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雌二醇诱导人成骨样MG-63细胞差异表达基因的分离和鉴定

目的 筛查17β雌二醇(E_2)诱导人成骨肉瘤MG-63细胞株差异表达cDNA片段,寻找MG-63细胞中雌激素相关基因,探讨雌激素在绝经后骨质疏松症的发病中可能的保护作用和雌激素替代治疗绝经后骨质疏松症的作用机制。方法 用改良的cDNA代表性差异分析法同时对雌激素干预组和对照组MG-63细胞来源的cDNA进行正向和反向消减杂交、动力性富集、选择性PCR扩增,分别得到E_2干预MG-63细胞株表达上调和下调的cDNA片段。差异表达的cDNA片段经纯化回收后制备混合探针行Southern杂交分析和快速Northern杂交分析证实其来源后,克隆到pGEM-T easy载体,转化JM109感受态细菌并铺Amp~+/X-gal/IPTG皿得到差异表达的细菌文库,经蓝白筛选后挑取单菌落培养。培养的白色阳性克隆经PCR扩增鉴定后点成4张完全一样的尼龙阵列膜,分别与未消减的“检测”、“驱赶”扩增子及双向消减后的第四轮差异产物行斑点杂交,显影  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

《河北医科大学学报》2013年01期
河北医科大学学报

紫杉醇脂质体诱导骨肉瘤细胞MG-63凋亡及其机制的研究

骨肉瘤是恶性程度很高的骨肿瘤,多发于青少年。由于该疾病对常规放疗、化疗均不敏感,治疗结果往往并不理想,多数患者最终死于肿瘤的复发和转移。因此,骨肉瘤一直是骨科领域的一个难题。辅助化疗技术的临床普及推广,使骨肉瘤的5年生存率由20%左右提高到60%,寻找新的对骨肉瘤有效的化疗措施和治疗策略有着十分重要的临床意河北医科大学学报第34卷第l期义。紫杉醇(Pachtaxel)是一种抗癌机制独特的最热点的新型抗肿瘤药物,其能促进小管蛋白聚合为微管,这类微管不同于一般微管在有丝分裂后能解聚重新生成小管蛋白,而是一种对热和钙稳定的微管,不会发生正常的生理性解聚,从而防止细胞进一步有丝分裂,导致肿瘤细胞的凋亡。紫杉醇由于独特的疗效是目前临床化疗药物的一线用药,主要障碍是不溶于乙醇、水,只有在聚氧乙烯基蓖麻油中溶解,因此不良反应较多川。紫杉醇脂质体(力扑素)是用卵磷脂等将紫杉醇进行包裹,去除了原来的溶媒。文献[’]报道紫杉醇脂质体与紫杉醇注射液有...  (本文共5页) 阅读全文>>

《肿瘤》2013年06期
肿瘤

组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合吉西他滨对骨肉瘤MG-63细胞抑制作用的研究

骨肉瘤是一种严重影响青少年健康的恶性肿瘤,具有恶性程度高、转移较早的特点,10年生存率低。组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂是当今肿瘤治疗的研究热点之一,是癌症研究的一个新兴领域,研究涉及表观遗传的畸变和恶性转化。表观遗传学治疗,如去乙酰化组蛋白和改变基因的转录等对癌症的发展起到了重要作用。组蛋白修饰在肿瘤的发生和发展中发挥重要作用[1]。这些组蛋白的乙酰化,改变了组蛋白乙酰转移酶和HDAC之间的动态平衡的核心组蛋白的乙酰酶的水平[2]。已经证明,HDAC抑制剂可抑制肿瘤发生和转移[3]。2006年伏立诺他已经通过临床试验被批准用于治疗皮肤T细胞淋巴瘤[4]。HDAC抑制剂与其他抗癌药物联合可以增强抑制肿瘤细胞及诱导细胞凋亡的作用。因此,本研究旨在对MGCD0103联合吉西他滨体外作用于人骨肉瘤MG-63细胞,对细胞增殖和凋亡以及血管生成的影响进行研究,并对其可能的作用机制进行初步探讨。1...  (本文共6页) 阅读全文>>

