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减蛋综合征病毒四川株(SG9301)的分子生物学及六邻体蛋白基因的克隆和表达的研究

减蛋综合征病毒(Egg Drop Syndrome virus,简称EDSV)是禽类的一种腺病毒,引起的产蛋下降综合征(Egg Drop Syndrome,简称EDS76)可导致产蛋鸡产蛋下降20-30%或以上,蛋的品质下降,是目前养鸡业的一大障碍。程安春等于1993年在国内外首次报道EDSV早期感染导致产蛋鸡开产期推迟并从四川某罗斯父母代肉种鸡场出现严重开产推迟的鸡群中分离到3株EDSV(SG9301、SG9302和SG9303)。本研究以四川本地分离的EDSV-SG9301毒株为基础材料,含病毒的鸭胚尿囊液分别采用PEG或透析袋浓缩、经差速离心沉淀以及不经任何处理,用SDS-蛋白酶K-酚/氯仿抽提出病毒DNA,经测定,DNA的浓度和纯度均无显著差异(OD_(260)/OD_(280)均达1.8以上,每毫升尿囊液中可抽提到0.5ug左右的DNA),DNA的质和量均能满足限制性核酸内切酶分析和PCR等分子生物学实验。然后对EDS  (本文共107页) 本文目录 | 阅读全文>>

《畜牧兽医学报》2003年02期
畜牧兽医学报

减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的克隆和表达

减蛋综合征 (EDS - 76)是由腺病毒科禽腺病毒属Ⅲ群腺病毒即减蛋综合征病毒 (EDSV)引起的以产蛋鸡产薄壳或无壳蛋 ,产蛋率严重下降为主要特征的传染病。 1976年VanEck首次报道后 ,现已成为世界范围内引起产蛋损失的主要原因之一[1] 。过去对EDS - 76的研究主要是病毒分离鉴定、常规诊断、流行病学调查、病毒理化性质及免疫学等方面[2~ 5] 。近年来 ,分子生物学的迅速发展与应用 ,人们对病毒的分子生物学特性也有了一定的研究与认识[6~ 11] 。但国内外均偏重于病毒核酸和蛋白的图谱分析及DNA的序列测定 ,对EDSV一些主要蛋白基因表达的研究未见报道。程安春等 1993年从四川某罗斯父母代肉种鸡场出现严重开产推迟的鸡群中分离到 3株EDSV ,并对其中SG930 1毒株的病原特性进行了研究[3~ 5] 。根据Genebank中EDSV -AV12 7的序列设计一对引物 ,从EDSV -SG930 1株中扩增...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国兽医科技》2002年02期
中国兽医科技

光生物素标记六邻体蛋白基因探针检测减蛋综合征病毒的研究

减蛋综合征 (EDS)是由腺病毒科禽腺病毒属中Ⅲ群腺病毒即减蛋综合征病毒 (EDSV)引起的以产薄壳或无壳蛋、产蛋率严重下降为主要特征的传染病。自 1976年荷兰科学家首次报道该病以来 ,我国和其他许多国家及地区都报道了此病的发生和流行 ,目前该病已成为世界范围内引起产蛋损失的主要原因之一[1 ] 。对该病的诊断已建立了多种方法 ,如血凝和血凝抑制试验、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验、中和试验、病原的分离鉴定等 ,但这些方法或者灵敏度低 ,或者特异性差 ,或者花费的时间较长。近年来 ,由于分子生物学的迅速发展 ,逐步开展了有关该病原的分子生物学检测方法研究[2 ] 。六邻体多肽是腺病毒主要的结构蛋白 ,它与五邻体和纤维蛋白一起构成病毒核衣壳 ,决定着病毒粒子的大小 ;六邻体多肽带有病毒主要的属和亚属特异性抗原决定簇和次要的种特异性抗原决定簇 ,同时与病毒的型特异性有关。笔者利用PCR方法扩增出EDSV四川本地分离株SG930 1...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国兽医学报》1970年30期
中国兽医学报

