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p75NTR基因修饰O2A祖细胞对成年大鼠损伤脊髓的修复作用

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)救治修复的关键是如何促进其功能的恢复。大量实验研究表明细胞替代、增强神经元再生潜能、克服再生抑制因素等方法对损伤脊髓功能恢复有一定的促进作用,但距离临床应用尚存在很大差距。同时临床和实验的证据显示SCI后常伴有一定程度的功能恢复,残存的脱髓鞘轴突和出芽轴突在功能恢复中起重要作用。因此,增强损伤脊髓固有可塑能力是促进功能恢复的重要手段。研究发现SCI后功能损害的同时,少突效质细胞(oligodendrocyte,ODC)明显减少,而功能代偿出现时,则见ODC数目增加。移植具有成髓潜能的细胞(如Schwann细胞、嗅鞘细胞、神经干细胞等),对受损脊髓的功能改善更为明显。本室的研究表明腺病毒介导的BDNF基因转移导致的SCI功能修复主要是通过其促髓鞘形成作用来实现的。可见,促进受损脊髓的髓鞘再形成,是加速SCI功能修复的重要策略。要达到这一目的,最直接的手段是移植ODC,但由于其  (本文共125页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国协和医科大学
中国协和医科大学

阵发性睡眠性血红蛋白尿症造血干/祖细胞体外单个细胞培养研究及基质研究初探

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种后天获得的溶血性疾病。临床上以血管内溶血、严重贫血及血栓为主要特征。临床上还观察到PNH与再生障碍性贫血(AA)有密切的关系。人们已经认识到,PNH造血干细胞发生PIG-A基因突变导致GPI锚合成障碍,致使GPI锚连蛋白(如CD59、CD55等)缺乏,可引起溶血及其它临床表现。但是,有关PNH的发病机制,迄今仍有许多问题有待解决。如缺乏GPI锚连蛋白的异常表型细胞往往能与正常表型的克隆长期共存并占据造血优势,这种优势是由于突变细胞本身具有增殖优势,还是由于病人本身的所谓“正常”克隆存在增殖生存缺陷而导致的相对优势?病人的正常表型细胞生长是否正常,能否在自体造血干细移植时重建正常造血?病人的造血异常有无造血干细胞以外的其它因素?本文针对这些问题从不同角度进行了研究,其结果将有助于阐明PNH的发病机制。一、应用流式细胞仪测定了21例病人外周血及骨髓造血干/祖细胞(以CD34+为标志)锚连蛋白C...  (本文共83页) 本文目录 | 阅读全文>>

天津医科大学
天津医科大学

高糖环境对兔骨髓内皮祖细胞和循环晚期内皮祖细胞功能影响的对比研究

背景:糖尿病血管病变严重,发病年龄轻,进展快,累及范围广,并且伴有严重的侧支动脉发育受损,是造成糖尿病死亡的主要原因。内皮祖细胞(EPC)是骨髓干细胞的一种亚群,是血管内皮细胞的前体细胞,不仅在血管新生中作用显著,也有强烈的内皮保护作用。成年人体内存在骨髓内皮祖细胞(BM-EPC)和循环内皮祖细胞(circulating EPC),后者又具有两种亚型,循环早期内皮祖细胞(early EPC)和循环晚期内皮祖细胞(late EPC)。研究发现,无论是1型还是2型糖尿病,其内皮祖细胞的增殖、黏附、整合入血管结构以及成血管能力均显著下降,糖尿病血管病变与其内皮祖细胞功能不全密切相关。然而糖尿病影响内皮祖细胞功能的机制、糖尿病对不同来源内皮祖细胞功能影响是否存在差别、内皮祖细胞移植是否会改善高糖环境下缺血心肌的灌注等远未明确。目的:1.探讨BM-EPC和late EPC的生物学特征差异。2.探讨高糖、高胰岛素对体外培养的BM-EPC和l...  (本文共141页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

