分享到:

基因工程菌培养若干重要问题的研究

本论文以基因工程菌培养生产人表皮生长因子和青霉素酰化酶为研究对象,针对基因工程菌培养中具有共性的若干关键问题:质粒稳定性、代谢副产物的抑制作用及高密度培养中的氧传递等,研究采用适当的工程措施,提高产物的表达水平。主要的研究内容和成果包括:一、大孔树脂在hEGF重组菌培养过程中的原位吸附分离乙酸乙酸是基因工程大肠杆菌培养过程中产生的主要代谢副产物之一,对菌体生长和产物表达具有严重的抑制作用。论文首先考察了外加乙酸钠或乙酸对生产hEGF的重组菌E.coli JM101的生长和外源基因表达的影响,发现外加乙酸钠后,重组菌的延滞期增长,并且随着乙酸钠浓度的增加,对重组菌的抑制作用越明显,乙酸钠浓度达到30g·L~(-1)时,就可几乎完全抑制重组菌的生长;而乙酸对外源基因hEGF的表达研究表明,乙酸盐浓度高于20g·L~(-1)以上时,就可完全抑制产物表达。根据乙酸的理化性质,筛选了对乙酸吸附量较大的阴、阳离子树脂各一种,研究了阴、阳离子  (本文共150页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物工程进展》1988年01期
生物工程进展

日两家公司计划用基因重组菌工业生产酶

生化工业公司和天野制药公司分别向通产省提出把基因重组芽孢杆菌属(Bacillus)的菌用于酶的工业生产的计划书,符合所使用的设备,装置及其运...  (本文共1页) 阅读全文>>

《国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册》1989年04期
国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册

预防新生仔猪肠毒性大肠杆菌病的DNA重组菌毛菌苗的研制及保护效果

由四个不同的大肠杆菌株(k88ac、k88ab、k99和987P)制备高分子量质粒DNA,通过克隆E_(CO)RI、HindⅢ或Ban HI部分消化片段成为高拷贝质粒载体,用于构建各自的DNA库。用k88ac、k...  (本文共2页) 阅读全文>>

华南理工大学
华南理工大学

重组E.coli_CtSAPDH细胞催化生物基呋喃醛选择性氧化的研究

糠醛和5-甲氧基甲基糠醛(5-methoxymethylfurfural,MMF)是重要的生物基平台化合物,可以由碳水化合物脱水制备得到。MMF及糠醛中均含有甲酰基,可分别被选择性氧化成5-甲氧基甲基-2-糠酸(5-methoxymethyl-2-furancarboxylic acid,MMFA)及糠酸。这两种产物是制备香料、药物、农业化学品、光电材料及合成纤维的重要中间体。目前,化学法仍是合成MMFA和糠酸的主流方式,但该法存在环境不友好、选择性欠佳、能耗高及反应条件苛刻等问题。而生物催化能有效解决上述问题,符合绿色可持续的发展理念,有望取代化学法用于糠酸及其类似物的合成。最近本实验室分离得到一株可高效催化5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl-furfural,HMF)氧化的Comamonas testosteroni SC1588,随后从中发掘出一个可高效催化HMF氧化的3-琥珀酰半醛-吡啶脱氢酶(3-succi...  (本文共104页) 本文目录 | 阅读全文>>

江南大学
江南大学

Pantoea dispersa蔗糖异构酶在芽孢杆菌中的表达及发酵优化

蔗糖异构酶(Surcose Isomerase,SIase)能将蔗糖分子内的α-1,2-糖苷键转位形成α-1,6-糖苷键或α-1,1-糖苷键,从而得到异麦芽酮糖或海藻酮糖,根据其主产物不同也被称作异麦芽酮糖合酶或海藻酮糖合酶。异麦芽酮糖与蔗糖在甜度、溶解度等物理性质比较相近。相对于蔗糖而言,异麦芽酮糖具有防龋齿、预防糖尿病、抗疲劳、易吸收等特点。生物酶法制备异麦芽酮糖转化率较高,反应条件温和,产物易分离,符合绿色环保的要求。本研究基于前期构建的产蔗糖异构酶重组菌Brevibacillus choshinensis/pNCMO2-SI,通过对摇瓶和3-L罐培养条件进行优化,并进一步筛选启动子提高了酶产量。同时将蔗糖异构酶基因在宿主菌Bacillus subtilis WSH11中进行表达,同时比较两个表达系统的优劣性。主要研究结果如下:(1)通过摇瓶优化,确定了重组菌B.choshinensis/pNCMO2-SI最佳培养条件为:...  (本文共54页) 本文目录 | 阅读全文>>

江南大学
江南大学

Athrobacter ramosus的MTSase和MTHase的重组表达及应用

海藻糖是一种天然低聚二糖,是许多植物、昆虫和微生物在逆性环境下的应激代谢物,具有低卡、稳定、保湿和防晒等优点,广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。海藻糖主要是以淀粉为底物经麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltooligosyl trehalose synthase,MTSase,EC5.4.99.15)和麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltooligosyl trehalose trehalohydrolase,MTHase,EC3.2.1.141)连续作用获得,但是目前报道的这两种酶的表达宿主大多为大肠杆菌,其含有的内毒素不利于食品酶的制备,而枯草芽孢杆菌不分泌内毒素,且发酵周期适中、培养方便,是食品级酶制剂表达宿主的最佳选择之一。本实验室前期构建了重组表达Athrobacter ramosus S34来源的MTSase和MTHase的B.subtilis WS11/pHY300PLK-Y和B.subtilis WS11/pHY300...  (本文共53页) 本文目录 | 阅读全文>>