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表达H3亚型猪流感病毒HA基因的重组伪狂犬病毒的构建及猪流感病毒和伪狂犬病毒特异性鉴别诊断方法的建立

伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)归属于α疱疹病毒亚科,主要引起猪的伪狂犬病(PR),该病以仔猪的神经学症状和妊娠母猪的生殖障碍为主要特征。目前世界上包括我国在内广泛使用的预防此病的疫苗均带有gE基因缺失的表型特征。猪流感(SI)是由A型流感病毒引起的猪的呼吸道疾病或疾病综合征,临床以仔猪的严重呼吸道疾病、妊娠母猪的流产和部分成年猪的死亡为主要特征。此外,猪是禽和人流感病毒均可感染的唯一动物,是不同来源流感病毒发生重组,产生新的流感毒株的中间宿主。因此,通过免疫接种预防猪流感对食品安全和公共卫生具有重要意义。本试验的目的是以gE基因缺失的PRV为载体构建可以表达SIV HA基因的重组病毒疫苗用于预防这两种病,同时,基于此重组病毒的特点,建立可以区分此重组病毒疫苗和PRV及SIV自然感染的鉴别诊断方法。本研究首先对SIV A/Swine/Inner mogolian/547/2001(H3N2)毒株(简写  (本文共96页) 本文目录 | 阅读全文>>

《西北农业学报》2009年03期
西北农业学报

H3亚型猪流感病毒HA基因核酸探针的制备与应用

猪流感(Swineinfluenza,SI)是由猪流感病毒(SIV)引起的一种急性高度接触传染性的群发性猪呼吸道疾病,临床以突发、高热、咳嗽、呼吸困难、衰竭、高发病率、低死亡率为特征[1-2]。猪流感病毒属于正黏病毒科流感病毒属的A型病毒,其基因组包含了8个单股负链的RNA。目前已发现的SIV至少有H1N1、H1N2、H1N7、H3N2、H3N6、H4N6、H9N27种不同血清亚型,广泛流行于猪群中的主要有古典型猪H1N1、类禽型H1N1和类人型H3N2毒株[3]。目前SI的诊断方法主要有病毒分离培养和血清学诊断。随着猪流感血清型的增多、新的变异株不断出现,传统诊断方法在实际中的应用必然会受到一定的限制。RT-PCR检测方法是近几年发展起来的一种现代分子生物学基因诊断技术,具有特异、敏感、简便、快捷等特点,能在数小时内检出痕量病原,目前已经大量用于流感等病毒的检测工作中[4-7]。在此基础上发展起来的核酸探针技术,以其特异、快速...  (本文共5页) 阅读全文>>

《动物医学进展》2007年07期
动物医学进展

猪流感病毒HA基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立

猪流感(SI)是由猪流感病毒(Swine influenzavirus,SIV)引起的一种以咳嗽、呼吸困难、衰竭、迅速康复或死亡为特征的急性、高度接触性传染病。猪只不分年龄、性别和品种均能感染,发病率高而病死率低,是规模化养猪场存在且必须根除的群发性疾病之一。李海燕等指出猪流感突出的流行特点是常常以亚临床形式存在,并常激发其他呼吸道病原继发或混合感染,使猪群死亡率增加,难以控制。猪流感的发生已有近百年的历史,世界各地均有该病的发生的相关报道。目前的研究发现,猪群中广泛流行的主要有猪H1N1、类禽H1N1和类人H3N2亚型毒株[1-2]。猪流感在公共卫生学上具有重要意义,历史上每次人流感的大流行都与猪流感密切相关。李海燕等鉴于猪在“禽-猪-人”传播链中的中间宿主和多重宿主的作用,对我国猪群中猪流感的存在情况和潜在的公共卫生意义进行了探讨,我国目前对猪流感的研究还不能满足规模化养猪场对猪流感防控的需要。2006年6月中上旬至8月间,...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国畜牧兽医》2014年07期
中国畜牧兽医

核酸免疫制备抗猪流感病毒HA单克隆抗体

猪流感是由正黏病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的一种急性、高度接触传染的呼吸道疾病。流行于世界猪群中的猪流感病毒主要为H1N1、H3N2及H1N2亚型。猪流感病毒能在猪上呼吸道上皮细胞内复制,造成猪感染,给养猪业带来极大经济损失。细胞内抗体或细胞内免疫技术(intracellu-lar immunization)是指抗体在细胞内表达并被定位于亚细胞区室(如胞核、胞浆或某些细胞器),与特定的靶分子作用(干扰或阻断靶分子的加工、分泌或功能)从而发挥其生物学功能的一类新的工程抗体。主要应用在抑制病毒复制、肿瘤基因治疗方面。细胞内免疫技术已在抗HIV、HBV、流感病毒的研究中表现出了显著的抗病毒复制的功能(Muhammad等,2009;Fujimoto等,2013)。通过制备单克隆抗体,解析单链抗体基因,利用基因转导技术在细胞内表达,从而结合流感病毒功能蛋白的某些部位,干扰流感病毒复制及组装,达到抗病的目的。这不仅是抗流感病毒抗性基因的...  (本文共5页) 阅读全文>>

《生物技术通报》2009年09期
生物技术通报

猪流感病毒HA基因的克隆及杆状病毒转移载体的构建

鉴于猪在流感病毒种间传播的重要作用,猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)不仅引起病猪呼吸困难及其它病毒和细菌继发感染,给养猪业造成重大经济损失,而且严重威胁人类健康健康[1]。最近,H1N1猪流感病毒引发的流感疫情[2]再次证明控制猪流感的重要性。因此,开发诊断和预防猪流感的制剂显得尤为迫切。血凝素(hemagglutinin,HA)是SIV最重要的表面糖蛋白,它能特异性结合宿主细胞表面的病毒受体唾液酸-α-2,6-半乳糖和/或唾液酸--α2,3-半乳糖,介导病毒吸附敏感细胞,针对HA的抗体具有中和活性[3]。本研究从A/Swine/InnerMongolia/547/01分离株克隆了HA基因,并了构建杆状病毒表达系统的转移载体,以期通过杆状病毒表达系统获得大量、高活性HA蛋白,为研制猪流感病毒亚单位疫苗提供抗原物质。1材料和方法1·1毒株和质粒猪流感病毒A/Swine/Inner Mongolia/...  (本文共4页) 阅读全文>>

《山东畜牧兽医》2017年10期
山东畜牧兽医

猪流感病毒HA基因研究进展

猪流感是由猪流感病毒引起的一种急性、热性、高度接触性呼吸系统疾病。极易继发感染其他病,像一些细菌,病毒和寄生虫病等。使得病情更加复杂,从而提高了病猪的死亡率,给养殖业造成了巨大的经济损失。血凝素(HA)基因是流感病毒表面的主要抗原基因,变异频率很高,是病毒发生抗原变异的主要原因。HA与流感病毒感染的宿主范围和致病力密切相关,同时还能诱导机体产生中和抗体,是流感病毒最重要的一个蛋白。因此,本文对猪流感病毒的HA基因进行了综述,为进一步对猪场的流感防治以及疫苗研发提供理论依据。2016YFD0500201国家重点研发计划猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)属于正粘病毒科,A型流感病毒属,是一种单股负链RNA病毒。猪流感(Swine influenza,SI)是由A型流感病毒引起的一种急性、热性、传染性呼吸系统疾病。该病的发生无明显的季节性,但在春秋和冬季,尤其季节交替时易发,易感猪群不分年龄、性别和品种,...  (本文共2页) 阅读全文>>