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三氧化二砷诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡分子机制的研究

目的:研究三氧化二砷(As_2O_3)对骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用,初步探讨该作用的分子机制。方法:培养细胞用As_2O_3处理后,MTT法检测细胞的增殖变化、TUNEL法检测细胞内DNA的裂解情况、琼脂糖凝胶电泳观察DNA断裂的梯形条形、透射电镜检测细胞形态学的变化及凋亡小体的形成、并用流式细胞仪进一步确证As_2O_3诱导MG-63细胞凋亡作用。同时采用SABC法检测处理前后bc1-2基因表达的变化,高通量的基因芯片检测技术筛选处理前后凋亡相关基因表达变化。结果:As_2O_3可有效地抑制MG-63细胞增殖,随着药物浓度增高其抑制作用增强,且细胞出现典型的凋亡变化。TUNEL法呈阳性结果。DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡特征性梯形条形。透射电镜下可见细胞核仁消失、碎裂,胞内空泡增多,染色质浓缩聚集。流式细胞仪检测出现典型的凋亡峰,并使细胞周期中的G_0-G_1期延长,但bc1-2基因表达未见明显变化。基因芯片检测结果显示  (本文共65页) 本文目录 | 阅读全文>>

《湖南医科大学学报》2002年02期
湖南医科大学学报

三氧化二砷诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡的实验研究

三氧化二砷 (arsenictrioxide ,As2 O3 )对急性早幼粒白血病 (APL)具有良好疗效 ,并认为As2 O3 抗APL的机制是通过下调bcl 2基因而诱导细胞凋亡[1~ 5] ,该药以疗效佳 ,副作用少 ,日益受到医学界的重视。As2 O3 不仅对白血病有效 ,而且对其它肿瘤如小鼠肝癌和S180实体肿瘤有效[6] ,从而开辟了一条治疗恶性肿瘤的新途径。目前 ,As2 O3 用于实体瘤治疗至今未见报道 ,体外应用于实体肿瘤细胞研究的文章亦少见。本研究用As2 O3 作用于骨肉瘤MG 6 3细胞株 ,观察其对MG 6 3细胞生长抑制作用 ,探讨作用机制 ,为As2 O3 应用于骨肉瘤治疗提供实验依据。1 材料与方法1 1 材料 人骨肉瘤株MG 6 3由中南大学湘雅二医院内分泌研究所廖二元教授惠赠。三氧化二砷(As2 O3 SIGMA公司产品 )以磷酸缓冲液 (PBS)制成10mmol·L 1的储存液备用 :RPM...  (本文共3页) 阅读全文>>

昆明医学院
昆明医学院

三氧化二砷单药以及联合阿霉素、顺铂对骨肉瘤细胞株MG-63增殖抑制作用的研究

【目的】:比较三氧化二砷和阿霉素、顺铂在体外对肿瘤细胞的抑制作用;探讨三氧化二砷联合阿霉素、顺铂对骨肉瘤细胞株MG—63增值的抑制作用,寻找可能存在的最佳配伍,为下一步的实验和临床药物治疗提供依据。【方法】:本研究采用的实验分单一用药实验和联合用药实验两部分,采用的是改良的甲基偶氮唑盐(简称改良MIT)法。单一用药实验测定不同浓度的三氧化二砷(As203)、阿霉素(AMD)、顺铂(DDP)分别在24h、48h、72h对MG—63细胞的生长抑制作用,得出结果后计算抑制率并求得半数致死浓度IC50,同时为第二阶段的实验提供数据;联合用药实验通过第一阶段的实验所得数据选择抑制率在10%~30%的阿霉素、顺铂的作用浓度作为联合用药浓度,加入不同浓度的三氧化二砷,再通过改良的MIT法测定24h、48h、72h的抑制率并与阿霉素和顺铂对比,计算IC50,应用统计学方法进行分析。【结果】:第一部分的单药实验结果显示三氧化二砷、阿霉素和顺铂对骨...  (本文共58页) 本文目录 | 阅读全文>>

