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端粒酶逆转录酶基因hTERT在膀胱癌组织中的表达及端粒酶反义基因治疗逆转T24膀胱癌细胞恶性表型的研究

端粒酶(telomerase)是核糖核酸和蛋白质的复合体,是一种专一的逆转录酶,主要功能是以自身RNA为模板,从头合成端粒,维持染色体末端稳定。最近研究表明,端粒酶在绝大多数肿瘤细胞中表达活性,而在正常人体细胞中几乎无端粒酶活性表达。因此,端粒酶的激活可能在肿瘤发生、发展及恶性转化中起重要作用。有研究报道端粒酶活性在膀胱肿瘤中高表达,使端粒酶有可能成为膀胱肿瘤病变诊断指标和治疗的理想靶点。膀胱肿瘤是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,其发病机制和诊治方面的研究一直是泌尿系统肿瘤学的重点和难点。人们一直在探索膀胱肿瘤早期诊断和治疗的新方法,随着分子生物学理论和技术的发展,肿瘤的基因诊断和治疗越来越变为现实。端粒酶的发现和深入研究有可能使其成为肿瘤基因治疗的新靶点。本研究探讨了端粒酶逆转录酶基因hTERT在膀胱癌组织中的表达及端粒酶反义核酸和反义RNA转染对T24膀胱癌细胞恶性表型的影响。主要研究内容如下:第四军医大学博士学位论文1、应用兔抗  (本文共83页) 本文目录 | 阅读全文>>

《四川生理科学杂志》2008年02期
四川生理科学杂志

肺炎克雷伯杆菌在T24细胞内存活的动态观察

微生物的致病机制十分复杂,涉及到微生物与机体双方的相互作用,在感染性疾病的发病中,机体的免疫和炎症反应是重要环节。近年的研究表明,粘膜上皮细胞不仅仅是一道单纯的机械屏障,在细胞和分子水平,上皮细胞有复杂的免疫防御及炎症反应机制,涉及一系列复杂的炎症信号转导和基因表达及调控机制,粘膜上皮细胞能合成和分泌具有强大杀菌作用的抗菌肽,杀死病原微生物;也能产生调节免疫和炎症反应的细胞因子、趋化细胞因子,是炎症过程中功能活跃的主动参与者。肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae,KP)是一种条件致病菌,往往在机体免疫力低下时引起感染性疾病。在泌尿道感染中,它是除大肠杆菌外最常见的致病菌。有研究显示毒力弱的克雷伯杆菌容易粘附并进入到呼吸道上皮细胞上,从而易于被上皮细胞清除,而毒力强的克雷伯杆菌粘附力差,不易进入上皮细胞,但是造成持续的感染[1]。肺炎克雷伯杆菌在泌尿道上皮细胞内生存的动态变化怎样,上皮细胞是否可以清除胞内细菌...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国血吸虫病防治杂志》2006年04期
中国血吸虫病防治杂志

猪囊尾蚴跨膜蛋白T24基因的克隆及序列分析

猪囊尾蚴不仅可以在人体皮下及肌肉内寄生而且可侵犯心肌、肝脏、玻璃体、眼底和脑等多个器官,特别是脑囊尾蚴病,占人体囊尾蚴病的80%以上,其致残率、致死率极高,轻者头痛、头晕、恶心呕吐,重者神经系统受到损害,频繁发作癫痫,并且颅内压增高,造成严重后遗症,如失明、痴呆,甚至危及生命[1]。猪囊尾蚴病尤其是深部组织的猪囊尾蚴病的病原学诊断较为困难,而免疫学诊断对于无明显临床体征或深部组织的猪囊尾蚴病患者具有更重要的参考意义[2]。本研究旨在寻找猪囊尾蚴病新的免疫学诊断分子。材料与方法1质粒和菌株猪囊尾蚴cDNA文库、E.coli XL1-blue均由安徽医科大学寄生虫学教研室提供。PMD-18T克隆载体购自大连宝生物公司。2主要实验试剂Taq DNA聚合酶、dNTP、T4DNA连接酶、IPTG、X-gal、氨苄青霉素、BamH、Xho均为华美公司产品;DL2000Marker为大连宝生物公司产品;DNA胶回收试剂盒为V-gene公司产品...  (本文共4页) 阅读全文>>

