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大豆组织培养体系优化与双价抗虫基因遗传转化的研究

以55个东北地区主栽和国外引入大豆基因型的未成熟子叶、真叶、子叶节和下胚轴为外植体,用高浓度的生长素诱导大豆体细胞胚胎发生与植株再生,对影响大豆体细胞胚胎发生的因子大豆基因型、外植体种类、生长素种类与浓度、低温预处理时间,以及与大豆体细胞胚胎发生率有关的性状的相关性进行了研究;诱导大豆次生胚产生,探讨了与胚性组织增殖、萌发和再生植株有关的因子,优化了大豆组织培养再生体系。以大豆未成熟子叶和胚性组织为受体,用农杆菌和基因枪两种方法对大豆进行Bt基因和CpTI基因双价抗虫基因的遗传转化,经PCR和PCR—Southern分析证明双价抗虫基因被转入到大豆中,并对影响遗传转化的因子进行了研究,主要研究结果如下:1.以未成熟子叶为外植体成功地诱导了54个大豆基因型体细胞胚胎发生,占被诱导基因型的98.18%。在黑龙江、吉林和辽宁三省主栽的大豆基因型中筛选出体细胞胚胎发生率在50%以上的基因型8个。大豆未成熟子叶是诱导体细胞胚胎发生最好的外  (本文共109页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国农学通报》2005年12期
中国农学通报

大豆遗传转化系统的研究进展

大豆是重要的粮食和油料作物,也是人类的主要 食用蛋白和工业原料的来源。大豆生产易受到环境因 素的影响,产量很不稳定,常规育种技术由于受物种 杂交不亲和性及不良基因性状连锁等因素的影响,在 引进其他物种优良基因的同时也带入了许多不需要 的不良基因,因而较难进一步利用。基因工程技术在 这一方面开辟了一条全新的途径。早在1984年,De- Block等11]和Horsch等[2l报道了将外源基因导入大豆 的研究结果‘ 1955年,MeC曲e等[,]和Hinchee等哄l分 别用基因枪轰击大豆未成熟胚生长点和用农杆菌侵 染大豆子叶节的方法获得大豆转基因植株。此后,研 究者们纷纷加入这一领域的竞争并且成果纷呈,利用 基因工程手段创造和培育了多种不同类型的大豆新 品种与种质资源。笔者对大豆的受体系统和转基因方 法的研究进展作一概述,并分析大豆遗传转化的主要 障碍及可能的解决途径。 1大豆遗传转化的受体系统 大豆遗传转化的受体主要有胚轴、未成...  (本文共5页) 阅读全文>>

中国农业科学院
中国农业科学院

我国的大豆经济:供给与需求的重点分析

大豆在我国食物生产和消费系统中扮演了非常重要的角色。大豆一方面为中华民族的繁衍、发展和昌盛,提供了优质的植物蛋白,另一方面它也对我国传统农业的精耕细作和可持续发展提供了良好的地力基础。随着国民经济的发展,大豆仍将是我国食物结构中植物蛋白和动物蛋白(需通过动物转化)的重要来源,并将为未来可持续农业的发展继续作出巨大的贡献。大豆在我国粮食生产中的地位处于缓慢下降的趋势。大豆生产在粮食中的比重由50年代初的6%下降到1998年的3%,且播种面积波动频繁,波动幅度最高时达到20%,单产增长缓慢,1998年比1970年仅提高63%,远远低于同期水稻、玉米和小麦87%、152%和221%的增长幅度。大豆主产省主要为黑龙江、山东和河南,其产量约占全国总产量的46%,但大豆区域变动呈现出由传统产区向其它产区扩散的迹象。传统产区大豆比较优势虽然高居榜首,但非主产省的大豆产量和大豆比较优势一直处于缓慢上升的趋势。大豆生产函数分析表明,大豆生产中播种...  (本文共104页) 本文目录 | 阅读全文>>

