分享到:

大鼠脊髓损伤后组织基因表达谱动态变化的研究

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是骨科临床工作中常见的伤病,致残率很高。但迄今为止,有关脊髓损伤的研究尚无突破性进展,临床上对脊髓损伤患者的治疗收效甚微,绝大多数患者仍无法逃脱肢体伤残的命运。目前的研究一般将脊髓损伤分为原发性及继发性损伤两个阶段,前者是指脊髓在暴力作用瞬间所受伤害,这是依客观而定,无法随主观改变的一个阶段;后者系在此基础上发生的一系列复杂的生理生化过程,进一步加重了原有的组织损伤,导致了脊髓损伤的难治性。目前尽管存在着多种理论或假说,但它们都只是从某一个或几个方面来阐述继发性脊髓损伤的机制,虽有不同作者提出了许多相应的实验性治疗措施,其效果是有限的,尚无实质性的突破。究其原因,可能是研究方法、研究对象的局限性与疾病发展过程中多因素参与的复杂性之间的矛盾所致,以上所述的各种理论可能是疾病发生过程的各个方面,它们应该构成一个相互联系的有机整体,而以整体的观念来探讨继发性脊髓损伤的发生机制,可  (本文共68页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国临床康复》2003年17期
中国临床康复

脊髓损伤后组织基因表达谱的变化

0引言基因芯片又称DNA微矩阵(DNAmicroarray),可以快速而高通量的检测基因在mRNA水平的表达信息,可全面的了解组织损伤后基因表达变化情况犤1犦。本文利用表达谱基因芯片技术,初步研究了脊髓损伤后组织基因表达谱的动态变化。1材料和方法1.1材料健康成年SD大鼠9只(解放军第一军医大学实验动物中心提供),体质量300~400g,雌雄不拘,随机数字法分为无损伤组及损伤2,48h组,每组3只。基因表达谱芯片系统,型号H20s,购自上海博星(Biostar)基因芯片公司。1.2方法1.2.1动物模型制备以100g/L水合氯醛(400mg/kg)行腹腔内注射麻醉,将大鼠置于俯卧位,严格无菌操作下,取后正中切口,切除T8~12双侧全椎板,暴露硬膜囊,损伤组参照Allen打击法,以75g·cm打击力制成脊髓闭合性损伤模型。无损伤组在切除椎板后即直接切取脊髓组织,而损伤组分别在损伤后2、48h切取伤段脊髓组织,组织切取后立即置于液氮...  (本文共4页) 阅读全文>>

中国人民解放军军医进修学院
中国人民解放军军医进修学院

白血病细胞WT1基因的表达机理

WT1基因位于染色体11P13上,被认为是一个肿瘤抑制基因,编码产生一种具有锌指结构的转录因子,在正常造血及白血病的发生和发展中起着重要作用。WT1基因表达能部分地抑制维甲酸或维生素D3诱导的白血病细胞系的分化过程。WT1基因在正常骨髓及外周血中的CD34~+CD33~-细胞中表达,但表达水平很低;多数急性白血病均有WT1基因表达,慢性粒细胞白血病慢性期及慢性淋巴细胞白血病细胞无表达。基因启动子区DNA甲基化水平在基因表达调控中起着重要作用,DNA超甲基化常抑制基因表达,文献报告一些实体瘤WT1基因发生了甲基化,但并未影响其表达;白血病细胞WT1基因启动子区DNA甲基化水平以及甲基化与WT1基因表达的关系尚未见文献报告。我们在甲基化敏感PCR(MS-PCR)的基础上进行改良,结合内切酶消化的新技术对白血病细胞系WT1基因启动子区DNA的甲基化水平及DNA超甲基化对WT1基因表达的影响进行了研究,在此基础上又进一步研究了去甲基化处...  (本文共79页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军军事医学科学院
中国人民解放军军事医学科学院

Pten基因敲除小鼠转录上调新基因pdd87的功能研究及Pten缺失的胚胎成纤维细胞的蛋白质组分析

Pten作为第一个被发现的具有磷酸酶功能的抑癌基因,是目前肿瘤研究的热点基因之一。本研究工作是在已建立的Pten基因敲除胚胎成纤维细胞系MEF1/Pten-/-和MEF2/Pten-/-及基因芯片法识别PTEN调控的未知基因研究的基础上开展的,目的是对Pten基因敲除胚胎成纤维细胞系的特性进行进一步鉴定及研究一个在Pten基因敲除胚胎成纤维细胞中高表达的新基因pdd87的功能。首先,我们对引进的Pten基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞系MEF1/Pten-/-和MEF2/Pten-/-细胞中PTEN的表达情况及其细胞周期变化进行了研究。试验结果表明PTEN在Pten基因敲除的小鼠胚胎成纤维细胞中不表达,而在正常胚胎成纤维细胞中PTEN是正常表达的,以它们为实验模型进一步研究PTEN的功能是可靠的。Pten基因敲除的小鼠胚胎成纤维细胞系MEF2/Pten-/-与MEF1/Pten-/-相比其S期细胞比例更高。两个细胞系的AKT信号转导通...  (本文共81页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军军事医学科学院
中国人民解放军军事医学科学院

两条新的肺癌转移相关基因的获取、鉴定与功能研究

肿瘤细胞转移能力的获得是多种基因的结构、功能和表达情况改变积累的结果。Filder提出的肿瘤异质性学说以及Wessinman提出的将细胞表型与其基因结构及表达的特征相联系的表型克隆思想为认识这些差异基因提供了基础。因此,在本研究中,我们应用基于表型克隆原理的抑制消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)技术,以源于同一母系但具有不同转移能力的一对肺巨细胞癌细胞株为模型,寻找与肺巨细胞癌转移促进相关的基因,并对其中的两条基因进行生物功能验证和作用机制的初步探讨。在SSH实验中,以具有高转移能力的人肺巨细胞癌细胞株PLA-801D为实验方,以不具转移能力的细胞株PLA-801C为驱动方进行杂交,将杂交产物经PCR扩增、纯化后连接至pGEM-Teasy载体并转化JM109大肠杆菌,最终得到了566个含有cDNA差异表达片段的单克隆细菌菌落。经PCR确认这些细菌克隆中含有长度在250-...  (本文共103页) 本文目录 | 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

骨髓增生异常综合征患者的基因表达谱研究

骨髓增生异常综合征(MDS)是一组起源于造血干细胞的克隆性疾病,表现为全血细胞减少、骨髓病态造血,患者高风险转化为急性白血病,被认为代表着白血病发生的前期过程。根据骨髓中原始细胞和铁粒幼细胞比例、外周血单核细胞数量,FAB协作组将MDS分为(1)难治性贫血(RA);(2)伴有铁粒幼细胞的难治性贫血(RAS);(3)原始细胞增多的难治性贫血(RAEB):(4)转化中的RAEB(RAEBt):(5)慢性粒单核细胞白血病(CMML)。迄今为止,形态学异常仍然是诊断MDS的重要标准。然而,由于各系细胞病态造血表现轻重不一,有些患者仅表现为单系异常如特发性大红细胞性贫血、单纯性中性粒细胞减少或血小板较少甚至没有明显病态造血现象,这些“早期MDS”或“not yet MDS”有时与巨幼细胞性贫血(MA)、缺铁性贫血(IDA)等增生性贫血和慢性再生障碍性贫血(CAA)难以鉴别。染色体异常为疾病的克隆性提供了诊断性依据,但其检出率仍不高。因此,...  (本文共80页) 本文目录 | 阅读全文>>