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人N端脂多糖结合蛋白(tLBP)基因的克隆表达及保护作用的研究

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·第三军医大学

经适当修饰改造的N-末端截断型脂多糖结合蛋白(truncated LBP,tLBP)是一种基因片段长约0.7kb,分子量27kDa,含有亲代分子197个氨基酸的多肽,在分泌至内质网时切割下N-末端25个氨基酸的信号肽。该分子保留了与LPS作用的结合域, 可能更有效地结合LPS,但不能转移LPS到CD14,从而可阻止LPS-CD14的形成,进而抑制单核/巨噬细胞过度分泌炎性细胞因子。发挥着与亲代分子LBP竞争结合LPS或中和LPS的作用,但有关tLBP的确切生物学活性以及与LPS的中和作用仍不十分清楚。本课题在已获得人LBP全长cDNA的基础上,设计了扩增tLBP基因的引物,成功克隆到目的基因片段,并顺利插入杆状病毒转移载体pFASTBAC以及完成了目的基因的特异转座和病毒重组,成功构建了杆状病毒表达系统。应用Sf21昆虫细胞和BAC-TO-BAC杆状病毒表达系统、TALON金属鏊合层析等方法表达纯化了重组的人N末端脂多糖结合蛋白  (本文共82页) 本文目录 | 阅读全文>>