权威出处: 《肿瘤》2013年06期
郑州大学
郑州大学

Mg-xLi-Zn合金对肿瘤MG-63细胞抑制作用研究

可降解镁合金作为医用骨植入材料具有十足的优势和巨大的潜在发展空间。镁锂基合金作为超轻量合金在一定条件下表现出良好的合金植入物所需性能,且镁、锂元素均对肿瘤细胞有抑制作用。因此,可将镁锂合金应用于骨植入材料使之在起支撑作用的同时达到抑制肿瘤细胞的效果。本课题选择常用的Mg-xLi-Zn系列合金(x=3wt.%,6wt.%,9wt.%),研究不同元素及含量对合金组织和性能的影响,并对合金的生物安全功能性进行评价。本文通过OM、SEM、XRD等手段对合金的显微组织和相组成进行测试分析,研究元素含量对合金组织及物相组成的影响;通过电化学实验、浸泡实验等,采用SEM&EDS、XPS、pH检测、离子浓度测定等手段,研究Mg-xLi-Zn合金分别在模拟体液和适合细胞生长的α-MEM完全培养基中的降解行为;通过细胞培养(人骨肉瘤MG-63细胞、成骨MC3T3细胞),利用MTT法、荧光染色法研究合金对两种细胞的细胞毒性和细胞增殖的影响,并通过AL...  (本文共91页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国医学创新》2016年03期
中国医学创新

不同浓度、作用时间白花蛇舌草注射液对MG-63细胞凋亡效果

在青少年中,骨肉瘤属于较为常见的恶性骨肿培养瓶,加入10%(体积分数)胎牛血清的DMEM瘤,在恶性肿瘤中约占20%,传统治疗方法主要包培养基5 mL,置于5%CO2、37℃细胞培养箱中培养,括新辅助化疗、肿瘤切除或辅以化疗[1]。患有骨肉每2天传代1次,取对数生长期的细胞用于实验。瘤患者,其5年生存率可达70%~80%,但骨肉瘤1.4.2 MTT法检测 取对数生长期的细胞,并用仍属于致残率、病死率较高的一种恶性肿瘤,对人0.25%胰酶消化,消化后加入培养基(DMEM)5 m L们的生命健康造成严重的威胁[2]。采用中药辅助治并吹打成混悬液,计数后调整细胞浓度,取疗法,具有前景好、价格低廉、不良反应少,药理150μL(5×103个)接种于96孔板。采用一定浓作用广泛等优点。而中药白花蛇舌草是一种茜草科度的乙醇提取白花蛇舌草有效成分,将其配制成浓耳草属植物,中医学认为,白花蛇舌草具有清热解度为50、100、200、400μL/m L...  (本文共4页) 阅读全文>>

《食品与药品》2013年01期
食品与药品

冬凌草甲素对MG-63转移的抑制效应和分子机制研究

骨肉瘤(osteosarcoma)作为一种好发于青少年的高度恶性骨肿瘤,易出现早期转移,死亡率高。骨肉瘤预后差的主要原因是该肿瘤易出现肺部转移,大多数截肢患者在术后2~3年死于肿瘤肺转移。临床研究认为80%患者就诊时已有微小癌灶的全身血液转移,控制骨肉瘤肺转移是提高五年生存率的关键,因此药物抑制骨肉瘤肿瘤细胞转移的研究具有较大的临床意义[1]。冬凌草甲素的抗肿瘤作用,特别是抑制多种肿瘤细胞增殖的作用已由诸多实验证实,其抑制骨肉瘤转移作用的实验研究和临床资料基本处于空白领域。本研究从冬凌草甲素对体外骨肉瘤细胞趋化运动能力的影响,以及对骨肉瘤细胞基质、血管生成能力的影响等方面探讨其抑制骨肉瘤转移的潜能。1材料和方法1.1材料人骨肉瘤细胞株MG-63细胞(中南大学湘雅二医院内分泌研究所)。冬凌草甲素(中国科学院昆明植物研究所),逆转录试剂盒和DNA分子量标准(Promega公司)。人血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶(MMP...  (本文共4页) 阅读全文>>