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LPS调控牙龈成纤维细胞表达uPA的信号转导机理的研究

在炎症、组织损伤与修复,及肿瘤转移等多种生理、病理过程中,蛋白酶对细胞外基质的降解都起着非常重要的作用。尿激酶型纤溶酶原激活剂(Urokinase-Type Plasminogen Activator,uPA)是—种非常重要的丝氨酸蛋白酶。uPA不仅本身是一种蛋白酶,更重要的是,uPA能够激活一系列蛋白酶,降解细胞外基质。包括成纤维细胞在内的多种细胞能够合成、分泌uPA。未活化的uPA是一种单链蛋白质(scuPA)。scuPA从细胞分泌出来后,经与细胞膜表面的uPA受体(uPAR)结合并被活化,形成双链蛋白质。活化的uPA进而激活纤溶酶原(plasminogen),使之活化为纤溶酶(plasmin)。纤溶酶是一种胰蛋白酶类的蛋白酶,它不仅能够降解纤维蛋白等多种细胞外基质,而且能够激活金属蛋白酶等多种其它蛋白酶类。由此可见,uPA在启动和促进整个细胞外基质的降解过程中起着非常关键的作用。牙周病主要为炎症类疾病,是牙周厌氧菌感染引起  (本文共68页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川大学
四川大学

人牙龈成纤维细胞、大鼠成骨细胞、种植龈沟液MMP-9的研究

种植体经外科手术植入颌骨后,种植体的组织界面结合类型往往是混合型的,种植体的部分表面与骨组织直接接触,而另一部分则与纤维组织接触,因而种植体周围的细胞主要是成骨细胞及成纤维细胞。本研究以炎性细胞因子IL-1β刺激体外培养的人牙龈成纤维细胞及大鼠成骨细胞,通过对两种细胞的MMP-9蛋白及mRNA表达水平的研究,初步探讨成纤维细胞及成骨细胞及其分泌的MMP-9在种植体周围炎与牙周炎中的作用与机制。本实验还通过比较临床采集的种植体周围炎龈沟液与牙周炎龈沟液的MMP-9水平,探讨种植体周围细胞外基质的降解过程是否具有与天然牙相似的特征,从而进一步推断和证实MMP-9在种植体周围炎中的作用,为种植体周围炎的临床诊断与治疗提供理论依据。人牙龈成纤维细胞是采用组织块法进行培养的,取培养第三代细胞进行鉴定。鉴定内容包括:细胞形态的观察,细胞波形蛋白及角蛋白的免疫组织化学鉴定。大鼠成骨细胞是采用连续酶消化法对大鼠头盖骨的成骨细胞进行分离,反复贴壁...  (本文共123页) 本文目录 | 阅读全文>>

第四军医大学
第四军医大学

人牙周膜成纤维细胞与牙龈成纤维细胞差异表达基因的克隆与分析

牙周病和尖周病是常见的口腔疾病,是病理性失牙的最主要原因,牙周健康被世界卫生组织(WHO)列为衡量人类健康的十大标准之一。牙周膜成纤维细胞是牙周和根尖周组织中最重要的细胞成分,是牙周和根尖周组织修复和再生的基础。牙周膜成纤维细胞在牙根表面的再附着是牙周治疗成功的关键。牙龈成纤维细胞是邻近的牙龈组织中的主要细胞成分,与牙周膜成纤维细胞在很多方面非常相似,但细胞的功能不同。并且该细胞容易向根面移行,与根面接触后引起牙周袋的纵向深入和牙根吸收,成为牙周治疗最大的障碍。本研究采用改良的基于PCR和消减杂交技术而建立起来的克隆差异表达基因技术,研究体外培养的人牙周膜成纤维细胞相对于人牙龈成纤维细胞差异表达的基因,尤其是新基因,以期从分子水平认识牙周膜成纤维细胞的基因表达特征,为深入了解牙周组织再生的分子机理奠定基础,同时新基因的克隆也为我国在该领域的研究提供更高的起点,跃居世界前沿水平。利用该方法,我们构建了人牙周膜成纤维细胞与牙龈成纤维...  (本文共85页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军军医进修学院
中国人民解放军军医进修学院

