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双价抗真菌病基因对大豆遗传转化的研究

大豆是重要的粮食和油料作物,但容易受多种真菌病的危害,导致大豆的产量和品质下降。由于传统的抗病途径存在诸多缺点,并不是理想的防治措施,而利用基因工程技术可望为大豆育种及品质改良开辟一条新途径。但大豆抗真菌病基因遗传转化中仍存在单个抗病基因的抑菌谱窄、缺乏合适的再生体系和遗传转化效率低等问题。针对以上问题,本研究选用东北地区4个主栽大豆品种为试材,通过基因工程手段,构建带有菜豆几丁质酶基因(chi)和大麦核糖体失活蛋白基因(rip)的植物表达载体,利用农杆菌介导法和基因枪法,首次将两个抗真菌病基因同时导入大豆。并系统优化植株再生和遗传转化条件,建立了高效的植株再生和遗传转化体系,获得同时整合两个抗真菌病基因的转基因大豆:本研究为大豆以及其它豆科植物抗病分子育种奠定基础,并为有性杂交育种提供基因资源。主要研究结果如下:1.构建了抗真菌病基因植物表达载体a 共构建5个载体,包括1个中间克隆载体pURO1、1个中间表达载体pARIP、  (本文共95页) 本文目录 | 阅读全文>>

《河北农业大学学报》2007年02期
河北农业大学学报

影响大豆遗传转化再生植株成活因素的初步研究

再生植株的移栽成活问题,一直是困扰大多数植物基因工程商品化发展的关键[1],自1988年由Hinchee第1个以农杆菌介导法获得大豆转基因植株以来[2],目前抗除草剂转基因大豆已经商品化[3],但大豆转化的频率仍很低,重复性很差[4],这在一定程度上影响了生物技术在大豆遗传改良等方面的应用。本研究以‘吉林35’、‘中黄28’、‘南农1138-2’经过农杆菌介导遗传转化获得的卡那霉素抗性再生植株为材料,进行生根培养,对影响再生植株移栽成活的因素进行研究,以期提高再生植株的移栽成活率,为大豆的遗传改良提供方法学上的基础。1材料和方法1.1材料‘吉林35’(吉林农科院提供),‘中黄28’(中国农业科学院提供),‘南农1138-2’(南京农业大学提供)3个品各来自不同生态区,在当地生态区的表现为:‘吉林35’生育期125 d,株高78 cm;‘中黄28’生育期132 d,株高90 cm;‘南农1138-2’生育期172 d,株高95 c...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国农学通报》2005年12期
中国农学通报

大豆遗传转化系统的研究进展

大豆是重要的粮食和油料作物,也是人类的主要 食用蛋白和工业原料的来源。大豆生产易受到环境因 素的影响,产量很不稳定,常规育种技术由于受物种 杂交不亲和性及不良基因性状连锁等因素的影响,在 引进其他物种优良基因的同时也带入了许多不需要 的不良基因,因而较难进一步利用。基因工程技术在 这一方面开辟了一条全新的途径。早在1984年,De- Block等11]和Horsch等[2l报道了将外源基因导入大豆 的研究结果‘ 1955年,MeC曲e等[,]和Hinchee等哄l分 别用基因枪轰击大豆未成熟胚生长点和用农杆菌侵 染大豆子叶节的方法获得大豆转基因植株。此后,研 究者们纷纷加入这一领域的竞争并且成果纷呈,利用 基因工程手段创造和培育了多种不同类型的大豆新 品种与种质资源。笔者对大豆的受体系统和转基因方 法的研究进展作一概述,并分析大豆遗传转化的主要 障碍及可能的解决途径。 1大豆遗传转化的受体系统 大豆遗传转化的受体主要有胚轴、未成...  (本文共5页) 阅读全文>>

北京农学院
北京农学院

大豆炸荚基因的克隆分析及遗传转化

炸荚是大豆的一种自然属性,是影响大豆产量的重要因素之一。本研究的目的在于找到大豆中控制大豆荚开裂的基因,并通过转基因技术将该基因转入大豆中黄10中,观察大豆表形变化。试验前期通过对相关文献的查找,分别在拟南芥及桃中发现FUL和PpMADS6两个基因。研究显示,这两个基因均与拟南芥花器官的发育及果荚开裂性状相关,于是通过将该基因与大豆基因组进行比对,从而在大豆中找到与之相似度较高的大豆AGL8基因。我们将GmAGL8基因与过表达载体pCAMBIA1300::EYFP连接并通过农杆菌侵染大豆子叶节的方法,对大豆中黄10进行遗传转化,并对大豆GmAGL8基因进行生物信息学分析。试验结果表明,通过DNAMAN将GmAGL8与FUL和PpMADS6两个基因进行比对,相似度分别为78%和80%。通过PCR扩增的大豆中黄10 GmAGL8基因与NCBI中该基因序列比对,相似度为99.84%。使用农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化法,将GmAGL8...  (本文共52页) 本文目录 | 阅读全文>>

《大豆科技》2016年03期
大豆科技

大豆真菌病害与化学防控

真菌是作物病害的主要病原,大豆真菌病害种见》,《意见》提出到2020年实现三个“力争”,力争类多、分布广、危害大,各种病害从症状上难以区大豆面积达到933.33万hm2,较2015年增加266.67分,并且常常是几种病害同时发生或混合发生,给万hm2;力争大豆平均产量达到135 kg/667m2,较防治带来困难。特别是大豆重迎茬种植,大豆病2015年提高15 kg/667m2;力争食用大豆蛋白质含害的发生尤为严重,造成大豆产量降低,品质变量提高2个百分点,榨油大豆含油率提高1个百分差[1]。根据固定轮作场圃连续8年田间试验以及盆点。所以大豆病害的科学、高效防控意义重大。栽试验和大量生产调查的结果表明,大豆重迎茬种1引起大豆病害的真菌植减产6.2%~31.5%[2]。生产上往往由于不了解病原1.1侵染大豆植株地下器官的真菌类型和杀菌剂性质,盲目用药,防治效果很低,既侵染大豆地下器官的真菌主要有立枯丝核菌造成大豆种植效益降低,也造成...  (本文共5页) 阅读全文>>

《生物技术》2007年06期
生物技术

大豆转基因的研究进展

大豆(Glycine maxL.)是属于豆科、蝶形花亚科植物。它起源于中国是人类主要植物性蛋白来源之一,在国际贸易中位居主要的油料作物。而且是重要的家畜饲料和许多工业原料,在医学上也有很大价值。因而是一种非常重要的农作物。随着基因工程研究的深入,用转基因技术来改良品种的性状已在许多作物上应用。虽然转基因大豆的大田性状已经商业化,但是相对于水稻、烟草等作物来说,大豆的高效遗传转化一直是植物基因工程领域的难点之一。本文综述了大豆几种遗传转化体系及影响农杆菌介导大豆遗传转化因素,分析了大豆遗传转化中存在的一些问题及其解决办法,展望了未来大豆遗传转化的发展前景。根据植物遗传转化的原理,可以将植物遗传转化方法分为三大系统:载体转化系统,包括农杆菌介导法(根癌农杆菌Ti质粒和发根农杆菌Ri质粒)和植物病毒载体法;种质转化系统,包括花粉管通道法、胚囊和子房注射法、萌动种胚浸泡法;DNA直接导入的基因转化系统,包括物理法(基因枪法、超声波法、电...  (本文共4页) 阅读全文>>