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人类新基因MAGE-H1/Apr-1与APMCF1结构与功能的的初步研究

随着人类基因组计划的顺利完成,解读基因编码并研究相关基因的功能正成为各国科学家主要的研究方向。目前,在基因功能的研究方面主要包括:基因生物信息学分析、基因表达图谱建立、酵母双杂交系统的应用、基因转染技术、转基因动物和基因剔除技术以及新近发展的RNA干涉技术等。MAGE-H1/Apr-1与APMCF1分别是在凋亡的人白血病细胞系HL-60和人乳腺癌细胞系MCF-7中发现的人类未知功能基因,在本研究工作中,我们克隆了这两个基因并对其结构与功能进行了初步的研究和分析。一.MAGE-H1/Apr-1结构与功能的初步研究提取了维甲酸诱导凋亡后的HL-60细胞的总RNA,根据MAGE-H1/Apr-1的cDNA序列设计引物,运用RT-PCR技术扩增出MAGE-H1/Apr-1的开放读框序列并测序。随后,利用生物信息学方法分析了MAGE-H1/Apr-1的蛋白质序列的保守结构域,发现它共有两个MAGE家族结构域,与MAGE家族的A1、B1、C  (本文共103页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物技术》2017年04期
生物技术

莲藕Na~+/H~+逆向转运蛋白基因-LrNHX的克隆及表达分析

莲藕属于睡莲科莲属多年生水生草本植物,在我国长江中下游以南地区广泛栽培,是一种特色的水生蔬菜,同时也是重要的水旱轮作作物[1-2]。近年来,我国东南沿海地区沿海滩涂面积逐渐扩大,设施土壤连作障碍(盐渍化程度)逐年加重,提高莲藕耐盐特性尤为必要,对充分利用滩涂盐碱土地、扩大莲藕栽培范围具有重要的意义[3]。目前,生产上栽培类型莲藕对盐敏感,低浓度的盐能够影响植株正常发育,而耐盐资源存在于野生种或花莲类型中,所以研究莲藕耐盐机理对培育莲藕耐盐生产用种非常重要。目前国内外莲藕耐盐相关研究较少,克隆耐盐基因鲜有报道。本研究首次通过从耐盐莲藕资源中分离到一个Lr NHX,在此基础上对其表达进行了分析,为进一步验证其功能,提高莲藕耐盐性奠定基础。Na+/H+反向转运蛋白位于细胞膜上,通过维持细胞内外渗透压,把Na+富集于液泡中(主要与液泡中H+移位酶、H+-ATPase和H+-PPiase相互作用,在细胞内产生电化学势,Na+通过主动运输方...  (本文共5页) 阅读全文>>

《基因组学与应用生物学》2017年08期
基因组学与应用生物学

油橄榄转录组数据库中HMGR基因的挖掘及生物信息学分析

*通讯作者,hqming@sicau.edu.cnMining and Bioinformatic Analysis of HMGR Gene from Olea europaeaTranscriptome DatabaseWang Haojun Pu Xiang Mei Kangkang Zhu Qingping Xie Qinding Chen Huaping Huang Qianming*College of Science,Sichuan Agricultural Uniersity,Ya'an,625014*Corresponding author,hqming@sicau.edu.cn油橄榄(Olea europaea L.),又名洋橄榄,为木犀科(Oleaceae)木樨榄属(Olea)常绿乔木,是世界著名的木本油料兼果用树种,富含优质食用植物油-橄榄油,主要分布在地中海沿岸国家和美国加州地区。与其他油料植物相比,油...  (本文共14页) 阅读全文>>

《安徽农学通报(上半月刊)》2012年01期
安徽农学通报(上半月刊)

基因克隆研究方法综述

基因是细胞内DNA分子上具有遗传效应的特定核苷酸序列的总称,是具有遗传效应的DNA分子片段。基因控制蛋白质合成,是不同物种以及同一物种的不同个体表现出不同的性状的根本原因,即所谓“种瓜得瓜,种豆得豆”,“一母生九子,九子各不同”。基因通过DNA复制及细胞分裂把遗传信息传递给下一代,并通过控制蛋白质的合成使遗传信息得到表达。基因克隆技术包括了一系列技术,它大约建立于20世纪70年代初期。美国斯坦福大学的伯格(P.Berg)等人于1972年把一种猿猴病毒的DNA与λ噬菌体DNA用同一种限制性内切酶切割后,再用DNA连接酶把这2种DNA分子连接起来,于是产生了一种新的重组DNA分子[1],从此产生了基因克隆技术。1973年,科恩(S.Co-hen)等人把一段外源DNA片段与质粒DNA连接起来,构成了一个重组质粒,并将该重组质粒转入大肠杆菌,第一次完整地建立起了基因克隆体系[2]。因克隆程序可概括为:分、切、连、转、选。“分”是指分离制...  (本文共3页) 阅读全文>>

《传染病信息》2002年01期
传染病信息

抑制性消减杂交技术与基因克隆化

近年来,随着分子生物学技术的迅猛发展及人类基因组计划的实施,当今分子生物学的研究热点已转向利用新技术研究生物学、医学乃至动植物领域中基因的功能及调控作用,如个体的生长、发育和死亡等许多问题的产生与细胞间基因表达的关系研究,尤其是分离和鉴定与危害人类健康疾病(如恶性肿瘤、心脑血管疾病及一些原因不明的慢性疾病等)的发生、发展密切相关的基因,分离、鉴定这些差异表达的基因,可为揭示生命活动的规律、探索疾病发生机制及寻找诊断及治疗的靶基因提供强有力的依据。抑制性消减杂交(suppression subtractivehybridization,SSH)是新近发展的能高效快速克隆差异表达基因的新技术之一。 1 SSH技术的工作原理 目前已有多种分离差异表达基因的方法,如DDR下PCR、。DNA-RDA(代表性差异显示分析)、消减。DNA文库、cDNA消减杂交技术、SAGE法等,但都不同程度地存在操作繁琐、费时费力、对低丰度mRNA富集效率低...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国兽医学报》1990年10期
中国兽医学报

基因克隆的几种常用方法

基因(gene)是遗传物质的最基本单位,也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能,还是要改变某个基因的功能,都必须首先将所要研究的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。本文就基因克隆的几种常用方法介绍如下。1根据已知序列克隆基因对已知序列的基因克隆是基因克隆方法中最为简便的一种。获取基因序列多从文献中查取,即将别人报道的基因序列直接作为自己克隆的依据。现在国际上公开发行的杂志一般都不登载整个基因序列,而要求作者在投稿之前将文章中所涉及的基因序列在基因库中注册,拟发表的文章中仅提供该基因在基因库中的注册号(acces-sionnumber),以便别人参考和查询。目前,世界上主要的基因库有:(1)EMBL,为设在欧洲分子生物学实验室的基因库,其网上地址为htp://www.ebi.ac.uk/ebi-home.html;(2)Genbank,为设在美国国家卫生研究院(NIH)的基因库,其网上地址为ht...  (本文共4页) 阅读全文>>