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2型糖尿病患者胰岛素受体底物-1(IRS-1)基因5'-侧翼调控序列多态性与功能的研究

为了确定IRS-1基因5′-调控区可能存在的多态性,本文采用PCR-SSCP技术和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染分析,对76例2型糖尿病患者和78例正常对照IRS-1基因5′-UTR调控区-898bp~+5bp之间的序列,进行多态性扫描分析。以检获的正常和变异样品基因组DNA为摸板,以5′-TCTCCACCCGCCGAGATGGGCCCGGATG-3′和CGCGCTCTAGAAGTCCCAACGTTGCACGGGGTTCTCCCTC为上、下游引物(下划线者为XbaⅠ酶切位点),用高保真pfu DNA polymerase进行扩增。目的片段经PAGE纯化回收后,用XbaⅠ酶消化,然后采用亚克隆技术,在T4 DNA连接酶的作用下,将扩增片段分别定向插入至SmaⅠ/NheI双酶消化的pGL2-promoter报告基因载体,并转化至大肠杆菌DH5α。随机挑选单菌落小规模培养,碱裂解法提取质粒DNA,PstⅠ/BglⅡ双酶切后行变性聚丙烯酰  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

河北医科大学
河北医科大学

IRS-1对骨髓间充质干细胞成脂分化的影响

目的:随着人口老龄化的发展,骨质疏松症的发病率逐年提高,给患者个人、家庭、乃至社会都带来了严重的负担。骨质疏松症的发生与骨重建机制失衡有关,骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的定向分化在骨重建中扮演着重要的角色。转录共活化因子(Transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)在维持骨髓间充质干细胞成脂-成骨分化平衡中具有重要作用。近年研究发现胰岛素受体底物-1(insulinreceptorsubstrate-1,IRS-1)可影响骨髓间充质干细胞的成脂分化,但其具体机制仍不清晰。本课题通过质粒转染技术、实时反转录定量PCR技术(reverse transcription quantitative PCR,RT-qPCR),沉默IRS1基因后测定BMSCs成脂分化过程中PPARγ与TAZ表达,探讨IRS...  (本文共55页) 本文目录 | 阅读全文>>

《上海中医药大学学报》2009年04期
上海中医药大学学报

复方黄连降糖片对2型糖尿病大鼠IRS-1基因表达的影响

随着人们生活方式的改变,体力活动的减少,人口老龄化的加重,高血压等慢性病的增多,2型糖尿病的患病率迅速增长。近年来研究发现,胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)-1在胰岛素信号传导和2型糖尿病的形成过程中起到了非常关键的作用。复方黄连降糖片是由黄连、大黄、肉桂组成,在临床上有较好的降血糖作用。在以往的系列研究中发现[1-3],该复方具有明确的降糖作用;近期的资料提示这可能与其改善胰岛素的信号传导有关。本实验主要从其对2型糖尿病模型大鼠外周靶组织IRS-1的影响,研究其降糖和治疗2型糖尿病的可能作用机制。1材料与方法1.1动物选用10周龄左右的清洁级健康雌性Wistar大鼠90只,体重(250±20)g。由复旦大学医学院实验动物中心提供,动物合格证号SCXK(沪):2003-0003。1.2药品及其配制链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)购自美国Sigma公司,临用前以0.1...  (本文共4页) 阅读全文>>

《河北医药》2019年14期
河北医药

骨组织中IRS-1水平与2型糖尿病性骨质疏松症的关系

随着社会经济发展和人均寿命延长,2型糖尿病患病率不断升高。骨质疏松是2型糖尿病常见的骨组织并发症,被称为2型糖尿病性骨质疏松症[1]。2型糖尿病性骨质疏松症患者极易发生骨折,严重影响患者的身体健康和生活质量。研究表明,胰岛素信号通路和雌激素同骨质疏松密切相关[2]。女性绝经后骨量丢失更为明显,如何防治绝经后2型糖尿病患者骨量丢失是目前骨代谢研究的热点之一[2]。本研究将以2型糖尿病大鼠为研究对象,给予双侧卵巢手术模拟2型糖尿病合并雌激素缺失生理状态。胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)是胰岛素信号通路的调节因子。本为旨在探讨探讨骨骼组织中的IRS-1在2型糖尿病性骨质疏松发生发展过程中的作用。1材料与方法1. 1实验动物本研究选用20只清洁级健康雌性Wistar大鼠(体重200 g左右,3月龄),由河北省实验动物中心提供(合格证号:905105)并饲养于清洁级动物房。饲养条件...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国药师》2016年12期
中国药师

棕榈酸通过抑制IRS-1表达诱导大鼠骨骼肌细胞胰岛素抵抗

胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)是指胰岛素作用的靶组织对外源性或者内源性胰岛素敏感性和反应性降低,导致生理浓度的胰岛素效应低于正常水平。机体代偿性过多分泌胰岛素,进一步诱发高胰岛素血症。长期的胰岛素抵抗会诱发一系列代谢性疾病,如肥胖、糖调节损伤、2型糖尿病、脂肪肝、高血压、冠心病等[1]。肝脏、脂肪和肌肉组织是胰岛素作用的三个主要靶器官,其中骨骼肌葡萄糖摄取占胰岛素刺激后全身葡萄糖摄取的80%,也是胰岛素抵抗主要发生的靶器官[2]。建立胰岛素抵抗细胞模型有助于深入研究胰岛素抵抗发生机制,以及筛选抗胰岛素抵抗药物,目前已成熟应用的细胞模型中,最常见的是游离脂肪酸诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型[3]、高胰岛素诱导Hep G2肝癌细胞胰岛素抵抗模型[4]以及棕榈酸诱导C2C12骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型[5],而大鼠骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型较为少见。目前国内仅有少量篇幅报道,如穆颖等[6]报道建立原代培养...  (本文共5页) 阅读全文>>

《畜牧兽医学报》2012年08期
畜牧兽医学报

秦川牛IRS-1基因多态性与体尺和肉质性状的相关性

秦川牛是我国优良的黄牛品种,具有肉役性能突出、遗传稳定、适应性强以及肉质细嫩、味道鲜美、大理石花纹明显等优良特性,有“国之瑰宝”的美誉。但由于其长期作为一个肉役兼用型品种进行选育,其生长发育较慢,后躯肌肉欠充实,牛肉产量低、优质高档牛肉产量更低的缺陷尚未完全克服。且秦川牛中有5%~10%左右的个体具有不亚于国外专门化肉牛品种的肉用体型特点,因此,对秦川牛生长性状进行选育,长期坚持本品种选育的育种方针,使其高产与优质相统一,仍将是今后的工作重点[1-3]。近年来,随着分子育种技术的发展,育种工作者已开始使用标记辅助选择(Marker assisted selection,MAS)对部分经济性状进行早期选择以提高育种效率[4]。胰岛素受体底物(Insulin receptor substrate,IRS)是一种信号传导蛋白,广泛分布于胰岛素敏感组织内[5],IRS-1蛋白主要在骨骼肌和褐色脂肪组织中发挥作用,是IRS家族中唯一以骨骼...  (本文共10页) 阅读全文>>