基质细胞衍生因子-1a对外周血内皮祖细胞的影响及其机制探讨

内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一类能增殖并分化为血管内皮细胞,但尚未表达成熟血管内皮细胞表型,也未形成血管的前体细胞。研究发现,EPCs不仅参与血管形成(angiogenesis),同时也参与出生后血管生成(vasculogenesis)。近来研究表明内皮功能障碍在冠心病的发生、发展中扮演了重要角色。内皮功能障碍的本质是内皮损伤和修复之间动态平衡的破坏,而EPCs在内皮损伤后的修复中起重要作用。EPCs能修复损伤的内皮细胞,保持内膜完整性从而抑制局部粥样硬化斑块及血栓的形成。然而诸如老龄化、糖尿病、高血压、高胆固醇及吸烟等冠心病危险因素对循环EPCs数量和活性具有明显抑制作用。基质细胞衍生因子-1a(Stromal cell-derived factor-1a,SDF-1a)是趋化因子CXC亚家族中的一员,首先在小鼠骨髓基质细胞分泌的细胞因子中被发现,又被称为B细胞生长因子。其...  (本文共112页) 本文目录 | 阅读全文>>

复旦大学
复旦大学

内皮祖细胞灌注供心诱导免疫耐受延长同种异体心脏移植物存活时间

第一部分大鼠骨髓内皮祖细胞的分离培养和鉴定的实验研究【目的】研究大鼠骨髓内皮祖细胞(EPC)分离、培养并向内皮细胞方向诱导分化的方法和条件。【方法】获取SD大鼠的骨髓细胞,通过密度梯度离心法分离培养单个核细胞,取贴壁细胞选择性诱导培养2w以上,获取内皮祖细胞(EPC)。以Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色法鉴定EPC。【结果】贴壁细胞经诱导培养后3d开始伸展,5d形成集落,7-10d增殖加速并出现条索状结构,2w大部分细胞呈多角形。Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双染,免疫荧光染色阳性率大于70%。【结论】通过贴壁诱导筛选法培养可以从大鼠骨髓中分离培养出纯度较高的具备内皮细胞部分特征的EPC。第二部分内皮祖细胞的混合淋巴细胞培养实验【目的】研究骨髓来源内皮祖细胞在体外培养时对混合淋巴细胞反应的影响【方法】以SD大鼠的脾淋巴细胞为刺激纽胞,以Wistar大鼠的脾淋巴细胞为反应细胞,分为5组。组Ⅰ:为对照...  (本文共105页) 本文目录 | 阅读全文>>

大连理工大学
大连理工大学

旋转壁式生物反应器中造血干/祖细胞体外扩增的研究

体外扩增的造血干/祖细胞具有广泛的临床应用,包括造血干细胞移植、基因治疗、免疫治疗以及制备成熟的血细胞来输注人体。人脐带血能够给细胞移植治疗和再生医学提供大量的优质造血细胞。但是来自单份脐带血的造血干/祖细胞数量十分有限,极大地限制了脐带血在重建成人造血机能中的应用。因此,迫切需要发展体外扩增体系来大规模扩增造血干/祖细胞。静态培养体系,如组织培养瓶等,具有许多局限性,已被证明不适合大规模扩增造血干/祖细胞。因此,需要发展生物反应器技术来促进造血干/祖细胞的体外大规模扩增。先进的生物反应器可以改善静态培养体系存在的传质限制,能够较好地保持培养体系的稳定。本研究利用旋转壁式生物反应器(rotating wall vessel,RWV),并采用适合的培养模式,如单纯悬浮培养以及微胶囊化基质细胞共培养的方法来体外大规模扩增人脐带血来源的造血干/祖细胞。另外,本研究还建立了静态以及RWV动态微囊化共培养模式的数学模型,来模拟微囊化共培养...  (本文共183页) 本文目录 | 阅读全文>>