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蕈样肉芽肿和B细胞淋巴瘤T细胞抗原受体γ基因重排的研究

前言蕈样肉芽肿(MF)是一种低度恶性的皮肤T细胞淋巴瘤。其早期表现可多种多样;病理上早期诊断尤其困难,多需要反复的活组织检查,有时要待病情进一步发展才能确诊。免疫组织化学技术检测MF皮损中T细胞分化抗原虽可作为辅助手段,但多难以确定皮损的良恶性。淋巴细胞恶性增殖的主要特点是克隆性增殖,在T淋巴瘤表现为T细胞抗原受体(TCR)的单克隆性重排。自八十年代以来国外学者应用Southern杂交技术(SBA)检测TCR-β基因重排,或聚合酶链反应技术(PCR)检测TCR-γ基因重排,但由于Southern杂交技术需要新鲜的标本,且肿瘤细胞的数量占总被检查数量的1%-5%才能检测出,费力、耗时、且具有放射性,故目前已被PCR技术取代。由于γ基因重排几乎出现在所有T淋巴细胞及T淋巴细胞瘤,且结构简单,故PCR法简便易行。目前国外采用的技术为聚合酶链反应(PCR)/琼脂糖凝胶电泳、聚合酶链反应(PCR)/聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、聚合酶链  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>

第一军医大学
第一军医大学

T细胞淋巴瘤TCRγ基因重排特征分析及检测方法的优化

研究背景与目的淋巴瘤在组织和细胞形态学方面与高度反应增生性淋巴组织的鉴别诊断十分困难,容易造成误诊。淋巴瘤病理诊断是临床病理工作的难题之一。目前国内主要依靠以形态学为主、免疫组化为辅的诊断手段。随着分子生物学的发展,从基因水平研究和分析诊断疾病的技术不断出现并且日趋成熟,为淋巴瘤诊断提供了有效工具。淋巴瘤是由单克隆淋巴细胞增生所致,而反应增生性淋巴组织则来自于多克隆淋巴细胞,这是二者的重要区别。编码免疫球蛋白(Ig)或T细胞受体(TCR)的基因经过重排以后,不同克隆之间的重排基因互不相同,因此,基因重排对淋巴瘤的诊断具有特异性价值。以PCR技术为基础的方法以其简便、高效、廉价及适用面广而在淋巴瘤基因重排研究方面越来越受重视。但不同研究文献中所采用的引物、PCR条件、PCR产物检测方法等都不尽相同,结果也有差异。因此,难以找到适于常规临床病理诊断之用的标准程序。Jurkat细胞是T细胞淋巴瘤基因重排研究中常用的阳性对照细胞,但有关...  (本文共94页) 本文目录 | 阅读全文>>

山西医科大学
山西医科大学

急性白血病MLL基因重排的检测及临床特点研究以及基因断裂融合检测新方法初探

目的1研究急性白血病(acute leukemia,AL)中混合谱系白血病(mixed lineage leukemia,MLL)基因重排的多重巢式(multiplex nested)RT-PCR方法检测,并探讨其生物学和临床特点。2研究AL中MLL基因重排在监测微小残留病(minimal residual disease,MRD)中的作用和意义。3建立一种检测RARfα、AML1及MLL等基因断裂融合的新的筛选方法。方法1 MLL基因重排的检测1.1对171例AML和76例ALL患者用Multiplex Nested RT-PCR方法进行MLL基因重排的检测,选取转录因子E2A作为内对照同步进行转录和扩增。检测的MLL基因重排包括MLL/AF4、MLL/AF6、MLL/AF9、MLL/AF10、MLL/AF17、MLL/EL、LMLL/ENL、MLL/AFX1、MLL/IP、MLI/1Q和MLL-PTD等11种。1.2流式细胞...  (本文共79页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国循证儿科杂志》2019年02期
中国循证儿科杂志

Ig/TCR基因重排在儿童急性T淋巴细胞白血病中的表达模式特点

在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中,T细胞ALL(T-ALL)占10%~15%,其早期诱导死亡率高,缓解后易复发,预后明显较前体B细胞ALL差[1]。定量监测微小残留病(MRD)水平有助于精确评估ALL患儿的复发风险,指导治疗方案和化疗强度的调整,实施个体化精准治疗[2]。免疫球蛋白(Ig)和T细胞受体(TCR)合称淋巴细胞抗原识别受体,在干细胞向淋巴细胞分化过程中,Ig/TCR原先分隔的胚系基因片段V、(D)、J发生重排,所形成的连接区序列可作为肿瘤特异性的标志来追踪MRD[3]。Ig/TCR基因重排模式在T-ALL与B前体ALL中不同,T-ALL中MRD水平及其对预后的意义与B前体ALL相比也有一定的差异[4]。本研究采用欧洲BIOMED-2协作组提出的标准化Ig/TCR基因重排PCR扩增体系[5,6],对儿童T-ALL初诊时抗原受体基因重排进行检测,以获取患儿特异性Ig/TCR基因克隆性重排的基因序列信息,为检测MRD提...  (本文共6页) 阅读全文>>

《白血病.淋巴瘤》2007年03期
白血病.淋巴瘤

急性髓系白血病混合谱系白血病基因重排的表达及临床特点

染色体易位是恶性造血系统疾病常见的遗传学改变,染色体1 lq23易位导致了位于11q23的混合谱系白血病(mixed line卿leukemia,MLL)基因发生重排,MLL基因重排包括易位、缺失和重复等,可见于5%一10%的急性髓系白血病(AML)患者。近年来的研究表明,涉及MLL基因重排的白血病大多恶性程度高,缓解率低,已成为急性白血病中的一个特殊亚型。MLL基因异常在白血病发病机制中有重要意义,并且可作为微小残留病(MRD)的分子检测。我们对10例MLL基因重排AML患者的临床特点进行了分析,现报道如下。1资料与方法1.1临床资料2005年10月至2007年1月山西医科大学第二医院就诊的初治AML患者98例。其中男性57例,女性39例,年龄16一72岁。1.2细胞形态学检查骨髓涂片以瑞特染色后常规检查,结合细胞化学染色,进行FAB诊断和分型。1.3免疫分型采用活细胞三色荧光标记,流式细胞仪(美国Coulter公司)检测,标...  (本文共3页) 阅读全文>>

《临床医药实践》2003年04期
临床医药实践

急性淋巴细胞性白血病T细胞受体γ链基因重排的检测及临床意义

近 2 0年来 ,随着化疗及造血干细胞移植技术的不断提高 ,急性淋巴细胞性白血病在治疗上取得了很大的进展。目前 ,90 %以上的儿童及 75 %以上的成人 AL L患者通过化疗可以获得完全缓解 (CR) ,甚至痊愈 [1] 。然而 ,仍然有 3 0 %的儿童 AL L 及 5 0 %以上的成人 AL L 患者 ,最终复发 ,死于白血病。复发的主要根源 ,是体内的微小残留病 (MRD) [2 ]。MRD指白血病患者经过现代治疗 ,按目前已制定的疗效标准获得 CR后体内残存微量白血病细胞的状态。这些细胞从形态学上无法辩认 ,只能通过免疫学、分子生物学及细胞遗传学等方法 ,采用灵敏度高 ,特异性强的技术进行检测 ,MRD的检测和定期监测 ,对于临床指导治疗 ,判断预后具有重要意义。本研究应用多聚酶链反应 (PCR)技术及限制性内切酶分析 AL L 患者 T细胞受体 (TCR) γ基因重排并以此为标志监测 AL L 患者的 MRD。为临...  (本文共3页) 阅读全文>>