东北农业大学
东北农业大学

大豆抗虫基因转移及其转化系统优化研究

采用农杆菌介导的大豆子叶节转化系统成功地将Bt基因(cryLA)导入大豆。从发芽5-7天的大豆无菌苗切取子叶节外植体,经农杆菌感染和共培养后,在选择培养基上4周左右出现抗性不定芽。将不定芽转移到芽伸长培养基上,4-6周后再生苗长至2.5-3cm高。再将再生苗切下转入生根培养基,2周左右生根。生根后的再生植株经逐步锻炼移入盆中,所有植株均能正常开花结荚。在移栽成活的8株T_0植株中有7株PCR检测呈阳性反应;在7个T_1株系中有4个株系存在PCR阳性植株。取4个稳定遗传的T_1代株系内的阳性植株的叶片提取DNA,用地高辛标记的Bt基因探针进行Southern杂交分析,结果4个株系均呈现阳性,证明Bt基因已整合到受体大豆的基因组内并能传递给后代。转基因植株的叶片能在含卡那霉素的培养基上形成愈伤组织;转基因植株的叶片和茎切片能被X-Gluc不同程度地染色;苜蓿夜蛾幼龄幼虫的接种鉴定,有两个转基因株系表现出明显的抗虫性。这些结果证明被转...  (本文共99页) 本文目录 | 阅读全文>>

《遗传》2004年06期
遗传

大豆转基因体系的研究进展

大豆是重要的油料作物和饲料作物 ,也是人类的主要食用蛋白和工业原料的来源。随着基因工程研究的深入 ,用转基因技术来改良品种的性状已在许多作物上应用。将外源基因导入大豆最早的报道是 1984年DeBlock等和Horsch等的研究结果[1,2 ] 。 1988年 ,McCabe[3] 和Hinchee[4 ] 分别用基因枪轰击大豆未成熟胚生长点和用农杆菌侵染大豆子叶节的方法几乎同时获得大豆转基因植株。此后 ,研究者们采用不同的转化方法和受体建立了各种大豆转基因体系。本文对大豆的转基因方法和受体系统的研究进展作一概述 ,并分析大豆遗传转化的主要障碍及可能的解决途径。1 大豆转基因的方法植物转基因的方法很多 ,王关林等[5] 将其分为农杆菌介导法 (根癌农杆菌Ti质粒和发根农杆菌Ri质粒介导的基因转化 )、植物病毒载体介导的基因转化、DNA直接导入的基因转化 (PEG法、脂质体法、电激法、超声波法、显微注射法、激光微束法、基因枪法等 ...  (本文共8页) 阅读全文>>

权威出处: 《遗传》2004年06期
《安徽农业科学》2008年16期
安徽农业科学

大豆再生体系的研究进展

大豆是重要的经济作物,因此提高和优化大豆品质成为人们关注的热点。人们利用转基因技术提高大豆品质的同时,大豆的组织培养也得到了广泛的研究,20世纪60年代人们曾采用过各种不同的外植体,但植株再生一度十分困难,即使有再生植株发生,频率和重演性极低。进入20世纪80年代以来,大豆的再生体系有了突破性的进展。1980年,Cheng等首先报道用无菌苗的子叶节为外植体,在含高浓度BA(10~50μmol/L)的改良B5培养基上诱导丛生芽获得高频率的再生植株[1]。此后,各种不同的再生体系逐渐为人们所发现。建立一个良好的组培再生系统,是大豆遗传转化成功的前提。因此,笔者对目前研究应用比较多的再生体系的优缺点进行了综述。1胚轴再生体系胚轴作为外植体,是目前研究应用较多的农杆菌转化受体。有许多成功的转化事例,早在1983年陈云昭等就以大豆上胚轴和下胚轴为外植体培养出再生植株[2]。徐香玲等和苏彦等分别将Bt基因,SMV-CP基因、几丁质酶基因通过...  (本文共4页) 阅读全文>>