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食管癌细胞凋亡中线粒体跨膜电位和Caspase-3的作用及食管癌组织中线粒体跨膜电位特性的研究

细胞凋亡是人体内重要的生命现象之一,细胞的凋亡不足或凋亡过度关系着一系列重大的急待解决的疾病,如肿瘤和神经退行性疾病等。有关凋亡与肿瘤发生发展关系的研究,以往多集中于凋亡细胞的形态学、生化指标的改变以及基因调控凋亡等方面。近年来的研究发现,线粒体不仅是动物细胞内的主要产能中心,也是在细胞凋亡中起关键作用的调控核心。有关线粒体在食管癌细胞凋亡中所起核心作用的系统研究,国内外尚未见报道。为探讨食管癌细胞凋亡过程中线粒体所起的具体作用,本课题采用流式细胞检测、分子生物学和激光共聚焦扫描技术等手段,研究了食管癌细胞凋亡中,线粒体所起关键作用的环节—线粒体通透性转变孔(Mitochondrion Permeability Transition Pore,MPTP)、线粒体跨膜电位ΔΨm和线粒体释放反应中的Caspase-3(Cysteine protease-3);同时研究了食管癌手术切除标本中癌灶、癌旁和切端三处组织的细胞线粒体跨膜电位  (本文共140页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国肿瘤临床》2001年01期
中国肿瘤临床

细胞凋亡及相关基因bax和bcl-2蛋白在食管癌中的表达和临床意义

近年来关于细胞凋亡和凋亡相关基因在食管癌发生发展中的作用引起了国内外学者的广泛关注和研究,bax 和bcl-2是一对作用相反的凋亡促进和抑制基因,它们之间的平衡对细胞凋亡的调节起重要作用。我们应用DNA末端标记和免疫组化方法检测70例食管癌组织细胞凋亡状态及凋亡相关基因bax和bcl-2蛋白的表达,并探讨其在食管癌发生发展中的作用。1 材料与方法1.1 标本来源 采用1988年至1996年我院食管癌根治术后食管鳞癌石蜡包埋组织70例。按WHO病理分级:G1 20例G2 36例G3 14例。UICC临床分期T1 4例T2 28例T3~T4 38例。淋巴结转移阳性33例,阴性37例。其中男性49例,女性21例。年龄33~78岁,平均56.5岁。随访资料齐备,时间2~10年。正常食管粘膜10例为对照组。1.2 原位DNA末端标记 参照Gavrieli等的方法进行TUNEL,采用Oncogene公司的原位凋亡检测试剂盒。细胞...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国临床药理学杂志》2007年03期
中国临床药理学杂志

羧基-D-氨基葡萄糖衍生物对人食管癌Eca-109细胞线粒体膜电位的影响

COPADG{2-[(3-carboxy-1-oxoprogy1)amino]-2-deoxy-D-glucose},是一种含羧基侧链的D-氨基葡萄糖衍生物,前期研究[1-4]已证明,COPADG可抑制HepG2肝癌细胞及Eca-109食管癌细胞生长并诱导其凋亡。本研究用0,20,30,40μmol·L-14个浓度COPADG分别作用于Eca-109细胞24h后,检测Eca-109细胞活性、细胞凋亡率和细胞线粒体跨膜电位的变化,分析COPADG诱导食管癌细胞Eca-109凋亡机制。材料与方法1材料药品COPADG,由中国科学院兰州物理化学研究所合成并惠赠。细胞人食管癌Eca-109细胞,购于中国科学院上海细胞研究所。试剂AnnexinV-FITC/PI双标记试剂盒,购于BD pharmingen,SanDiego,CA;双氢罗丹明123(DHR123),购自美国Sigma公司;罗丹明123,苏州联科公司生产。仪器Coulter ...  (本文共2页) 阅读全文>>

