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生物纤维支架细胞重建组织工程实验研究

背景:传统同种或异种生物瓣的表面缺乏宿主内皮细胞(EC)覆盖及基质缺乏间质细胞,是瓣叶钙化和原发性胶原退变的主要原因之一。因此,90年代以来,在瓣膜支架上种植宿主活性细胞以构建生物相容性好、具有抗钙化和自我修复能力的新型生物瓣是瓣膜外科研究的重要方向。目前应用的支架材料仍有不同的缺陷。生物材料脱细胞、鞣制后形成的纤维支架宿主细胞重建的研究,尚未见报道。本实验采用Courtman法脱去牛心包的细胞成分及可溶性蛋白,经戊二醛(Glutaraldehyde,GA)固定和2,3-丁二醇改性处理,最后依序种植肌成纤维细胞(MFC)和EC,研究其生物相容性及细胞生长特点,目的为在体外构建成含宿主细胞的组织工程生物瓣材料。方法:(1)牛心包纤维支架试片的制备及分组:Ⅰ组(n=24,1×1cm~2/片):新鲜牛心包经Courtman法脱细胞后用GA固定;Ⅱ组(n=24,1×1cm~2/片):脱细胞及固定方法同Ⅰ组,随后用2,3-丁二醇改性。(2  (本文共73页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国协和医科大学
中国协和医科大学

生物瓣钙化机制与羟基铬化学改性作用的研究

Ⅰ.生物心脏瓣膜钙化机制的研究用Triton X-100等三类表面活性剂(阴离子活性剂SDS,非离子活性剂Triton X-100、Tween 80和阳离子活性剂HTAB)共四种处理经传统戊二醛(GA)法改性的牛心包瓣片,处理后的瓣片以钌红特异染色,对基质主要成分蛋白聚糖(PG)作超微形态观察,并同时对处理液作PG定量分析;然后将这些处理后的瓣片植入幼兔(New Zealand)背部皮下,21天后取出,用原子吸收法作钙定量以判定钙化程度。结果发现,透射电镜下非离子与阴离子表面活性剂处理过的瓣片组织中PG阳性颗粒明显减少;其处理液含有PG相当于对照组的3~6倍:而阳离子表面活性剂处理液内PG含量远少于前三组(P<0.001),与GA对照组相近(P>0.05)。兔皮下植入各组瓣片钙定量结果显示,非离子和阴离子组明显少于阳离子组和对照组(P<0.001)。结果表明,前者具有抗钙化作用,并这种作用与它们部分去除组织中PG有关。用Bowe...  (本文共134页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国胸心血管外科临床杂志》2018年06期
中国胸心血管外科临床杂志

我国生物瓣临床应用现状与思考

1我国生物瓣应用现状和瓣膜外科特点据统计,全球每年瓣膜置换约40万例,其中生物瓣约占75%,且每年以10%速度增加。“十二五”期间本单位分析我国10家心脏中心人工瓣应用情况,结果显示生物瓣占各类瓣膜替代物14.1%,其构成比为二尖瓣位12.7%、主动脉瓣位14.9%、三尖瓣位50.8%、肺动脉瓣位22.2%,不同单位存在较大差异;我国生物瓣使用率逐年上升,近5年增长率保持在15%~20%,患者平均年龄61.9岁,手术死亡率2.8%,术后10年生存率82%,免再次手术率86%。我国心外科手术量现已突破20万例/年,瓣膜手术占20%~25%。目前我国瓣膜外科呈现以下特点:(1)病种虽以风湿性瓣膜病为主,退行性、缺血性瓣膜病比例较前增加;(2)瓣膜病患者平均年龄较前明显增长;(3)瓣膜病合并心房颤动发生率较高,瓣膜外科同期治疗心房颤动的手术方法及其效果逐渐被认可;(4)瓣膜修复技术近年得到较快发展,与发达国家仍有差距;(5)尽管瓣膜修...  (本文共3页) 阅读全文>>

