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RANKL对成人骨髓间质干细胞向神经细胞分化的影响研究

长期以来,人们一直认为人和成年哺乳动物中枢神经系统不存在神经干细胞(Neural stem cells, NSCs),脑和脊髓中神经元一旦死亡,将不能再生。直到1992年,Reynolds等首先报道从成年哺乳动物纹状体中培养出多潜能神经干细胞,彻底打破了这一传统观念。近年来,胚胎和神经干细胞移植在治疗多种神经系统变性疾病中获得成功,NSCs开始广泛用于神经再生、修复和功能重建研究。但因受来源和道德、伦理方面的限制,人NSCs不易获得;目前建立的NSCs系又绝大多数来源于鼠类,与人存在显而易见的种属差异。因此,人们正在积极寻求一种更为理想的、可替代NSCs的干细胞来源。大量研究证实骨髓间质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)具有多种分化潜能,在适当条件下可分化为成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、脂肪细胞、心肌细胞、血管内皮细胞、肝细胞、韧带、真皮甚至神经细胞。最近有人采用脑源性神  (本文共137页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中医研究》2010年05期
中医研究

锁阳含药血清对骨髓间质干细胞向神经细胞分化的影响

骨髓间质干细胞是一种具有多向分化能力的细胞。近年来研究发现,骨髓间质干细胞在特定条件下还可以向心肌细胞、神经细胞、脂肪细胞等分化[1-4]。本研究遵照中医学“肾主藏精,精聚生髓,髓聚为脑,精可化血”等传统理论,结合现代科技方法,从微观水平研究补肾中药锁阳药物血清对骨髓间质干细胞向神经细胞分化的影响,报道如下。1材料与方法1.1动物4周龄SD大鼠,雌雄不拘,体质量250~300 g,由甘肃中医学院SPF级实验动物中心提供。动物合格证号为SCXKC(甘)2004-0006-0000204,实验动物使用许可证号为SYXK(甘)2004-0006-0000094。1.2主要试剂与仪器锁阳由甘肃中医学院附属医院药房提供;β-巯基乙醇,上海生物工程公司产品,批号200709;Nestin、NSE、GFAP免疫试剂盒,上海博士德生物有限公司产品,批号200711;DMEM培养液等。二氧化碳培养箱,BB16UV型,德国Heraeus公司产品;超...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国老年学杂志》2011年20期
中国老年学杂志

熟地含药血清对骨髓间质干细胞向神经细胞分化的影响

骨髓间质干细胞(MSCs)是一种具有多向分化能力的细胞,利用MSCs的分化有望在治疗脑出血、脑损伤和神经系统退行性疾病方面发挥重要作用〔1〕。本研究按照祖国医学“肾主藏精,精聚生髓,髓聚为脑,精可化血”的传统理论,按照现代科技手段从细胞与分子水平不同层次,研究补肾中药熟地药物血清诱导MSCs向神经细胞分化的作用。1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物4周龄SD大鼠,雌雄不拘,由甘肃中医学院SPF级实验动物中心提供,动物合格证号:SCXKC(甘)2004-0006-0000204;实验动物使用许可证号:SYXK(甘)2004-0006-0000094。1.1.2主要试剂及设备DMEM(Dulbecco's Modified EagleMedium)培养液,美国GIBCO公司;胎牛血清(FBS),甘肃省兰州市明海生物材料工程研究所;胰蛋白酶,美国GIBCO公司;二氧化碳培养箱(BB16UV型),德国Heraeus公司;超净工作...  (本文共3页) 阅读全文>>

《江苏大学学报(医学版)》2011年02期
江苏大学学报(医学版)

成人骨髓间质干细胞向神经干细胞的诱导分化

起源于中胚层的骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)是干细胞家族的重要成员,具备干细胞的自我扩增和多向分化特性[1]。BMSCs不仅可被诱导分化为骨、软骨和心肌细胞[2],亦可诱导跨胚层分化(transd ifferentiation)为神经细胞和神经胶质细胞[3-6]。因此,BMSCs被认为是自体移植治疗神经系统损伤的具有临床应用前景的种子细胞之一[7]。但是中胚层来源的BM-SCs具有向结缔组织细胞自然分化的趋势。在体外培养扩增的过程中BMSCs向神经分化的潜能是否可长期维持有待研究。我们先前的研究结果表明,第5代的BMSCs向神经细胞分化的能力明显降低[8]。因此我们认为,将BMSCs诱导分化为神经干细胞,并在体外扩增和维持细胞的干性(stemness),有利于该细胞移植入体内神经组织后,在局部微环境的诱导下自发性分化,以更好地修复神经系统损伤。基于上述观点,本研...  (本文共5页) 阅读全文>>