《现代肿瘤医学》2008年06期
现代肿瘤医学

冬凌草甲素诱导人食管癌SHEE细胞凋亡及其线粒体改变

冬凌草甲素(oridonin,ORI)是从中草药冬凌草中分离提取的一种四环二萜类化合物,是冬凌草发挥抗肿瘤作用的主要成分[1-2]。相关研究报道ORI可诱导前列腺癌细胞、乳腺癌细胞、非小细胞性肺癌细胞、多形性恶性胶质瘤细胞、肝癌细胞、子宫颈癌细胞、恶性黑素瘤细胞、恶性淋巴瘤细胞等多种人肿瘤细胞株凋亡[3-7]。本文报道ORI诱导人食管癌SHEE细胞株凋亡效应及其可能机制。1材料与方法1.1药物、细胞系与实验试剂ORI由北京桑浩博科技有限公司提供(纯度99%);人食管癌SHEE细胞株由汕头大学医学院肿瘤病理研究室提供;199培养基购自Sigma公司;MTT试剂和二甲基亚砜(DMSO)购自Amresco公司;PI购自Sigma公司;TUNEL试剂盒购自Promega公司;其它化学试剂均为国产分析纯。1.2细胞培养与药物配制SHEE细胞接种于培养瓶,在37℃、5%CO2培养箱中用加10%小牛血清的199培养基培养。细胞贴壁生长,3天换...  (本文共4页) 阅读全文>>

《免疫学杂志》2003年03期
免疫学杂志

一种基于流式细胞仪分选后的细胞原位分子杂交

原位分子杂交是从组织细胞原位显示特定核酸序列存在的技术 ,它对一些异质性的细胞群体如血液 ,脑组织等 ,常不能准确阐明特定核酸序列表达于何种类型的细胞 ,或在某一细胞群体是否有特定基因的表达。在对中枢神经系统 (CNS)胶质细胞的研究中 ,参考相关报道[1 ,2 ] ,我们将流式细胞仪技术与原位分子杂交结合 ,对经分选的小胶质细胞进行细胞原位分子杂交分析 ,取得了满意结果。1 材料与方法1 .1 主要试剂及材料 小胶质细胞标记物同工凝集素GSA IB4 (FITC标记 )、2 0×SSC购自Sigma公司 ,诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)与肿瘤坏死因子 (TNF α)的寡核苷探针由上海生工合成 ,原位杂交所需试剂按本室常规制备。1 .2 流式细胞仪筛选小胶质细胞群体并制备细胞涂片 新生Wistar大鼠 2只 ,取大脑皮层 ,去除脑膜与血管后剪碎组织 ,胰酶消化后吸管吹打至组织彻底分散 ,筛网过滤 ,离心收集细胞 ;4 0g/L...  (本文共1页) 阅读全文>>

《中国中药杂志》2007年04期
中国中药杂志

叶黄素对食管癌细胞凋亡的影响及其作用机制研究

叶黄素(lutein)又名植物黄体素,存在于蔬菜、花卉、水果、玉米、蛋黄与某些藻类中,万寿菊中含量尤为丰富。流行病学研究表明:叶黄素在预防视黄斑退化、肿瘤的发生与发展、心血管疾病和增强机体免疫力等方面有着广泛的生物学活性[1,2]。本课题组前一阶段的研究证明,叶黄素在体外能明显抑制人食管癌细胞EC9706的增殖和诱导分化,但是关于叶黄素对食管癌细胞凋亡的影响及其作用机制尚不清楚。从细胞生物学角度来看,增殖与凋亡有着密切的关系。肿瘤细胞与其他活细胞一样,具有增殖、分化、细胞周期阻滞和凋亡的潜能,其每一阶段都具有特异性的代谢表型。凋亡是由多基因控制的一种主动性细胞自杀过程[3],与肿瘤的发生、发展与转归等病理生理过程有密切关系。因此,本研究拟在前期工作的基础上,检测叶黄素对EC9706细胞凋亡,以及对细胞凋亡调节蛋白Bax和Bcl-2表达的影响,探讨其对食管癌EC9706细胞诱导凋亡的效应及其机制。1材料1.1试剂与仪器RPM I ...  (本文共4页) 阅读全文>>