一种新的肿瘤抑制基因

细胞遗传特性表明,所有细胞均由基因相同的细胞衍化而来,一旦细胞癌变,癌的特征也由亲代癌细胞传给子代癌细胞,继而繁衍为一个恶性肿瘤组织块,而这些变化的生物学基础就是基因的异常改变。根据肿瘤形成和癌变的多基因,多阶段理论,在肿瘤形成过程中,除了有原癌基因激活外,还经常伴随一个或多个基因功能的失活或丢失,而后者对细胞增殖起着一个负调控作用,这类基因称为肿瘤抑制基因(Tumor Suppressor Gene)。目前被世界各国确认的肿瘤抑制基因有10余个。随着研究的深入,此基因家族在逐渐扩大,其中RB、P53、WT1、BRCA1等研究行较为深入。RbAp46是1991年从视网膜母细胞瘤(Rb)上分离出来的一种蛋白质,具有四个WD重复序列(Trp-Asp),并参与构建组蛋白去乙酰化酶复合体(HDAC),而后者与一些肿瘤相关基因的转录调控有关。在WT1基因的研究中,发现RbAp46可被WT1活化,为其下游基因,并有抑制细胞生长的作用。在13  (本文共98页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中华血液学杂志》2006年02期
中华血液学杂志

RbAp46基因激活IGFBP-rPl基因在K562细胞中的表达

视网膜母细胞瘤相关蛋白46(retinoblastoma一as- soeiated protei。46,RbA衅6)除与Rb蛋白相互作用 外还存在于多个酶体复合物中,如msin3复合物及 NuRD等。已有的研究证实RbA醉6在细胞生长、分 化过程中,在修饰、重塑染色质方面可能发挥着重要 作用川。Gua。等[’]将RbA砂6基因转入人类胚胎 肾细胞系293细胞中,发现RbA衅6基因的表达受 WTI基因的调控,并认为琪门{1基因的部分功能是 通过RbA砂6基因实现的。近年的研究发现 RbA时6基因抑制乳腺癌细胞株的生长,在乳腺癌 发生的早期起着重要作用〔’!。 我们将全长1.gkb的RbAP46基因的cDNA转 入白血病细胞系K562细胞和人脑膜胶质瘤细胞系 SHG44细胞,通过观察过度表达RbA醉6基因的单 克隆细胞株的细胞生物学行为,了解RbA砂6基因 对白血病细胞的作用,并利用分子生物学手段探讨 其作用机制。 材料和方法 1材...  (本文共4页) 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

RbAP46基因转染白血病细胞系的实验研究

一.电穿孔介导的RbAp46基因稳定转移的白血病细胞系的建立目的:优化悬浮培养细胞的转染条件,建立RbAp46基因稳定转染的白血病细胞系。方法:比较了两种电击缓冲液的转染效率,在低电压、高电容的条件下,应用电穿孔法将RbAp46转染白血病细胞系U937和K562,经G418筛选以获得单克隆,用PCR检测RbAp46整合,Western blot分析蛋白质表达水平,挑出表达外源RbAp46蛋白水平最高的克隆。结果:电击时间常数τ为10~40ms时,均获稳定转染的克隆。结论:通过优化转染条件,电穿孔法可将RbAp46基因成功转染悬浮培养的白血病细胞系,为研究RbAp46基因对白血病细胞的生物学行为奠定基础。二.过表达的RbAp46基因在白血病细胞系U937的功能研究目的:研究过表达的RbAp46基因对白血病细胞系U937生物学特性的影响。方法:用台盼兰拒染法判定细胞活力,细胞计数判定细胞生长速率。将处在对数生长期U937/RbAp4...  (本文共49页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中华血液学杂志》2005年07期
中华血液学杂志

利用SYBR GreenⅠ实时定量RT-PCR方法检测白血病患者RbAp46基因的表达

Wilms’tumor基因(WT1)在急性髓系白血病(AML)及慢性粒细胞白血病(CML)急变中高表达被看作“泛白血病”标志[1]。研究表明WT1基因的部分功能是通过RbAp46(retinoblastoma associatedprotein46)基因实现的[2],RbAp46基因除与Rb蛋白相互作用外还存在于多个酶体复合物中。体外研究发现RbAp46基因作为抑癌基因参与乳腺癌的早期发生[3]。但尚未见体内检测RbAp46基因表达水平的报道。我们利用实时定量RT PCR技术检测急、慢性白血病和非白血病患者骨髓细胞中RbAp46基因的表达水平,并与常见的一些预后因素进行相关分析。对象和方法1研究对象192例均为苏州大学附属第一医院及第三医院血液科2002年3月至2004年9月门诊或住院治疗的患者,男104例,女88例,中位年龄38.5(6~72)岁。急性白血病(AL)140例[初诊组98例,复发组5例,部分缓解(PR)组8例,完...  (本文共4页) 阅读全文>>

《国外医学(生理、病理科学与临床分册)》2004年04期
国外医学(生理、病理科学与临床分册)

视网膜母细胞瘤相关蛋白46(RbAp46)的研究进展

1991年Huang等在对Hela细胞 (人宫颈癌传代细胞 )裂解物的研究中发现一种相对分子量为 4 6kD的蛋白质 ,因其在体内体外均可与视网膜母细胞瘤易感基因 (Rb)相结合 ,因而命名为视网膜母细胞瘤相关蛋白 4 6 (Retinoblastoma associated protein 4 6 ,RbAp4 6 ) [1] 。RbAp4 6是一种核蛋白 ,它具有负性调节细胞生长 ,抑制肿瘤细胞增殖与发展等作用 ,现将近年来有关RbAp4 6的研究进展综述如下。1 RbAp4 6的组织分布与结构特点目前发现 ,鼠的所有组织均存在RbAp4 6 ,其中睾丸、子宫及卵巢组织的含量较高。人与鼠RbAp4 6的氨基酸顺序只差一个氨基酸 ,推测RbAp4 6可能与其他核蛋白一样广泛存在于人体组织中。RbAp4 6分子中存在 4个WD重复序列是RbAp4 6结构上的一个重要特点。目前发现 ,至少有2 7种蛋白质具有WD重复序列 ,它们构...  (本文共3页) 阅读全文>>

《苏州大学学报(医学版)》2003年03期
苏州大学学报(医学版)

RbAp46基因修饰K562白血病细胞系的实验研究

WT1基因 (Wilms′tumorgene)作为肾母细胞瘤中的抑癌基因 ,在 1990年首次被定位克隆 ,因选择性剪接可编码 4种具有不同DNA结合特异性的转录因子 ;其蛋白质产物作为一种转录因子参与调控泌尿生殖及造血等系统的发育过程 ,其中WT1在泌尿生殖系统的作用研究较为充分 ,而在造血系统特别是白血病发生过程中的作用目前仍存在争议。RbAp4 6 (Rb -associatedprotein 4 6 )作为WT1激活转录的下游靶基因之一 ,可以部分介导WT1的功能[1] 。因此 ,我们通过研究RbAp4 6对白血病细胞的作用 ,从一个侧面来阐明WT1在白血病发病中的作用[2 ] 。RbAp4 6在白血病中的作用目前尚未见文献报道。本研究通过体外基因修饰的方式 ,来探讨RbAp4 6对K5 6 2生物学活性的影响。1 材料与方法1.1 试剂及药物 RPMI 16 40、G4 18和谷氨酰胺为Gibco/BRL公司产品 ;限...  (本文共3页) 阅读全文>>