河北医科大学
河北医科大学

甘草甜素对人膀胱癌细胞T24的抑制作用及其机制研究

背景及目的:膀胱癌是泌尿系统常见恶性的肿瘤。膀胱移行细胞癌常采取手术治疗,术后辅以药物化疗。然而,目前的术后化疗药物的疗效不甚理想,保留膀胱的患者,两年内超过半数肿瘤要复发,并且有10%-15%的有恶性程度增加趋势,寻找高效低毒的药物对提高膀胱肿瘤治疗具有积极意义。因此,发现并开发新型抗肿瘤药物仍然是医学界所必须面对的十分艰巨而长期的使命与挑战。中医药在治疗、康复、养生等方面具有独特的优势,但在防治膀胱肿瘤的研究尚不多见。近年来研究发现,甘草甜素(glycynhizin, GL)是从甘草中分离出来的三萜类成分,具有较为广泛的抗瘤活性,能抑制乳腺癌、肝癌及前列腺癌等细胞生长。还未见有对膀胱肿瘤抑制作用的报道。本研究观察了甘草甜素对膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的作用并对其作用机制进行了探究。为甘草甜素作为抗肿瘤药物临床应用提供实验依据。方法:1体外培养膀胱癌T24细胞,观察甘草甜素处理后的量效、时效关系。使用甘草甜素不同浓度(6.25...  (本文共43页) 本文目录 | 阅读全文>>

《现代泌尿外科杂志》2012年02期
现代泌尿外科杂志

比较雷帕霉素和吡柔比星抑制膀胱癌T24细胞生长活性的实验研究

膀胱肿瘤是我国最常见的泌尿系肿瘤,其中90%以上为恶性,80%以上的原发性膀胱肿瘤为局限于黏膜层和固有层的浅表性癌,对浅表性膀胱癌患者经手术治疗后,50%~70%的患者于1~2年内复发,其中30%~40%的复发病例伴有恶性程度增加或浸润能力增强[1]。因此如何治疗膀胱肿瘤,防止膀胱肿瘤复发是一个值得研究的课题。故针对雷帕霉素(rapamycin,RPM)和吡柔比星(pirarubicin,THP)抑制膀胱癌T24细胞生长活性的作用进行比较,探究雷帕霉素在膀胱肿瘤患者中的应用前景。http://www.zgmnwk.com1材料与方法1.1试剂和细胞株采用中科院上海生命科学院细胞库T24人膀胱癌细胞,生长迅速且稳定,改良型RPMI-1640培养基培养(HyClone公司产品)(含10%胎牛血清,1%青霉素和链霉素),0.25%胰酶消化,1∶2传代。实验时取对数期生长细胞,RPM(美国Wyeth公司产品),THP(深圳万乐药业)。采...  (本文共5页) 阅读全文>>

《南京医科大学学报(自然科学版)》2012年05期
南京医科大学学报(自然科学版)

姜黄素引入酯键增韧基团对膀胱癌T24细胞靶向作用的体外研究

膀胱癌是泌尿外科常见的恶性肿瘤之一。姜黄素是植物姜黄的主要有效成分,是多酚类化合物,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物学功能[1],大量的体外研究证实,姜黄素可抑制多种肿瘤细胞的增殖,能诱导包括白血病、淋巴瘤、肺癌、前列腺癌、胃癌、卵巢癌、乳腺癌和直肠癌等在内的多种人类肿瘤细胞株发生凋亡[2],包括膀胱来源的肿瘤细胞系[3]。美国国立癌症研究所(NCI)已将姜黄素列为第三代癌症化学预防药,于2000年列入美国药典。但是高浓度姜黄素存在一定的细胞毒作用[4]。如何提高姜黄素抗癌作用的靶向性,减少其不良反应成为众多学者关注的研究方向。本研究利用姜黄素具有抗肿瘤功效,在姜黄素母体基础上链接叔丁氧羰基-苯丙氨酸基团合成姜黄素单酯(boc-phenylala-nine-curcumin,BPC),试图增强其对膀胱癌T24细胞的靶向性作用,报告如下。1材料与方法1.1材料T24细胞株和人主动脉平滑肌细胞(people aor-tic smo...  (本文共5页) 阅读全文>>