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嗜线虫致病杆菌CB6菌株杀虫活性相关分子机制

致病杆菌属(Xenorhabdus)和光杆状菌属(Photorhabdus)细菌是一类与昆虫病原线虫共生的细菌,在20世纪90年代才确定其在肠杆菌科(Enterobacteriaceae)中的分类地位。1998年首次报道从发光光杆状菌(P.luminescens)W14菌株中分离到口服杀虫活性毒素蛋白基因,从此对该类细菌杀虫蛋白基因的研究成为本领域的热点。同时,共生细菌代谢物对害虫的杀虫和抑制生长活性也引起了新型微生物农药研究者的兴趣。为更好地开发昆虫病原线虫共生细菌这一新型杀虫微生物资源,有必要开展此类细菌杀虫活性相关分子机制的研究,国际上此类研究尽管活跃,也还处在起步阶段,国内尚未见有关此类细菌杀虫活性分子机制方面的研究报道。本研究在对30株共生细菌的杀虫活性进行生物测定的基础上,以研究组在北京郊区土样中分离到的小卷蛾斯氏线虫的共生细菌——嗜线虫致病杆菌(X.nematophila)CB6菌株为主要研究对象,利用PCR和AF  (本文共133页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业科学院
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嗜线虫致病杆菌北京变种CB6菌株杀虫蛋白的分离和纯化

嗜线虫致病杆菌北京变种(Xenorhabdus nematophila var.pekingensis)CB6菌株是从北京郊区土壤中分离的小卷蛾斯氏线虫(Steinernema carpocaposae)肠道内所分离到的共生细菌,已经鉴定并定名。研究表明该菌株具有良好的杀虫活性。为挖掘这一本土细菌资源,本研究将其与另9个昆虫病原线虫共生细菌菌株进行了杀虫活性比较,对10个不同来源的昆虫病原线虫共生菌菌株胞内和胞外产物进行分离,将各产物的可溶性蛋白提取,并分别进行生物测定,结果表明CB6菌株产杀虫蛋白性能好。在此基础上以CB6菌株作为研究材料,分离纯化其胞内和胞外的杀虫活性蛋白,建立一套纯化该活性蛋白的技术参数,并对杀虫蛋白的特性进行了初步鉴定。现将主要研究结果总结如下:1.测定的10个菌株发酵液均对棉铃虫和甜菜夜蛾幼虫有口服毒性,活性物质的产生部位在菌体胞内和胞外均有。不同菌种或同一菌种的发酵液、胞内或胞外产物和菌体碎片的杀虫活...  (本文共71页) 本文目录 | 阅读全文>>

河北农业大学
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嗜线虫致病杆菌杀虫蛋白的分离纯化及杀虫蛋白基因克隆

昆虫病原线虫共生菌属于肠杆菌科、革兰氏阴性菌,包含两个属—Xenorhabdus和Photorhabdus,分别与Steinernematidae和Heterorhabditidae科的昆虫病原线虫互惠共生。二者联合可以侵染并快速杀死多种昆虫。通常共生菌依靠线虫将其携带进入寄主昆虫体内并释放到昆虫体腔中,共生菌在昆虫血腔内大量繁殖并产生杀虫毒素,导致寄主昆虫迅速死亡(约48h之内)。同时共生菌产生的抗生素抑制杂菌生长,为线虫生长、发育和繁殖提供理想的环境和合适的营养。昆虫病原线虫—共生菌复合体对昆虫具有的强致病力,共生菌在其中起着关键性作用。已有的研究表明许多共生菌不仅能产生血腔毒素,同时还能产生杀虫谱广、杀虫活性高的胃毒素。因此分离筛选高毒力的共生菌菌株、对其杀虫毒素及其杀虫基因进行深入研究,有助于发掘新的杀虫蛋白及杀虫基因,有可能为改变当前害虫防治和转基因抗虫植物的培育中杀虫蛋白或杀虫基因匮乏的局面开辟一条新的途径。本研究利...  (本文共103页) 本文目录 | 阅读全文>>

辽宁大学
辽宁大学

有机大环CB6和羟化CB6的合成及其超分子结构研究

有机大环CB6 在最近几年以来成为在冠醚、杯芳烃、环糊精等化合物之后又一个新的超分子化学研究中的热点。有机大环CB6是通过甘脲与甲醛之间的缩合环化而形成的一类具有南瓜形状化合物的统称。因其具有高度极化的羰基端口,疏水性的环状空腔,刚性的外壁和高度对称的结构,有机大环CB6在新型超分子的构筑中具有良好的应用前景,在分子识别与组装、污水处理、分子催化、酶和药物缓释及载体中也有非常大的潜在的应用价值。本实验室多年研究CB6的超分子自组装应用,提出并采用了阴离子交换策略,成功构筑并报道了 CB6与含碘基的Cu(Ⅱ)配合物的超分子结构,研究了CB6外壁之间、CB6外壁与阴离子配合物之间的形状匹配分子识别相互作用,讨论了芳香碘基在超分子结构中的辅助支撑作用。本文在已取得的研究成果基础上,优化合成并分离了 CB6和具有较好溶解性的羟化CB6,并用HNMR,IR对其进行表征。利用有机大环CB6独特的结构产生的形状匹配相互作用,合成CB6-K模板...  (本文共64页) 本文目录 | 阅读全文>>

