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砷诱导T淋巴细胞系(Jurkat T Cell Line)的差异表达基因的分析研究

砷是广泛分布的无机元素,属类金属。过多摄入机体可导致急慢性砷中毒,不但能引起皮肤和多器官的损害,甚或导致肿瘤,而且对机体的免疫功能也有明显的损害。目前,对砷致病和致癌机制尚不清楚,许多研究表明,砷对组织和细胞的毒性作用是由多基因损伤和/或多基因参与多途径作用的结果。但至今尚未见从多基因关系研究肿对淋巴细胞生长影响的有关研究报道。针对这一问题,本研究设计了一种新的研究方案,即应用克隆差异表达基因的抑制性消减杂交技术,研究砷在一定浓度(T淋巴细胞生长受抑制)的条件下,诱导的差异表达基因并将其克隆后,建立三氧化二砷诱导的正向消减cDNA文库。经过测序分析并利用生物信息学技术对正向消减cDNA文库中的基因进行同源性对比,确定基因名称和功能。应用反向Northern杂交技术和普通计算机软件对克隆的差异表达基因进行表达水平检测和鉴定。应用此方案,不但在国内外砷研究领域中首次建立了T淋巴细胞的正向消减cDNA文库,而且从多基因角度初步观察到砷  (本文共146页) 本文目录 | 阅读全文>>

《细胞与分子免疫学杂志》2004年01期
细胞与分子免疫学杂志

γ辐射诱发的人AHH-1 T淋巴细胞凋亡及其调控机制

免疫系统在抵御病原体侵袭、防止肿瘤和各种疾病发生、维持机体自身免疫平衡中起着至关重要的作用。一旦机体免疫系统受到损害 ,便会引发各种疾病。已经证实 ,在机体中起重要免疫功能的T细胞对电离辐射高度敏感[1] ,因而针对T细胞辐射损伤特点和机制的研究 ,已成为目前放射生物学和辐射损伤免疫学领域的研究热点。本实验室以往在辐射诱发的免疫淋巴细胞损伤的病理机制方面已进行了大量研究[2 4 ] 。本实验中着重观察急性照射后T细胞的损伤特点以及淋巴细胞凋亡在其中的作用及其调控机制 ,以期从调控细胞凋亡的角度为急性放射病的防治提供实验依据。1 材料和方法1.1 材料 正常人的T淋巴母细胞系AHH1(早于CD4 /CD8分子的出现 )细胞呈悬浮生长 ,由本所周平坤教授惠赠。培养于含 10 0mL/LFBS的RPMI16 40培养液中。原位末端标记 (TUNEL)细胞凋亡检测试剂盒 (购自德国宝灵曼公司 ,含标记缓冲液、TdT、Bio dUTP和...  (本文共3页) 阅读全文>>