分享到:

肾上腺髓质素调节视网膜色素上皮细胞及细胞内信号传导通路的研究

背景 肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)是一种最早从人类嗜铬细胞瘤提取液中发现的血管舒张肽。随后的研究发现ADM不仅仅是一种舒张剂,而且是一种多功能调节肽,具有广泛的生物学效应,包括调节细胞的生长、分化,调节激素的分泌,抗凋亡、抗移行等多种功能。但是上述大多数作用都表现出依赖细胞类型特异性。如在3T3细胞,ADM可以剂量依赖性地提高DNA的合成,这种作用通过ADM特异的受体激活cAMP/PKA通路。在培养的人正常胶质细胞和胶质细胞瘤,ADM升高细胞内cAMP并抑制细胞生长。人和鼠的星形细胞瘤、人的神经胶质瘤和培养的神经胶质瘤源细胞系的生长可以被ADM抑制。但是,Moody等报道ADM促进培养的C6、细胞胶质细胞增殖,其作用与升高cAMP和上调c-fos表达有关。了解ADM作用机制的最基本的问题是要了解一个在膜表面的刺激是怎样被传递到细胞核引起一系列的基因表达,最终使细胞对外环境的变化产生适当的生理反应。已有一  (本文共103页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国现代医学杂志》2014年13期
中国现代医学杂志

脂多糖对体外培养成骨细胞凋亡影响的初步实验研究

影响骨坏死及骨重建的原因很多,而炎症反应在骨坏死及重建过程中起重要作用[1-2]。内毒素(Endotoxin,Et)是革兰氏阴性细菌生长或死亡裂解时释放的细胞壁脂多糖(LPS)成分,可诱发一系列的炎症反应。Et在机体感染过程中起重要作用,进入机体后可以导致一系列病理反应,严重时可以导致弥散性血管内凝血及多器官衰竭,而弥散性血管内凝血是造成骨坏死的一种重要机制[3]。凋亡是细胞的程序性死亡,病理研究表明股骨头坏死时出现明显的凋亡细胞[4]。内毒素对骨骼系统的损害作用已得到广泛认同[5-6],但其具体机制尚不清楚。本实验通过检测LPS干预对体外培养成骨细胞凋亡的影响,以期探讨内毒素引起成骨细胞功能改变的发生机制。1材料与方法1.1主要材料与仪器出生24 h内SD大鼠10只,购自辽宁医学院动物培养中心。胎牛血清、DMEM/F12培养基、胰蛋白酶(Heclone),I型胶原酶、MTT(Sigma公司),大肠杆菌标准内毒素(Sigma L...  (本文共5页) 阅读全文>>

中国科学院研究生院(大连化学物理研究所)
中国科学院研究生院(大连化学物理研究所)

繁茂膜海绵原细胞的鉴别、分离纯化和体外培养研究

海绵是一种重要的海洋药用无脊椎动物。海绵细胞体外培养是解决海绵药物供给不足问题最具希望和富有挑战性的课题。本研究旨在发展一种海绵干细胞体外培养方法,探索利用海绵干细胞体外培养建立海绵细胞系的可能性。论文以大连海域繁茂膜海绵的干细胞——原细胞为对象,研究了原细胞的鉴别、分离纯化及体外培养(增殖和分化)等问题。首先,考察了繁茂膜海绵主要类型细胞在光、电镜下的形态结构特征。形成了在光镜下鉴别、计数原细胞的方法和标准。并应用BrdU摄取法和PCNA检测法,进一步证明了原细胞作为海绵干细胞所具有的增殖分裂潜力。第二,建立了一种分离、纯化原细胞的新方法。利用原细胞与其它类型细胞的差异,形成了差速离心、选择性聚集、差速粘附和密度梯度离心四步集成分离方法。有效地实现了原细胞的富集,富集浓度达到了80%以上。第三,比较了原细胞含量不同细胞体系的体外培养增殖特征。初步发现,原细胞具有活跃的增殖能力;高富集度原细胞体外原代培养过程中所显示的增殖和生物...  (本文共172页) 本文目录 | 阅读全文>>

