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动物源性大肠杆菌多重耐药与AcrAB外输泵表达水平关系的研究

大肠杆菌是医学和兽医学临床感染中最常见的病原菌之一。大肠杆菌对多种抗生素耐药主要与菌体中存在的外输泵有关。一般认为AcrAB-TolC外输泵是最主要的外输泵,能够输出多种抗生素、化疗试剂、洗涤剂和染料类。如果使该系统失活,大肠杆菌可从多重耐药状态变为相对敏感状态。穿越大肠杆菌的内膜和外膜,可使药物直接外输到介质中的AcrAB-TolC系统共包含AcrA、AcrB和TolC三个部分。AcrA是膜融蛋白,它的功能是与一个位于内膜、属于RND(耐药性结瘤)家族的含有12个α-螺旋的转运子的AcrB及外膜通道TolC相连接。TolC基因的突变不能改变大肠杆菌对药物的敏感性。本实验欲检测临床分离的动物源性大肠杆菌的AcrA、AcrB基因的mRNA和蛋白的表达水平,寻找AcrA、AcrB基因的表达水平与大肠杆菌多重耐药水平的相关性,实验共分三个部分。动物源性多重耐药大肠杆菌的分离与鉴定临床分离132株来自不同动物的动物源性大肠杆菌,经微生物  (本文共111页) 本文目录 | 阅读全文>>

《重庆医科大学学报》2004年06期
重庆医科大学学报

伤寒沙门菌多重耐药acrAB全基因的检测及序列分析

随着氟喹诺酮类药物临床的广泛应用 ,耐药沙门菌已有报道 ,并出现了多重耐药菌株[1,2 ] ,其机制主要与细菌中存在主动外排系统有关[3] 。大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等多种细菌均报道存在抗菌药物的主动外排系统。研究表明 ,伤寒沙门菌有相应耐药机制 ,并可经过体外诱导使原来敏感的细菌产生多重耐药[4 ] ,为进一步研究该多重耐药主动外排基因及其调控基因的结构和功能 ,我们首先对诱导前的敏感菌株的多重耐药基因进行PCR全基因扩增及测序 ,同时为分析比较该基因在诱导前后是否存在突变及克隆表达作准备。1 材料和方法1.1 研究对象伤寒沙门菌 2 75 (S2 75 )为我院 1996年临床病人血培养分离所得对喹诺酮类敏感的菌株 ,试验前重新鉴定。1.2 材料和仪器1.2 .1 分子生物学试剂 TaqTM 酶、PyrobesTM DNAPoly merase、BKLKit、E .ColiCompetentJM 10 9Ce...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国抗感染化疗杂志》2001年04期
中国抗感染化疗杂志

主动外排系统acrAB在临床分离肺炎克雷伯菌中的分布和表达

细菌的主动外排是导致细菌产生多重耐药norA,肺炎链球菌有PmrA,大肠埃希菌有acnrkn--(mddd。gnSISt。m巳N旧旧)的重要原因【‘n。有关 扣CJC汪F/m一旧等,铜绿假单胞菌有。rtn0.细菌主动外排的研究是近年来细菌耐药机制研究prM、mexCDOprJ、mexEFOprN、meZ:Hy等主动外中,相对较新、较活跃的领域。研究主要集中在金黄排系统[2‘]。其中大肠埃希菌产生 MDR主要与色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞acn七巳to汇有关,如果使该系统失活,则菌株即从菌等少数几种细菌,并已经发现金黄色葡萄球菌有 MDR状态转变为敏感状态[2-5]。GimM等[61发现——在沙门菌属中也存在着acrAB基因。肺炎克雷伯菌是临床常见的病原菌,可以引起194 中国抗感梁化厅杂志2001年12目15日第1卷第4期ChinjlnfeCtChelltZther,Dec 20(),VOL,No。4呼吸道、...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中华医院感染学杂志》2016年16期
中华医院感染学杂志