人牙龈成纤维细胞对口腔常用抗生素的跨膜转运

多项研究表明,牙周致病菌可侵入牙龈上皮细胞和成纤维细胞内,并逃避宿主的防御机制,这种细胞内感染成为牙周病发生、发展、复发的关键因素。多种抗生素在龈沟液、牙龈组织中的浓度要显著高于血药浓度,其机理可能是牙周组织细胞可以转运药物至细胞内。人工种植体给药系统以及牙根管给药系统的理论基础之一是牙周组织细胞具有转运药物的能力。为了探讨牙周局部给药及两种给药系统设计的可行性,本课题研究人牙龈成纤维细胞对7种口腔常用抗生素的跨膜转运。全文分两大部分。第一部分实验人牙龈成纤维细胞原代培养方法的比较研究目的:建立和评价人牙龈成纤维细胞原代培养方法,并观察其生物学特性。材料与方法:分别用组织块法、两种改良酶消组织块法培养人牙龈成纤维细胞(HGF),用形态学、免疫荧光法鉴定细胞来源。通过活细胞观察,MTT比色实验研究细胞体外生长特性。比较三种培养方法培养HGF的效果。结果:获得的细胞呈梭形,抗波形丝蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性,符合人牙龈成纤维细胞...  (本文共94页) 本文目录 | 阅读全文>>

《口腔生物医学》2010年02期
口腔生物医学

淫羊藿苷对体外培养的人牙龈成纤维细胞的作用研究

人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGF)是人牙周组织的主体细胞之一,在牙周组织的保护、修复中起着重要作用[1]。补肾健骨中药淫羊藿的提取物淫羊藿苷被证实具有促进成骨细胞增殖和蛋白合成的作用[2],而对HGF的影响少见报道。本实验应用MTT法研究淫羊藿苷对HGF的作用,旨在为选取中药进行促进牙周组织再生的实验提供一定的依据。1材料与方法1.1试剂和仪器淫羊藿苷(中国药品生物制品检定所,分子结构式见图1),新生胎牛血清(四季青公司,杭州);DMEM培养基(四季青公司,杭州);胰蛋白酶(Gibco,美国);MTT(Sigma,美国);DG-1型酶联免疫检测仪(华东电子管厂);YJ-874超净工作台(苏州净化设备厂);CO2孵箱(贺利氏,德国);DMSO(郑州化学试剂三厂);倒置显微镜(Olympus,日本)。图1淫羊藿苷的分子结构式Fig1Molecular structure of icari...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国组织工程研究与临床康复》2009年28期
中国组织工程研究与临床康复

碱性成纤维细胞生长因子基因转染对犬牙龈成纤维细胞的影响

0引言牙龈成纤维细胞是牙龈组织的主要细胞成分,在牙龈组织再生中发挥重要作用[1]。在牙周组织修复中采用牙龈成纤维细胞与脱细胞真皮组织结合,可有效促进异体移植瓣的血管化,改善其治疗效果[2]。碱性成纤维细胞生长因子是人体内发现的最为有效的血管形成因子之一,能促使毛细血管向组织缺损处以及移植物中长入,为工程化组织移植物提供足够的营养并及时转运代谢产物,提高组织的修复质量。同时,碱性成纤维细胞生长因子是一种对源于中胚层和神经外胚层的细胞具有促有丝分裂作用的多肽生长因子,能有效地刺激成纤维细胞的分裂和增殖,对修复组织有明显的促进作用。碱性成纤维细胞生长因子可通过其趋化作用和促细胞迁移作用导致巨噬细胞、间充质细胞、内皮细胞、成纤维细胞等向创伤部位聚集,启动创伤愈合过程;促进几乎所有参与创伤愈合的细胞增殖;促进新生血管形成,促进细胞释放胶原酶、血纤溶酶激活物等。另外,早在20世纪80年代,就有学者对碱性成纤维细胞生长因子的成骨作用进行了研究...  (本文共5页) 阅读全文>>