山西医科大学
山西医科大学

顺铂联合环靶明对骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究顺铂(cisplatin)联合Hedgehog通路特异性阻断药物环靶明(cyclopamine)对人骨肉瘤MG-63细胞系增殖和凋亡的影响。方法:骨肉瘤MG-63细胞株在超净工作台中进行细胞传代,细胞培养箱中常规培养。实验分组:空白组(骨肉瘤MG-63细胞,含10%胎牛血清的DMEM培养液),对照组(骨肉瘤MG-63细胞,含10%胎牛血清的DMEM培养液,等体积的无水乙醇),环靶明组(骨肉瘤MG-63细胞,含10%胎牛血清的DMEM培养液,2.5/5/10/20μmol/L环靶明),顺铂联合环靶明组(骨肉瘤MG-63细胞,含10%胎牛血清的DMEM培养液,10μmol/L环靶明,2/4/8μmol/L顺铂)。MTT法检测药物对骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡,q RT-PCR检测环靶明处理前后骨肉瘤MG-63细胞中Gli1、PTCH1 m RNA的表达量的变化。结果:(1)MTT法检测不同浓度...  (本文共37页) 本文目录 | 阅读全文>>

《肿瘤》2013年06期
肿瘤

组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合吉西他滨对骨肉瘤MG-63细胞抑制作用的研究

骨肉瘤是一种严重影响青少年健康的恶性肿瘤,具有恶性程度高、转移较早的特点,10年生存率低。组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂是当今肿瘤治疗的研究热点之一,是癌症研究的一个新兴领域,研究涉及表观遗传的畸变和恶性转化。表观遗传学治疗,如去乙酰化组蛋白和改变基因的转录等对癌症的发展起到了重要作用。组蛋白修饰在肿瘤的发生和发展中发挥重要作用[1]。这些组蛋白的乙酰化,改变了组蛋白乙酰转移酶和HDAC之间的动态平衡的核心组蛋白的乙酰酶的水平[2]。已经证明,HDAC抑制剂可抑制肿瘤发生和转移[3]。2006年伏立诺他已经通过临床试验被批准用于治疗皮肤T细胞淋巴瘤[4]。HDAC抑制剂与其他抗癌药物联合可以增强抑制肿瘤细胞及诱导细胞凋亡的作用。因此,本研究旨在对MGCD0103联合吉西他滨体外作用于人骨肉瘤MG-63细胞,对细胞增殖和凋亡以及血管生成的影响进行研究,并对其可能的作用机制进行初步探讨。1...  (本文共6页) 阅读全文>>

权威出处: 《肿瘤》2013年06期
新疆医科大学
新疆医科大学

补骨脂素对人成骨肉瘤MG-63细胞的干预研究

目的:研究补骨脂素对人骨肉瘤细胞株MG-63的增殖和凋亡的影响,并探讨其可能发生的机制。方法:分别以1280μmol/l ,640μmol/l,320μmol/l,160μmol/l,80μmol/l的补骨脂素与人骨肉瘤细胞MG-63共同培养24h,48h,72h,倒置相差显微镜下观察细胞的形态变化;采用MTT法检测补骨脂素对细胞MG-63增殖的影响;Hoechst33258细胞荧光染色法观察细胞凋亡的形态变化;流式细胞仪分析640μmol/l~160μmol/l浓度加药组及对照组72h后MG-63细胞凋亡发生率;Western-Bloting检测survivin表达变化情况。结果:不同浓度的补骨脂素随时间增加作用于MG-63细胞后,倒置相差显微镜下见死细胞逐渐增多,活细胞逐渐变少,细胞分布稀疏,细胞内碎片增多;MTT法检测补骨脂素在72h抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制率分别为(84.07±3.7)%、(77.74±3.3...  (本文共54页) 本文目录 | 阅读全文>>