西南农业大学
西南农业大学

嗜线虫致病杆菌CB6菌株杀虫蛋白的活性及其分离纯化

昆虫病原线虫共生菌是寄生于昆虫病原线虫肠道内的一类细菌,与线虫互惠共生。该类细菌分致病杆菌属(Xenorhabdus)和光杆状菌属(Photorhabdus)两个属,属下共有6个种。共生菌对昆虫具有极强的致病力,大部分菌株具有血腔活性,LD_(50)仅为1—10个活细胞。国内外科研工作者已分离到了具有杀虫活性的脂多糖、蛋白质等化合物,并发现共生菌杀虫蛋白杀虫谱宽、杀虫活性强,是极具应用潜力的生物杀虫剂。昆虫病原线虫共生菌杀虫蛋白已成为国内外研究的热点。本研究选取了11个菌株为实验材料,通过对菌悬液的生物测定,筛选得到了一株高毒力的菌株,为采自北京郊区的嗜线虫致病杆菌(X.nematophila)CB6菌株。论文确定了本菌株具有杀虫活性的物质为蛋白质,测定了其生物活性,最后分离纯化得到杀虫蛋白纯品,现将主要研究结果总结如下:1. 比较了11个菌株菌悬液的杀虫活性。结果表明,不同菌株对棉铃虫初孵幼虫的活性不同,其中CB6、A54、...  (本文共55页) 本文目录 | 阅读全文>>

《微生物学杂志》2005年04期
微生物学杂志

嗜线虫致病杆菌CB6菌株培养特性的初步研究

嗜线虫致病杆菌(Xenorhabdus nematophila)CB6菌株是从小卷蛾斯氏线虫北京品系肠道内分离到的1株线虫共生菌,其代谢产物具有较强的杀虫[1~3]、抑菌[4,5]和抑制肿瘤细胞生长[6]的作用,特别在害虫防治方面已显现出较大的应用潜力,具有重要的研究、开发价值。由于共生菌来源于昆虫病原线虫肠道内,生存环境特殊,因此必须对其生长规律和营养利用规律进行研究,以便能更好地加以研究和应用。本文将对此菌的生长曲线、培养液中主要营养成分的消耗利用规律及杀虫效果作详细的研究。1材料与方法1.1材料1.1.1供试菌株嗜线虫致病杆菌CB6初生型菌株,由中国农科院生防所提供,在常温下石蜡油液封保存,用前在NBTA鉴别培养基上进行活化,以确保其为初生型。1.1.2供试昆虫生长一致的3龄小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫,由中国农业大学植保学院供种,室内菜苗饲养而得。1.1.3培养基①鉴别培养基(NBTA):营养琼脂...  (本文共3页) 阅读全文>>

《植物保护学报》2005年03期
植物保护学报

嗜线虫致病杆菌北京变种CB6菌株杀虫蛋白对棉铃虫幼虫的生物活性

1993年Ensign首次报道了昆虫病原线虫共生研究室从28株昆虫病原线里共王困甲帅恐扒“寸日”目前国内外已报道了菌胞外蛋白具有杀虫活性〔‘〕,!名个苗秩晌外蛋白的杀虫活性〔2一’;。CB6菌株是本高杀虫活性新菌株上6j北京变种Xenorhabdus经鉴定属于嗜线虫致病杆菌nelnat叩hila var.严人inse邢is[7},植物保护学报32卷其代谢物对害虫具有很强的拒食和抑制生长作用L‘:,并已从该菌株胞内分离出l000KD具有杀虫活性的复合蛋白〔’」。为了更好地将该菌株开发成植物保护剂及为杀虫蛋白分离、基因克隆等进一步研究奠定基础,作者就该菌株胞外蛋白对棉铃虫幼虫的生物活性进行了研究。1材料与方法1.1供试昆虫 棉铃虫Helicooe,a arm妙ra(H位bner)初孵幼虫由中国农业科学院植物保护研究所棉虫组提供,室内于光照恒温恒湿培养箱中人工饲料培养,培养条件为28℃、RH70%、L:D为16:8,挑选龄期一致的幼虫...  (本文共4页) 阅读全文>>