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应用噬菌体展示技术进行猪瘟病毒结构(糖)蛋白E2和E~(rns)中和抗原表位鉴定和比较

猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和边界病病毒(BDV)为黄病毒科瘟病毒属成员,其病毒结构、抗原性和遗传特性密切相关。CSFV囊膜结构(糖)蛋白E2(gp55)是诱导机体产生中和抗体及激发保护性免疫应答的主要抗原蛋白。蛋白结构模型预测其N-末端区域暴露于病毒粒子表面,而C-末端短肽区延伸并穿越病毒囊膜。囊膜结构(糖)蛋白E~(rns)/EO(gp48)具有RNA酶活性,在病毒增殖及中和病毒感染中发挥重要作用,是诱导机体产生保护性免疫应答的第二抗原蛋白。E2和E~(ns)与细胞表面受体的相互作用介导猪瘟病毒对细胞的感染过程。免疫过氧化物酶染色试验检测135株瘟病毒分离物结果表明:抗CSFV囊膜结构(糖)蛋白E2的单克隆抗体c24/10、a18、WH303及M1669,能识别目前已知的所有猪瘟毒株。而针对E~(ns)的单克隆抗体1B5,b4-22和24/16均仅能识别部分猪瘟毒株,提示其对应的表位在所有猪瘟毒株不是共  (本文共103页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业大学
中国农业大学

猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白抗原表位的分析

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine respiratory and reproductive syndrome virus,PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病。本研究利用噬菌体展示技术,结合ELISA和基因表达等技术对PRRSV结构蛋白的抗原表位进行了鉴定与分析,为PRRSV的结构蛋白免疫特性与功能研究以及表位疫苗的设计等奠定了基础。1.运用GoldenKey分子生物学软件对PRRSV BJ-4结构蛋白的抗原表位及其二级结构进行了分析和比较,从中筛选13段显示表位特征的氨基酸残基序列,用PCR技术扩增相应的核苷酸片段,将其插入到噬菌体表达载体M13KE,结果预测的13个表位可在噬菌体表面得以展示。2.利用PRRSV BJ-4阳性血清和鼠源抗重组结构蛋白抗体,采用间接ELISA方法对噬菌体展示的表位进行了鉴定。结果表明,在预测的13个抗原表位中,鉴定出7个表位。GP2a的a...  (本文共98页) 本文目录 | 阅读全文>>

《陕西科技大学学报》2017年05期
陕西科技大学学报

牛羊乳α-酪蛋白的B细胞抗原表位预测及免疫反应性分析

0引言牛乳中富含多种蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质,是人体优质的营养来源,但同时也是联合国粮食及农业组织FAO(1995)报告的八大类过敏食物之一[1].牛乳过敏是指机体对牛乳蛋白的高反应性(hypersensitivity),是婴幼儿最常见的食物过敏之一,在欧美发达国家,婴儿牛乳过敏症状发生率达0.3%~7.5%[2].目前普遍认为,牛乳蛋白中的酪蛋白(Casein,CN)、β-乳球蛋白(β-lacto-globulin,β-LG)和α-乳白蛋白(α-lactalbumin,α-LA)是最主要的过敏原,其中酪蛋白主要由αs1、αS2、β和κ酪蛋白组成,约80%是由αs1-酪蛋白(αs1-CN)组成,对酪蛋白过敏的患者一般都对αs1-CN过敏[3,4].羊乳总热量、干物质、蛋白质、脂肪以及矿物质含量均高于牛乳,具有较高的营养价值,且易被人体消化吸收利用,在国际营养学界被誉为“乳中之王”[5].以羊乳替代牛乳作为婴幼儿主...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中国人兽共患病学报》2017年09期
中国人兽共患病学报

弓形虫微线蛋白16抗原表位区的预测及酵母表面展示

(1.Shandong Academy of Medical Sciences,Shandong Institute of Parasitic Diseases,Jining272033,China;2.Shandong Academy of Medical Sciences,Shandong Laboratory Animal Center,Jinan250000,China)煮熟的肉制品都能引起弓形虫的感染,因此,美国和法国已将弓形虫列为继沙门氏菌和李斯特菌后的第三大食源致死性病原[1-2]。怀孕妇女感染弓形虫,可导致早产、流产、死胎或胎儿致畸(小脑畸形、小眼畸形等)、胎儿脑积水,严重影响新生儿人口素质[3]。弓形虫入侵宿主细胞是多种蛋白协调作用的结果,在其黏附入侵过程中,伴随着细胞器(微线体、棒状体和致密颗粒)蛋白的顺序释放[4];微线蛋白(Microneme protein,MIC)是首先释放的蛋白,在虫体和宿主细胞间形...  (本文共5页) 阅读全文>>

《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2017年10期
西北农林科技大学学报(自然科学版)

PRRSV N与GP5蛋白抗原表位的串联表达及其间接ELISA检测方法的建立

猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproduc-tive and respiratory syndrome virus,PRRSV)属于网巢病毒目(Nidovirales)动脉炎病毒科(Arteriviri-dae)动脉炎病毒属(Arterivirus)单股正链RNA病毒[1-2]。PRRSV的基因组长约15kb,编码产物分别为(5′端至3′端)非结构蛋白ORF1(ORF1a和ORF1b)及结构蛋白ORF2a(GP2a)、ORF2b(GP2b)、ORF3(GP3)、ORF4(GP4)、ORF5(GP5)、ORF6(M)和ORF7(N)。PRRSV基因组结构和其他动脉炎病毒组基因组结构相似,在病毒的5′端有帽子结构,3'端多聚腺苷酸化[3-5]。其非结构蛋白编码基因ORF1占基因组全长的75%左右,包含有PRRSV复制所需的酶类,参与病毒的增殖过程。PRRSV结构蛋白中ORF2~ORF6编码病毒的囊膜蛋白,其中ORF2~...  (本文共7页) 阅读全文>>

《国际医学寄生虫病杂志》2015年04期
国际医学寄生虫病杂志

细粒棘球蚴14-3-3蛋白序列、结构及抗原表位的分析

棘球蚴病是由棘球绦虫的幼虫感染并寄生于人畜体内引发的一种呈世界性分布的人畜共患寄生虫病,该病严重危害人类的健康和农牧业经济的发展,是全球性的公共卫生问题。我国是棘球蚴病发病率最高的国家之一,该病被列为我国重点防治的寄生虫病。现已证实我国有31个省(直辖市、自治区)存在棘球蚴病感染病例,棘球蚴病高发区主要位于新疆、甘肃、宁夏、内蒙、青海、 西藏等农牧业地区约占全国面积的44%,棘球蚴病流行范围约占国土面积的80%。我国有100多万棘 球蚴病现症患者,几千万人受威胁;棘球呦病畜超 过4000万头,每年新发病畜达800多万头,年经济损失超过30亿[1]。在2000年召开的西部地区寄生虫病专业会议上,棘球蚴病被确认为是危害西部地区发展和人民麵最严重的寄生虫病。随着社会经济 i^^^, _? _,J亂急爵搜也速扩大,传播风险不断增加这一新的特点成为该病防治中面临最棘手的问题,如何最有效地预防和控 能诱发与抗原蛋白反应的抗体,提示有被选作特...  (本文共6页) 阅读全文>>