《现代医学》2003年01期
现代医学

新型防钙化生物瓣应用的随访观察

生物瓣存在晚期钙化、衰败 ,患者因此而被迫再次行瓣膜置换术。为此 ,我院从 1985年开始研制新型防钙化生物瓣 ,经实验研究证实 ,该生物瓣具有良好的抗钙化效果 ,1989年应用于临床 ,至 2 0 0 1年 12月已用 80个瓣膜为 65例病人进行了心脏瓣膜置换术 ,经长期随访 ,效果良好。报告如下。1 临床资料65例换瓣病例中 ,男 38例 ,女 2 7例 ,年龄 11~ 70岁 ;术前心功Ⅱ级 9例 ,Ⅲ级 42例 ,Ⅳ级 14例 ;胸部X线片显示心胸比在 0 .5 0~ 0 .75。全组均在体外循环下行瓣膜置换术 ,单纯左房室瓣置换 40例、主动脉瓣置换 5例、右房室瓣置换 7例 ,左房室瓣加主动脉瓣双瓣置换 11例 ,左房室瓣、右房室瓣与主动脉瓣三瓣膜置换 2例 ;并行右房室瓣成形术 18例 ,左房血栓清除 8例 ,室壁瘤切除 1例 ,冠状动脉搭桥 4例。植入左房室瓣为 2 5、2 7mm两种规格 ,主动脉瓣以 2 3...  (本文共1页) 阅读全文>>

《中华医学杂志》2000年02期
中华医学杂志

异种生物瓣衰坏机制及其防治对策的探讨

生物瓣膜由于其所特有无金属开瓣音 ,无溶血 ,低血栓发生率以及不需终身抗凝等优点 ,其临床应用和研究一直受到人们的关注。但瓣膜衰坏 (failure)而引起的耐久性问题一直未能得到解决。大量的研究证实 :异种生物瓣衰坏是由于多种因素共同参与的结果[1] ,其中包括宿主因素 ,瓣膜处理方式及瓣膜设计构造等引起的钙化、机械应力效应以及免疫原性反应等损伤过程。一、生物瓣的生化改变———钙化及其对策钙化是生物瓣膜衰坏的首要因素[2 ] ,也有人认为是唯一因素 ,其钙盐沉积为最显著的病理特征。一般认为与蛋白聚糖和羧基组织中残余的碱性磷酸酶有关 ,且多出现在应力集中部位。正常瓣膜组织中胶原纤维与弹力纤维各占 5 5 %和1 3% ,且伴丰富的粘多糖和糖蛋白。当戊二醛交联后 ,丢失大量的可溶蛋白 ,使胶原的碱性磷酸酶为Ca2 + 结合提供条件 ,当细胞外高Ca2 + (1 0 -3 mol/L)跨膜入细胞内 (1 0 -7mol/L) ,而失...  (本文共2页) 阅读全文>>

《华西医学》1999年03期
华西医学

生物瓣钙化机理和抗钙化途径研究进展

自从以戊二醛(Glutaraldehyde,GA)交联的异种生物瓣(BioprostheticHeartValves,BHV),主要是牛心包瓣和猪主动脉瓣于1968年问世以来,由于其优异的血流动力学性质和无需终生抗凝,曾为临床所广泛应用〔1,2〕。但是因为其耐久性较差,极大程度地限制了它的临床使用。因此有必要研制耐久性较好的理想生物瓣。导致异种生物瓣失功的原因主要有以下方面:(1)瓣膜的钙化;(2)瓣膜的疲劳衰败;(3)感染性心内膜炎造成的瓣膜损害。其中,前两者是最常见的原因。瓣膜的钙化和疲劳衰败是既独立存在而又相互影响的两个病理过程〔3〕。本文就生物瓣钙化机理及预防和减缓钙化途径进行讨论。1 生物瓣钙化机理生物瓣的钙化是指正常的瓣膜结构被磷酸钙或其它钙盐所占据替代的病理过程。病理研究表明〔4〕:钙化结节最早出现在瓣膜的纤维细胞,稍晚胶原纤维也出现类似结节。钙化结节的不断发展,最终导致了瓣膜结构的破坏,血流动力学性能下降,在薄弱...  (本文共3页) 阅读全文>>