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小鼠腭裂相关基因的克隆、筛选及功能的研究

腭裂是口腔也是全身较常见的先天性发育畸形,在亚洲、尤其是中国更是高发区。1996~2000年全国出生先天性畸形缺陷检测结果显示,先天性唇腭的发生率排在首位。对该畸形的治疗手段目前仅限于患者出生后的手术修补,术后仍然不能完全恢复患者语音功能,并影响以后牙齿萌出、排列和患者的心理健康。先天性腭裂属于多基因遗传性疾病,有许多基因协同作用参与疾病的发生。如能明确腭裂的发生机制,制定相应预防及早期诊断措施,将会有效预防腭裂畸形的发生。因此,有众多学者长期致力于腭裂畸形发生,机制的研究,试图揭示人类腭裂发生的秘密。本研究利用分子生物学的消减杂交技术,直接提取对照组和腭裂组小鼠发育形成期腭突组织中的mRNA,对两者之间差异表达的基因进行克隆和筛选,获得一系列与腭裂发生相关的基因,并初步探讨了相关基因的染色体定位、结构及作用。研究主要分为以下3部分内容一.RA诱导的MSX-1基因在腭突间充质细胞中表达变化的研究取妊娠12天CS7BL/6N系孕鼠  (本文共98页) 本文目录 | 阅读全文>>

第四军医大学
第四军医大学

颌突外胚间充质干细胞的可塑性研究

外胚间充质是脊椎动物一个独特的结构,它包含了迁移来的颅神经嵴细胞及其衍生物。颅神经嵴细胞被认为具有最高的分化潜能,它可以分化成为神经和间充质两个胚层的组织,是一种具有多向分化潜能的干细胞。多年来通过对鸟类和哺乳动物体内、体外以及细胞水平的研究,对颅颌面部的发育和形成的神经嵴-外胚间充质的模式已经有了深入的了解。在发育过程中,颅神经嵴细胞经历了三个主要步骤:从神经外胚层迁移至咽弓;在外胚间充质中增殖;最后分化成为颅颌面部的大部分组织。迁移的神经嵴细胞与周围组织的细胞相互作用,经历了一个从上皮到间充质表型的转化过程。以前研究认为神经嵴细胞的分化逐渐受到限制。然而1990年Baroffio等发现大约有2.6%的迁移的颅神经嵴细胞可以分化成神经和间充质两个胚层的许多衍生组织,提示迁移的细胞中包含具有多分化潜能性的颅神经嵴干细胞。目前还不清楚未分化的神经嵴干细胞迁移至外胚间充质后是否还存在,但是神经嵴是一个暂时性结构,而颅颌面部的大部分组...  (本文共122页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川大学
四川大学

第一鳃弓外胚间充质细胞牙向分化差异基因的初步筛选

最新的发育生物学研究证实,在颅神经嵴细胞分化形成牙颌骨器官的过程中,先后经历了颅神经嵴→第一鳃弓外胚间充质→牙颌骨外胚间充质两次关键性级联分化。本研究旨在建立Balb/c胎小鼠第一鳃弓外胚间充质细胞体外培养模型,在此基础上,进行多向诱导分化研究,鉴定其干细胞生物学特性。同时,构建第一鳃弓外胚间充质细胞牙向分化双向抑制消减文库,初步筛选、验证、分析差异表达基因,为全面揭示牙发生、发育的分子调控机制提供理论依据。首先,精确解剖分离孕9.5天(E9.5)Balb/c胎鼠第一鳃弓,采用组织块法和改良酶消化法对其进行原代培养,利用反复贴壁和多次差异消化法对其进行纯化,通过细胞形态观察、细胞生长曲线描记、计算细胞倍增时间和特异性标记物检测对其细胞生物学特性进行研究。其次,利用端粒酶原位杂交荧光探针和Brdu摄取实验,检测第一鳃弓外胚间充质细胞的增殖和自我更新能力;取第3代细胞,更换不同的条件培养液,观察其在成脂、成内皮和矿化诱导液的刺激下,...  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

人胎盘源间充质样干细胞生物学特性及移植治疗脑出血的实验研究

目的:间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有自我更新和多向分化潜能的组织干细胞,其主要来源骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)被认为具有潜在的细胞治疗价值,但在严重感染、骨髓肿瘤或随着年龄的增长骨髓细胞数及增殖、分化能力均明显下降的情况下,就无法满足临床需求,寻找丰富的、可储备的MSCs的新来源很有必要。本研究拟从人胎盘组织中分离培养获得人胎盘源间充质样干细胞(human placenta derived mesenchymal-like stem cells,HPMSCs),研究其生物学特性,以及移植治疗脑出血的可行性,并对治疗机制进行初步探讨。方法:(1)将胎盘组织经酶消化和贴壁培养获得的细胞,用免疫荧光标记、流式细胞仪检测和免疫细胞化学的方法分析表型;将其与T淋巴细胞共培养,通过3H-TdR掺入,β液闪计数,分析其免疫源性...  (本文共120页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国协和医科大学
中国协和医科大学

人肾小管上皮—间充质细胞转化过程中VEGF及其受体表达变化的实验研究

夕名中国偏矛,臂料天李中国奇檬封管托博士研究生学位论文中国协和医科大学研究生院中国协和医科大学博士研究生论文论文题目:八肾小管上皮洞充质细腹转化过程中VEGF及其受体襄达夹  (本文共90页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川大学
四川大学

胞膜窖/窖蛋白在小鼠牙发育过程中作用的初步研究

二十世纪九十年代以来,随着细胞生物学、分子生物学、免疫学以及遗传学等基础学科的迅猛发展以及干细胞和组织工程技术在现代医学基础研究和临床中的应用,再生医学已初步显示出良好的发展前景,使得牙齿再生逐步成为可能,这引起了越来越多的学者对这一领域的关注。目前牙再生研究中的热点主要集中在牙发育的分子网络调控上。细胞信号转导是胞膜窖/窖蛋白(caveolae/caveolin-1)最重要的生理功能之一。caveolae是细胞信号转导的平台,使各信号通路的串话成为可能,caveolin-1处于该平台中各个信号通路的中心位置。发育生物学研究证实,在颅神经嵴细胞分化形成牙颌骨器官的过程中,先后经历了颅神经嵴到第一鳃弓外胚间充质再到牙颌骨外胚间充质两次关键性级联分化。本课题旨在建立小鼠第一鳃弓外胚间充质细胞及下颌第一磨牙牙胚间充质细胞体外培养模型,在此基础上,进行诱导分化研究,鉴定其细胞生物学特性。同时,采用分子生物学等技术手段,为揭示caveol...  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>