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表达新城疫病毒F基因和传染性喉气管炎病毒gB基因重组禽痘病毒的构建及其免疫效力的研究

传染性喉气管炎和新城疫是鸡的主要呼吸道疾病,给养鸡业造成了巨大的损失,是现代养鸡业必须防疫的疾病。尽管传统方法制备的疫苗在疾病的控制上曾经发挥重要的作用,但随着人们对疾病清除计划呼声的日渐高涨,特别是食品安全性意识的提高,呼唤着新型疫苗来替代常规疫苗。在这方面,禽痘病毒载体疫苗以其特有的优势和竞争力吸引了各国科学家的注意,构建了许多表达禽类病原体主要免疫原基因的重组禽痘病毒,而且已有部分产品投入使用。构建表达多个病原体基因的重组禽痘载体疫苗对于面临多种疾病威胁的养禽业来说尤其具有重要的意义。本试验将新城疫病毒F48E9株F基因置于LP_2EP_2启动子控制之下,构建禽痘病毒转移载体,之后与以前构建的表达ILTV gB基因的重组禽痘病毒(rFPV-ILTVgB)共转染鸡胚成纤维细胞,采用蚀斑表型反向筛选的方法(即从兰色的背景反向筛选白色蚀斑),筛选并纯化得到表达F基因的重组禽痘病毒(rFPV-NDV F),间接免疫荧光试验证明ND  (本文共76页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物工程学报》2004年06期
生物工程学报

传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因在重组禽痘病毒中共表达

随着集约化养禽业的发展 ,鸡呼吸系统疾病的预防越来越重要 ,其中传染性喉气管炎 (ILT)和新城疫 (ND)带来的危害严重 ,而且现有的疫苗都有一定的不足 ,导致疫病的防制困难 ,因此更寄希望于新型载体疫苗。禽类病毒的活载体疫苗主要有禽痘病毒、疱疹病毒和腺病毒。禽痘病毒作为活载体疫苗有如下优势 :基因组结构庞大 ,能容纳较大的外源基因而不丧失其感染性 ;表达的外源蛋白能真实的被修饰 ,如糖基化、磷酸化等 ,可诱导机体产生细胞免疫和体液免疫 ;重组禽痘病毒作为疫苗免疫方法简单、生产成本低、安全性好 ;禽痘病毒非常稳定 ,反复冻融并不引起病毒的变异和失活。禽痘病毒表达系统是表达禽类病原基因的理想载体 ,到目前为止 ,已经有多种禽类病原的免疫原基因在禽痘病毒载体上被表达 ,如马立克氏病毒糖蛋白gB基因[1 ] 、鸡传染性法氏囊炎病毒的VP2 基因[2 ] 、禽流感病毒的HA基因[3] 、禽网状内皮细胞增生症病毒的env基因[4 ] 等...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国预防兽医学报》2006年05期
中国预防兽医学报

表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因重组病毒免疫及强毒攻击后外周血T淋巴细胞亚群的动态

禽痘病毒作为载体已经在基因工程疫苗的研制中得到广泛的应用,而且有一些载体疫苗已经商品化,但载体疫苗发挥作用的确切机制还有待于进一步研究。表达新城疫病毒F基因以及传染性喉气管炎病毒gB基因的重组禽痘病毒(rFPV-gB-F)表达两个不同病原体的主要免疫原基因[1],而这两种病原体诱发免疫的机理也不相同,目前普遍认为对于新城疫病毒的免疫是以体液免疫为主,而对于传染性喉气管炎的免疫是以细胞免疫为主。在疫苗免疫或者病毒感染之后,其中T淋巴细胞亚群中CD4+、CD8+以及TCRγδ+细胞在数量上都会产生相应的变化。本研究比较了rFPV-gB-F以及新城疫弱毒疫苗与传染性喉气管炎弱毒疫苗免疫后表面受体CD4+、CD8+以及TCRγδ+细胞数量的变化规律,为进一步研究细胞免疫在免疫保护中的作用作铺垫。1材料和方法1.1病毒ILT减毒疫苗(Intervet000966B,1000doses,ILT)购自英特威公司;攻毒用ILTV强毒是ILTVW...  (本文共4页) 阅读全文>>