《解剖学报》1970年40期
解剖学报

体外培养人脐静脉内皮细胞表达一氧化氮合酶

体外培养人脐静脉内皮细胞表达一氧化氮合酶*姚忠祥蔡文琴邓晓林李红丽赵士福(第三军医大学组织学胚胎学教研室,重庆400038)摘要为了证实人脐静脉内皮细胞是否具有合成一氧化氮的能力,用NADPH-黄递酶组织化学法和原位杂交技术,对体外培养的人脐静脉内皮细胞表达一氧化氮合酶进行了观察。结果显示,体外培养人脐静脉内皮细胞的NADPH-黄递酶组织化学的阳性百分率为62%,诱生型一氧化氮合酶的原位杂交的阳性百分率为74%。阳性反应产物分布在核周及细胞突起中。本研究首次证明体外培养的人脐静脉内皮细胞能表达诱生型一氧化氮合酶,即人脐静脉内皮细胞在体外培养或受刺激情况下,具有合成一氧化氮的能力。这可能是无神经支配的人脐静脉的一种重要调节因素。关键词一氧化氮合酶NADPH-黄递酶组织化学原位杂交人脐静脉内皮细胞*国家自然科学基金资助课题(No.39670382)人体多数血管的张力受神经和内皮细胞的共同调节。血管壁内的神经末梢通过释放神经递质调节血...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》2017年04期
中国寄生虫学与寄生虫病杂志

约氏疟原虫红内期体外培养的研究

自Trager等[1]在1976年建立了恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)的红内期体外培养技术后,人们利用这一技术又成功实现了巾帽猴疟原虫(P.fragile)、食蟹猴疟原虫(P.cynomolgi)和豚尾猴疟原虫(P.inui)红内期的体外培养。体外培养的成功对疟原虫药物筛选[2]、疟原虫抗药性检测[3-5]、人类免疫机制研究[6]、抗药基因特征研究[7-10]等均产生了积极影响。至今,有关疟疾的大量研究仍需要人工培养的疟原虫提供研究材料。但间日疟原虫(P.vivax)、伯氏疟原虫(P.berghei)、夏氏疟原虫(P.chabaudi)、约氏疟原虫(P.yoelii)等重要疟原虫的体外连续培养至今没有成功。虽然也有约氏疟原虫红内期体外培养的研究报道,但体外培养的结果不甚理想,约氏疟原虫红内期在体外20℃时比37℃时培养的时间长,前者能维持至120 h,而后者仅能维持72 h[11]。本研究通过改良培养条件...  (本文共3页) 阅读全文>>

《北京农学院学报》2009年02期
北京农学院学报

蜂胶对体外培养的血管内皮细胞增殖活力的影响

蜂胶含有几十种活性成分,其中酚羟基化合物占的比例较大,蜂胶的酚类化合物具有很强的抗氧化作用,可以淬灭超氧阴离子自由基和羟基自由基[1]。资料表明,血管内皮细胞(VEC)的损伤可诱发一系列心血管疾病[2]。当机体体内自由基含量增高时,VEC就会受到明显损害[3]。本试验利用体外培养方法,用H2O2诱导血管内皮细胞损伤,研究蜂胶对体外培养的血管内皮细胞增殖活力的影响,探讨蜂胶对损伤血管内皮细胞的保护作用。1材料与方法1·1主要试剂蜂胶:黄酮含量40mg/mL,湖北随州鸿发蜂产品有限公司提供。刀豆蛋白(ConA)、MTT,BudR均为Sigma产品;抗体:鼠抗BudR单抗,鼠抗人ICAM-1单抗为Santa cruz产品;DMEM:为GIB-COBRL产品。1·2试验方法1·2·1细胞培养VEC加入含10%NCS的DMEM培养液,置于37℃,5%CO2的饱和水气CO2细胞培养箱中培养,待单层融合后,以含2·5 g/L胰蛋白酶和0·2 ...  (本文共3页) 阅读全文>>