南京师范大学
南京师范大学

骨髓间质干细胞诱导分化及致瘤特性研究

骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一类成体干细胞,主要分布在骨髓基质中,属于非造血组织的间质干细胞,具有多向分化潜能。近年骨髓MSCs的多向分化潜能倍受关注。虽然在骨髓有核细胞中MSCs含量较少,但它的易贴壁性,分离纯化简单,扩增迅速,可长期传代,而且在不同的条件下能分化为多种组织,引起科学家的极大兴趣,尤其是骨髓MSCs定向分化为心肌、神经、骨细胞等,为细胞工程治疗心肌梗死、肌组织损伤、神经细胞和组织损伤、骨和软骨组织损伤提供干细胞的来源。实验研究开展了成人、胚胎、猪骨髓MSCs的分离纯化及体外培养,成人骨髓MSCs在原代培养3d后,可见单个或少量成集落生长的贴壁细胞,形态大多呈短梭形或针尖状,10-15d后,细胞集落不断扩大并形成融合单层,大多呈长梭形或多角形,经传代后呈均匀分布生长,成人和胚胎骨髓MSCs体外扩增10代的细胞数约分别为(1~5)×10~9和(5~10)×10~(12)...  (本文共168页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军军医进修学院
中国人民解放军军医进修学院

RANKL/OPG在强直性脊柱炎外周关节骨质破坏病理机制中的作用

目的:本研究拟通过检测RANKL、OPG和CD68蛋白在强直性脊柱炎(AS)外周关节滑膜组织中的表达,并以类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)患者和健康对照者的外周关节滑膜组织为对照,了解细胞核因子кB受体活化因子配基(RANKL)、护骨素(OPG)和代表单核/巨噬细胞标记的CD68蛋白表达与AS患者炎性关节病理改变及疾病活动性的相关性,试图从炎性关节局部RANKL/OPG平衡调节这一角度进一步探讨AS关节炎症及骨质破坏的发病机制,为AS病情评判与治疗提供理论基础。方法:应用单克隆抗体,通过免疫组织化学方法检测13例AS、16例RA、17例OA及6例健康对照关节滑膜组织中RANKL、OPG、CD68蛋白表达及分布状况;鉴于抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)是破骨细胞或前体细胞的一种标志酶,本研究还采用酶组织化学法分析各组滑膜组织TRAP染色阳性细胞表达及分布状况,通过计算机辅助图象分析系统和半定量分析方法确定RANKL、OPG、C...  (本文共103页) 本文目录 | 阅读全文>>

中南大学
中南大学

脂联素调节成骨细胞OPG/RANKL的表达和TIMP-3诱导成骨细胞凋亡

第一部分脂联素对成骨细胞OPG和RANKL表达的影响及细胞信号转导机制研究第一章脂联素对成骨细胞OPG和RANKL表达的影响目的:脂联素(adiponectin)是脂肪细胞的特异性分泌因子,成骨细胞可表达脂联素受体,但脂联素对成骨细胞的作用机制尚未阐明。本研究首次探讨脂联素对人成骨细胞护骨素(osteopotegrin,OPG)和核因子κB受体活化素配体(receptor activator of NF-kappaB ligand,RANKL)表达的作用。方法:RT-PCR及Western印迹检测体外培养的人成骨细胞的脂联素受体(adiponectin receptor,AdipoR)mRNA及AdipoR蛋白表达。分别用0、3μg/ml、10μg/ml和30μg/ml脂联素干预人成骨细胞48 h,或分别用0、30μg/ml脂联素干预人成骨细胞0h、12h、24h和48h,干预前后OPG、RANKL的mRNA及蛋白表达分别用Re...  (本文共78页) 本文目录 | 阅读全文>>