东北农业大学
东北农业大学

GPMVF、HN及NP基因的多表达系统与DNA疫苗的研究

1997 年以来,在我国许多地区爆发了由鹅副粘病毒(Goose Paramyxovirus,GPMV)引起的鹅的烈性传染病。该病是以消化道和呼吸道病变为主要特征,具有高度的发病率和死亡率,给养鹅业带来了严重的危害。目前,临床上对GPMV 感染尚无特效的治疗药物,接种疫苗是预防和控制该病发生的主要手段和途径。应用传统的活疫苗如LaSota、C30 等由于其基因型不同(传统的疫苗属于基因Ⅱ型、Ⅲ型,而GPMV 属于基因Ⅶ型),因而造成疫苗只能起到部分的保护作用。目前应用的油乳灭活苗对该病起到了一定的控制作用,但由于灭活苗在灭活过程中造成抗原表位的缺失或抗原性减弱,而不能产生足够的保护水平,以至于需要重复接种,使用很不方便,并且灭活苗免疫不能产生细胞内源性蛋白,因而不能诱导细胞毒性T 细胞(CTL)的产生,而CTL 是真正有效的免疫效应细胞,在抗病毒中起着重要的作用。随着分子免疫学、分子病毒学和分子生物学等相关技术的发展,如何利用基因...  (本文共103页) 本文目录 | 阅读全文>>

《华北农学报》2008年06期
华北农学报

表达鸡白细胞介素18重组禽痘病毒的构建及其表达产物生物学活性的检测

禽痘病毒是目前所知最大的动物病毒,至少可容纳25 kb的外源基因,是构建多价疫苗的理想载体。到目前为止,已经有多种禽类病原的免疫原基因在禽痘病毒载体上被表达,如马立克氏病毒糖蛋白gB基因、鸡传染性法氏囊炎病毒VP2基因和禽流感病毒的HA基因等[1-3],这些重组病毒都可使免疫鸡产生抵抗强毒攻击的免疫力。虽然禽痘病毒疫苗的毒副作用小、安全性高,但仍有一定的残留毒性,表现为对雏鸡的体重增长和免疫应答的抑制作用[4]。所以,为了提高禽痘病毒的安全性,研究者将眼光放在佐剂上,特别是一些细胞因子的研究上[5]。白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)是1995年首次报道的一种新型细胞免疫调节因子[6],具有多种生物学功能,人类医学研究证明,IL-18在抗微生物感染,尤其是在抗肿瘤免疫方面具有重要的潜在应用价值[7,8]。鸡IL-18(Chicken IL-18,ChIL-18)则于2000年首次报道[9],由于它具有与...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国农业科学》2000年05期
中国农业科学

表达禽流感病毒血凝素基因的重组禽痘病毒的构建

禽流感 (AI)是由正粘病毒科 A型流感病毒引起的禽类的传染病 ,高致病力禽流感病毒(highly pathogenic avian influenza virus,HPAIV)的感染可导致鸡群 75%~ 1 0 0 %的死亡率 ,我国《家畜家禽防疫条例实施细则》将 HPAI列为第一类传染病。AIV变异频繁 ,血清亚型众多 ,给 AI的防制带来困难。迄今为止 ,H5和 H7两种亚型的 HPAIV导致 AI暴发流行均给当地养禽业造成毁灭性打击 ,世界各地均严加防范。由于 AIV基因具有高度变异性 ,利用弱毒苗预防 AI有突变为 HPAIV的潜在危险 ,而灭活苗成本高 ,并且会严重影响现有技术条件下的禽流感疫情监测〔3~ 5〕,因此 AI基因工程疫苗的研究势在必行。AIV的血凝素 (hemagglutinin,HA)是主要的保护性抗原 ,H5和 H7亚型的 HA亚单位疫苗及能表达 H5AIV HA基因的重组鸡痘病毒均可对同一亚型的不...  (本文共5页) 阅读全文>>