鸡减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的序列分析

鸡减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的序列分析曾力宇金奇章金钢*朱雷姚二梅李茂祥*李富胜殷震*侯云德(中国预防医学科学院病毒基因工程国家重点实验室,北京100052)摘要从中国发病鸡群中分离的鸡减蛋综合征病毒(EDSV),经非免疫鸭胚增殖后,用差速离心法纯化和蛋白酶K法抽提,获得全长约为34kb的EDSV全基因组。用限制性内切酶HindⅢ酶解EDSV全基因,以pBluescriptⅡ为载体,构建了EDSV的HindⅢ酶解片段的文库,并对其中的D片段(长为3.6kb)进行了序列测定及同源分析,结果提示该片段中唯一一个完整的开放读码框架(ORF)(430~3162位)编码EDSV的六邻体蛋白,其特定氨基酸残基的排列组合和功能区的分布等与其他几个具有代表性的腺病毒的六邻体蛋白相似,它们之间的核苷酸序列同源性在49.6%~72.9%,氨基酸序列同源性在46.3%~83.9%。本研究为进一步阐明EDSV基因组的结构特点,基因结构与功能的关系及进...  (本文共4页) 阅读全文>>

《黑龙江畜牧兽医》2013年03期
黑龙江畜牧兽医

鸡减蛋综合征病毒河北株六邻体蛋白基因的克隆与序列分析

鸡减蛋综合征是由鸡减蛋综合征病毒(EDSV)引起的以产生薄壳或无壳蛋、产蛋率严重下降为主要特征的传染病[1]。减蛋综合征病毒属Ⅲ群禽类腺病毒。研究发现,鸡减蛋综合征病毒虽然只有1个血清型,但是从鸡、鸭、鹅等多种禽类和鸟类体内分离到的病毒致病性差异很大。现已证实,鸡减蛋综合征病毒基因组由线性双链DNA组成,DNA的分子大小约为33 kb(国际标准株AV-127为33 213 bp,国内分离株AA-2为32 838 bp)。以基因组DNA复制为界,鸡减蛋综合征病毒基因组分为早期转录(E)和晚期转录(L)。其中,六邻体蛋白位于L3区,它的多肽含有910个氨基酸,约120 ku,是病毒粒子内最大的蛋白质,在其中部和C端比较保守,是鸡减蛋综合征病毒的主要结构蛋白,它与五邻体蛋白和纤维蛋白一起构成腺病毒的衣壳,并决定病毒粒子的大小,其中含有主要的属和亚属特异性抗原决定簇和次要的抗原决定簇[2]。本试验对鸡减蛋综合征病毒河北分离株(EDSV-...  (本文共3页) 阅读全文>>

《福建农林大学学报(自然科学版)》2008年03期
福建农林大学学报(自然科学版)

种番鸭减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的克隆与序列分析

减蛋综合征(egg drop syndrome,EDS)是一种由禽腺病毒引起的能使蛋禽产薄壳或无壳蛋,产蛋率严重下降的一种病毒性传染病,其病原是减蛋综合征病毒(egg drop syndrome virus,EDSV),为腺病毒科禽腺病毒属Ⅲ亚群禽腺病毒唯一成员,能凝结鸡、鸭、鹅、鸽、雉鸡、鹌鹑、火鸡和斑鸠等多种禽类红细胞.EDSV具有广泛的宿主范围,各毒株间毒力差异大,许多毒株对鸡和水禽都不致病,但可在机体内长期繁殖[1-8].1999年以来,在浙江、福建、上海等省市蛋用鸭和种用鸭出现了一种类产蛋下降综合征.临床上,患病鸭主要是群发性食欲下降,产蛋下降,并伴有呼吸道症状,鸭群中有15%-70%不产蛋,导致产蛋率急剧下降,严重的从95%下降至30%.产异常蛋也是该病的重要特征,如产软壳蛋、粗壳蛋、浅色蛋、薄壳蛋和畸形蛋等,或者群鸭表现无产蛋高峰及持续低产蛋率,但病鸭病死率很低(0.1%-1.2%).研究表明,鸭群EDS76病毒的...  (本文共4页) 阅读全文>>