分享到:

mTOR、MPF在细胞及口腔肿瘤生长与增殖中的调控作用

目的1.利用同步化的Hela细胞,观察在细胞周期不同时相,哺乳动物的雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)及其底物p70 S6K的α1、α2、β1、β2不同亚型及4EBP1的表达有何区别,从而阐明mTOR与细胞周期间的关系。2.探讨mTOR及其底物在口腔鳞状细胞癌中的表达和意义。3.研究mTOR/p70 S6K信号通路激活在腮腺腺泡细胞癌、腮腺腺癌发生中的作用。4.研究mTOR/eIF-4EBP1信号通路激活在口腔粘液表皮样癌发生中的作用。5.通过对口腔正常组织与混合瘤、高分化粘液表皮样癌及颊癌中M期促进因子(M-phase promoting factor,MPF)的存在状态及活性的比较,探讨MPF与口腔肿瘤的发展及恶性度之间的关系。方法1.Hela细胞培养及细胞周期同步化Hela细胞(人宫颈癌传代细胞系)由日本神户大学生物信号研究中心提供。将细胞接种于含DMEM培养基的培养皿中  (本文共80页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国医科大学
中国医科大学

mTOR及其底物S6K1在小鼠受精卵中的表达及作用

前言mTOR(mammalian target of rapamycin)蛋白是一种结构与功能保守的蛋白质,是磷脂酰肌醇激酶相关激酶家族成员,具有丝/苏氨酸激酶活性,是调节细胞生长的中心调控因子。mTOR受生长因子、胰岛素、营养物质、ATP等的调节,并通过其下游靶蛋白S6K1、4EBP1调控蛋白质的翻译,促进细胞生长,抑制细胞凋亡,并与肿瘤的发生有关,在一些经原癌基因转化的细胞中,mTOR处于持续的活化状态。mTOR对细胞周期也有调控作用,促进G1期细胞进入S期。此外mTOR在胚胎的早期发育中也起到关键性的作用,因为敲除mTOR基因的小鼠在着床后很快死亡,S6K1和S6K2基因敲除的小鼠多在围产期死亡。但是在胚胎发育中mTOR以及S6K1的具体作用到底是什么,该作用从什么时候开始还不清楚。本实验主要研究受精卵中mTOR、S6K1的表达、分布及作用。从而使我们一方面对mTOR信号途径的生理作用有进一步的认识,另一方面也更加深我们对...  (本文共66页) 本文目录 | 阅读全文>>

中南大学
中南大学

雷帕霉素阻断mTOR信号通路抑制病毒性心肌炎心肌纤维化的实验研究

目的哺乳类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路在细胞的生存、生长与增殖中起中心调控作用,本研究用柯萨奇病毒B3m株(coxsackievirus B3m,CVB3m,CVB3)感染体外培养的SD大鼠心肌成纤维细胞和心肌细胞,建立病毒性心肌炎(viral myocarditis,VM)的细胞模型,用雷帕霉素(mpamycin)阻断mTOR信号通路,了解mTOR信号通路在VM心肌纤维化的可能作用机制。方法取新生SD鼠,用改良法原代培养心肌成纤维细胞和心肌细胞,根据细胞形态和免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定,建立CVB3感染的细胞模型。用mTOR抑制剂——雷帕霉素对细胞模型进行干预,采用RT-PCR、Western Blot、免疫细胞化学染色等方法检测细胞mTOR、eIF-4E、Ⅰ型胶原及Smad3表达,应用SPSS11.5统计软件对数据进行统计学分析,P<0.05为差别有显著性...  (本文共104页) 本文目录 | 阅读全文>>

郑州大学
郑州大学

食管鳞癌中mTOR/p70S6K信号通路的作用及其阻断策略

雷帕霉素靶蛋白(target of rapamycin,mTOR)信号通路在肿瘤发生发展中起重要作用,因而也越来越受到人们的关注。mTOR是一种非典型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,属于磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶(PIKK)家族。在哺乳动物中,mTOR下游有两个主要的靶分子,一个是核糖体S6激酶(S6K),另一个是真核翻译起始因子(eIF4E)结合蛋白1(4E-BP1)。mTOR的激活导致了S6K和4E-BP1的磷酸化,磷酸化的4E-BP1可以从帽-依赖性翻译起始因子eIF4E上释放出来,最终增强了与细胞生长有关的基因的翻译。这两个过程也可能与其他的mTOR靶点一起增强了核糖体的生物合成及一些特殊mRNA的选择性翻译。许多研究证明,mTOR被认为是肿瘤治疗中重要且有前景的治疗靶点,其抑制剂目前正在进行临床及临床前研究,试用于多种癌症如肾细胞癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌及小细胞肺癌等。食管鳞癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,尤其在我国河南...  (本文共165页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川大学
四川大学

间变性大细胞淋巴瘤中间变性淋巴瘤激酶、survivin及mTOR信号通路的研究及其临床意义

【背景和目的】间变性大细胞淋巴瘤是一种较少见的、T或null细胞性非霍奇金淋巴瘤。约60%~85%的ALCL病例表达ALK融合蛋白。ALK可通过激活PLC-γ、JAK/STAT、PI3K/AKT等信号通路,引起细胞生长和凋亡调控失调导致肿瘤发生。在JAK/STAT通路中,活化STAT3可诱导抗凋亡基因bcl-X_L及survivin的表达。survivin是抑制细胞凋亡和调节细胞分裂的一种蛋白。survivin的表达与肿瘤侵袭性和不良预后有关。可用于研究肿瘤发病、诊断、治疗及预后判断。在PI3K/AKT通路中,活化的AKT激活mTOR蛋白,调节mRNA的翻译。mTOR通过激活其下游蛋白4E-BP1和p70S6K促进蛋白翻译和合成。现已发现,许多肿瘤伴有mTOR通路上调。本研究的第一部分通过检测81例系统性ALCL病例中ALK、survivin及磷酸化的AKT、mTOR、4E-BP1、p70S6K的表达,并结合ALCL组织学形态、...  (本文共113页) 本文目录 | 阅读全文>>

北京大学
北京大学

siRNA敲减雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因抑制增殖性玻璃体视网膜病变的实验研究

目的:研究使用雷帕霉素靶蛋白(mTOR)特异siRNA敲减mTOR基因对增殖性玻璃体视网膜病变的影响。方法:将三对化学合成的siRNA分别转染入D407人RPE细胞株,检测其对细胞的增殖、黏附、伸展、迁移的影响;使用实时定量PCR检测其对胶原mRNA的影响;使用酶联免疫吸附实验(ELISA)和细胞免疫组织化学法检测其对细胞外、内I、III、IV型胶原分泌的影响。使用人RPE细胞注入兔眼玻璃体腔制作PVR模型,同时将1对化学修饰的siRNA注射入兔眼玻璃体腔,检测其对体内胶原表达及PVR病变的影响。结果:使用siRNA将mTOR基因敲减82%可以显著降低细胞的伸展、迁移、胶原mRNA含量、细胞外和细胞内I、III、IV型胶原蛋白分泌。化学修饰的siRNA能抑制体内胶原蛋白的分泌,能将PVR实验眼视网膜脱离的发生率由100%(阴性对照组)降至50%。结论:mTOR特异siRNA能抑制RPE细胞的伸展和迁移,抑制人RPE细胞I型、II...  (本文共76页) 本文目录 | 阅读全文>>