acrAB外排泵对肺炎克雷伯菌耐环丙沙星作用的研究

肺炎克雷伯菌是临床感染菌中分离率较高的革兰阴性菌,是引起医院感染的常见菌之一,其可导致消化道、呼吸道、泌尿生殖道等部位的感染[1]。以环丙沙星为代表的喹诺酮类抗菌药物作为临床应用处于第2位的化学合成抗菌药物,广泛用于肺炎克雷伯菌感染的治疗,同时临床肺炎克雷伯菌的耐药率也逐渐增多,从而导致治疗失败[2,3]。药物外排泵是肺炎克雷伯菌等固有性和获得性耐药的重要原因,本研究通过检测耐环丙沙星肺炎克雷伯菌的外排泵基因以及观察加入泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)前后,细菌对药物敏感性变化,分析外排泵在肺炎克雷伯菌耐环丙沙星中的作用,为临床用药提供参考,也为今后外排泵以及泵抑制剂的研究提供试验依据。1材料与方法1.1菌株来源及鉴定收集2014年9月-2015年2月医院不同科室病房感染患者痰液、尿液、脓液、咽拭子、渗出液、胆汁、血液等标本分离肺炎克雷伯菌36株;试验菌株均根据临床资料和随机引物聚合酶链反应(PCR)方法排除重复菌株。质控菌株为...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国公共卫生》2005年06期
中国公共卫生

主动外排系统acrAB在志贺菌中分布和表达

研究表明,主动外排系统是细菌产生多重耐药的主要原因〔1,2〕,在大肠埃希菌中已发现有多种主动外排系统,其中acrAB-tolC系统在多重耐药过程中起到重要作用〔3,4〕。Lau ra等研究发现acrAB泵的过度表达与沙门菌的多重耐药产生密切相关〔5〕。章建立等研究发现acrAB表达水平决定了肺炎克雷伯菌的多重耐药表型〔6〕。因此药物主动外排作用在细菌耐药性产生中的意义日益受到关注。志贺菌属细菌是引起细菌性痢疾的主要病原,志贺菌的多重耐药株分离呈逐年增多趋势[7~9]。本文研究主动外排系统acrAB-tolC在临床分离志贺菌中的分布和表达,为克服志贺菌的多重耐药产生提供理论基础。结果报告如下。1材料与方法1.1药品与主要试剂四环素购自Amersham公司;氯霉素和氨苄青霉素购自Amresco公司;吡哌酸、环丙沙星购自Sig ma公司;dNTPS、TaqDNA聚合酶和总RNA抽提试剂盒购自上海Sangon公司;PCR产物纯化试剂盒购...  (本文共3页) 阅读全文>>

东北农业大学
东北农业大学

AcrAB外输泵介导的鸡沙门氏菌耐药性研究

沙门氏菌是医学和兽医学临床感染中最常见的病原菌之一。鸡沙门氏菌是危害我国养禽业健康发展的重要病原菌之一。目前主要使用抗菌药物对该病进行预防和治疗。氟喹诺酮类药物为一类化学合成的广谱、高效、低毒的抗菌药物。随着该类药物的长期和不当使用,其耐药性也随之广泛产生,且耐药率逐年增高。耐药性的产生导致预防和治疗失败,给养殖业带来巨大经济损失。研究表明,鸡沙门氏菌对各种抗菌药物产生耐药性与主动外输系统(外输泵)密切相关。其中AcrAB-TolC外输泵是最主要外输泵,包括药物质子转运子AcrB、周质融合蛋白AcrA和外膜通道蛋白TolC。acrA基因和acrB基因由一个操纵子调控,AcrAB在机能上是统一的,因此,其活动性基本可以反映整个外输泵的活动性。本试验采用试管二倍稀释法通过体外诱导试验,获得对氟喹诺酮类药物环丙沙星不同水平的5株鸡沙门氏菌耐药菌株(分别为16×MIC、32×MIC、64×MIC、128×MIC、256×MIC,MIC为...  (本文共71页) 本文目录 | 阅读全文>>